《维生素c检测方法》由会员分享，可在线阅读，更多相关《维生素c检测方法（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、水果、蔬菜维生素C含量测定法（2,6 二氯靛酚滴定法）【标准名称】水果、蔬菜维生素C含量测定法（2,6 二氯靛酚滴定法）【标准号】GB 6195-86【标准文件】GB 619586GB 619586水果、蔬菜维生素C含量测定法（2,6 二氯靛酚滴定法）（经济作物-瓜果、蔬菜种植与产品）1适用范围本标准适用于果品、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定（不含二价铁、二价锡、一 价铜、二氧化硫、亚硫酸盐或硫代硫酸盐），不适用于深色样品。2测定原理染料2, 6-二氯靛酚的颜色反应表现两种特性，一是取决于其氧化还原状态，氧化态为深蓝 色，还原态变为无色；二是受其介质的酸度影响，在碱性溶液中呈深蓝色，在
2、酸性介质中呈 浅红色。用蓝色的碱性染料标准溶液，对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定，染 料被还原为无色，当到达滴定终点时，多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色，由染料 用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。3仪器设备a.高速组织捣碎机：800012000r/min。b.分析天平。c.滴定管：25ml、10ml。d.容量瓶：100ml。e.锥形瓶：100ml、50ml。f.吸管：10ml、5ml、2ml、1ml。g.烧杯：250ml、 50ml。h.漏斗。4试剂（凡未加说明者均为分析纯）4.1浸提剂4.1.1偏磷酸：2%溶液（W/V）* *偏磷酸不稳定，切勿加热。4.1.2 草酸：2%溶液（
3、W/V）。4.2抗坏血酸标准溶液（1mg/ml）：称取100mg （准确至0.1mg）抗坏血酸*，溶于浸提剂 中并稀至100ml。现配现用。*一般抗坏血酸纯度为99.5%以上，可不标定。如试剂发黄， 则弃去不用用。若要检查其纯度，可按附录B方法标定。4.3 2，6-二氯靛酚（2, 6-二氯靛酚吲哚酚钠盐）溶液：称取碳酸氢钠52mg溶解在200ml 热蒸馏水中，然后称取2, 6-二氯靛酚50mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中。冷却定容至250ml， 过滤至棕色瓶内，保存在冰箱中。每次使用前，用标准抗坏血酸标定其滴定度。即吸取1ml 抗坏血酸标准溶液于50ml锥形瓶中，加入10ml浸提剂，揺匀，用2，6
4、-二氯靛酚溶液滴定 至溶液呈粉红色15s不褪色为止。同时，另取10ml浸提剂做空白试验。滴定度按式（1） 计算：滴定度 T （mg/ml） =C V/（V1-V2） （1）式中：T每毫升2，6-二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数；C抗坏血酸的浓度，mg/ml；V 吸取抗坏血酸的体积，ml；VI 滴定抗坏血酸溶液所用2，6-二氯靛酚溶液的体积，ml；V2滴定空白所用2，6-二氯靛酚溶液的体积，ml。4.4白陶土（或称高岭土）：对维生素C无吸附性。5测定步骤5.1样液制备：称取具有代表性样品的可食部分100g,放入组织捣碎机中，加100ml浸提剂， 迅速捣成匀浆。称1040g浆状样品，用浸提剂将样
5、品移入100ml容量瓶，并稀释至刻度， 摇匀过滤。若滤液有色，可按每克样品加0.4g白陶土脱色后再过滤。5.2滴定：吸取10ml滤液放入50ml锥形瓶中，用已标定过的2，6-二氯靛酚溶液滴定，直 至溶液呈粉红色15s不褪色为止。同时做空白试验。6结果计算6.1计算公式：维生素C按式（2）计算：维生素 C （mg/100g） =（V-V0）TA/WX100 （2）式中：V滴定样液时消耗染料溶液的体积，ml；V0滴定空白时消耗染料溶液的体积，ml；T2，6-二氯靛酚染料滴定度，mg/ml；A稀释倍数；W样品重量，go6.2平行测定的结果，用算术平均值表示，取三位有效数字，含量低的保留小数点后两位数
6、 字。6.3平行测定结果的相对相差，在维生素C含量大于20mg/100g时，不得超过2%,小于 20mg/100g时，不得超过5%o附录A二甲苯-二氯靛酚比色法（补充件）A.1适用范围测定深色样品中还原型抗坏血酸。A.2测定原理用定量的2, 6-二氯靛酚染料与试样中的维生素C进行氧化还原反应，多余的 染料在酸性环境中呈红色，用二甲苯萃取后比色，在一定范围内，吸光度与染料浓度呈线性 相关，由剩余染料浓度用差减法计算维生素C含量。A.3仪器设备A.3.1分光光度计或比色计。A.3.2具塞试管：50mloA.4试剂（皆为分析纯）A.4.1偏磷酸：2%溶液（W/V）oA.4.2乙酸钠缓冲溶液（pH4.
