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1、文档供参考,可复制、编制,期待您的好评与关注! 药理学实验须知一、明确药理实验的目的要求药理学实验课是药理学教学的一个重要组成部分。它的目的任务一方面是验证理论,巩固并加强对理论知识的理解;另一方面是通过实验掌握研究药物作用的基本操作方法和技能,培养对科学工作严肃的态度,严肃的方法和严格的要求,培养根据客观实际分析问题和解决问题的能力,为今后进行科学研究,打下初步基础,以便为实现中西医药结合作出贡献。药理实验包括进行实验操作(有些部分可进行病例讨论)、整理实验结果写出实验报告等环节。为了提高实验效果,实验前应作好预习,明确本次实验目的、方法步骤和原理,做到心中有数,避免实验中出现忙乱和差错。实
2、验过程中要在教师指导下加强培养独力操作能力,克服对教师的依赖性。通过实验操作要求在生理生化实验的基础上掌握固定动物和各种给药方法,掌握剂量换算和麻醉方法,学会观察记录主要生理生化指标,掌握注射器、天平、磅秤、二导生理记录仪、药理生理多用仪及描记装置等用法,掌握离体心脏、肠管、子宫和在体动物血压、呼吸及各系统药物的主要实验方法。 二、作好实验结果的处理药理实验结果有生理记录仪等记录的曲线、测量资料(如血压、心率、瞳孔大小、睡眠时间等测量的数据)和计数资料(如动物死活数、阴性和阳性反应数等数据)等几种。要如实地准确地对观察到的数据及时加以记录,决不可想当然地用主要观想象或书本理论代替实验观察到的客
3、观事实。实验完毕对结果分别加以整理。记录曲线要加以剪裁。注明动物性别、体重、日期、实验题目、给药剂量等。计数资料和测量资料应酌情列表或画图以便比较,使结果一目了解。 三、写好实验报告写实验报告是培养文字表达能力和概括综合分析问题能力的重要训练方法。每次实验后要求用统实验报告本写好报告,交负责教师评阅。在实验报告中要求列出实验题目、实验方法和实验结果。有时要对实验结果产生的原理或对实验结果异常的原因略加讨论。讨论不可离开实验结果去抄书。实验指导所列思考题或讨论题是为加深对实验的理解,如果与实验结果无关,不必写入实验报告。最后把实验结果加以概括性总结,写成结论。结论不是单纯重复实验结果,也不应超过
4、验证的范围任意外展,扩大讨论。实验报告要求文字简练,书写工整,措词注意科学性和逻辑性。 四、遵守实验室规则必须保持实验室肃静,严肃认真地有条不紊地进行实验,要爱护仪器,节约药品动物,防止浪费。要保持实验室清洁整齐,实验后将仪器用具整理擦洗干净,如有损坏应报告教师。 第一部分 基本知识与技术一、动物的选择在药理学实验中,常根据实验目的和要求选用不同的动物。常用的动物有蛙、小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、猫和狗等。选用动物的根据是该动物的某一系统或器官能反映受试验药物的选择作用,并符合精简节约的原则。同一类实验还可选不同的动物。如离体肠管或子宫实验可选用兔、豚鼠、小鼠或大鼠,离体血管试验常选用蛙的下肢血管
5、和兔耳血管,也可选用大鼠后肢血管及家兔主动脉条;离体心脏实验常选用蛙、兔,也可选用豚鼠;在体心脏实验可选用蛙、兔、豚鼠、猫和狗。实验用各种动物的特点如下: 1青蛙和蟾蜍:其心脏在离体情况下,能有节奏地搏动很久,因此常用于药物对心脏作用的实验。其坐骨神经腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经、对横纹肌或对神经肌接头的作用。2小鼠:适用于需大量动物的实验,如某些药物(包括抗肿瘤药)的筛选,半数致死量的测定。小鼠也适用于避孕药的实验。3大鼠:需较大体型的实验动物时选用之。如药物的抗炎作用,常用大鼠的踝关节进行实验。也可用大鼠直接记录血压或作胆管插管。还常用于观察药物的亚急性和慢性毒性。4豚鼠:因其对组胺
6、敏感,并易于致敏,故常被选用于抗过敏药,如平喘药和抗组胺药的实验。也常用于离体心房、心脏、肠管实验。又因它对结核菌敏感,常用于抗结核病药的实验治疗研究。5兔:比较容易得到,而且驯服,便于静脉注射和灌胃。常用于观察药物对心脏的作用,脑内埋藏电极可研究药物的中枢作用。由于兔体温变化较敏感,也常用于体温实验及热原检查;也适用于避孕药的实验。6猫:猫的血压比较稳定,而兔的血压波动较大,故观察血压反应猫比兔好。猫也常用于心血管药和镇咳药的实验。7狗:是记录血压、呼吸最常用的大动物。如降压药、升压抗休克药的实验。狗还可以通过训练使它顺从,适用于慢性实验。用手术做成胃瘘、肠瘘,以观察药物对胃肠蠕动和分泌的影
7、响。在进行慢性毒性试验时,也常采用狗。二、实验动物编号 狗、兔等大动物可用特殊的铝质号码牌固定耳上。 白色家兔和小动物可用黄色苦味酸涂于毛上标号。如编号110,将小鼠背部分前肢、后肢、腰部的左、中、右部共九个区域,从右到左为19号,第10号不涂黄色。三、麻醉药的选择进行在体动物实验时,宜用清醒状态的动物,这样不但接近生理状态而且有的实验必须用清醒动物。但在进行手术时或实验时动物挣扎,为了消除疼痛或减少由挣扎而影响实验结果,必须先用麻醉药品即用麻醉动物进行实验。应根据不同的实验要求和不同的动物选择麻醉药。1、局部麻醉:以2普鲁卡因给兔颈部皮下作浸润麻醉,可进行局部手术。2、全身麻醉(1) 吸人麻
8、醉:乙醚蘸在棉球上放人玻璃罩内,利用乙醚挥发的性质,经肺泡吸收,作用快,适用于小鼠、大鼠短时间麻醉。除去乙醚后麻醉很快恢复。罩内麻醉时间不可太长,以免缺氧。乙醚麻醉初期常有兴奋现象,且对呼吸道有强烈刺激性,致使呼吸道分泌增加是其缺点。乙醚易燃爆炸,使用时应避火。(2) 注射麻醉戊巴比妥钠:对巴比妥类的一种,小剂量镇静、催眠,大剂量麻醉。因为动物麻醉作用稳定,作用持续时间适中,故一般动物麻醉均可用。常用3水溶液,一次给药可维持麻醉时间24小时,各种动物常用量如下:狗:iv30mg/kg。猫、兔:iv或ip中3040mgkg。大鼠、小鼠:ip4050mgkg。乌拉坦:对呼吸抑制作用小,作用较弱。兔
9、、大鼠iv或ip 11.25gkg。氯醛糖:对血压和神经反射影响小,适合于心血管药物实验。本药溶解度小,常配成1溶