7、0）： 500ml50%（W/V）的乙酸钠溶液与500ml冰乙酸混合。A.4.3 2，6-二氯靛酚溶液：参照4.3条。A.4.4 二甲苯。A.5测定步骤A.5.1标准曲线的绘制：用6只50ml具塞试管加入5ml2%偏磷酸和5mlpH4.0 的乙酸钠缓冲液，然后依次加入0.0，0.1，0.3，0.6，0.9，1.2及1.5ml2，6-二氯靛酚溶液， 用力摇动5s,再向各试管中加入10ml二甲苯，再激烈摇动20s，静置分层后与试样管同时 比色（无染料的试液作空白），以吸光度为纵坐标，2, 6-二氯靛酚的毫升数为横坐标绘制标 准曲线。A.5.2吸取5ml2%偏磷酸样品浸出液（参照5.1条）于50ml
8、具塞试管中，加5mlpH4.0 的乙酸钠缓冲液和2ml染料溶液，激烈摇动5s,立即加入10ml二甲苯，再激烈摇动20s, 待静置分层后，从二甲苯层中小心吸取一份，放入1cm比色杯中于500nm波长下进行比色。 记录吸光度A,在标准曲线上查出二甲苯层中2, 6-二氯靛酚的毫升数。整个操作应在30min 内完成。A.6计算公式维生素 C （mg/100g） = （2-V ）T A/WX100式中：2所用2, 6-二氯靛酚染料的体积，ml；V查得2, 6-二氯靛酚溶液的体积，ml；A一一稀释倍数；T染料滴定度，mg/ml；W样品重量，go附录B抗坏血酸纯度检验法（补充件）B.1称取100mg（准确至
9、0.1mg）抗坏血酸待测样品，用2%偏磷酸或2%草酸溶液溶解稀释 至 100ml。B.2吸取抗坏血酸溶液1ml于盛10ml2%偏磷酸或2%草酸溶液的锥形瓶中，加入6%碘化钾 溶液0.5ml和1%淀粉溶液五滴，摇匀。用1.67X10-4M碘酸钾标准溶液滴定，终点为极淡 蓝色rtn. I丄 oB.3计算公式B.3.1抗坏血酸浓度按式（B1）计算：抗坏血酸浓度=V1X0.08&V2 （B1）式中：V1滴定时消耗1.67X10-4M碘酸钾标准溶液的体积，ml；V2所取抗坏血酸溶液的体积，ml；0.0881ml1.67X10-4M碘酸钾溶液相当于抗坏血酸的重量，mg；B.3.2抗坏血酸纯度（）按式（B2）计算：抗坏血酸纯度（%） = （CV/W）X100 （B2）式中：C所标定抗坏血酸的浓度，mg/ml；V抗坏血酸溶液总体积，ml；W抗坏血酸重量，mg。
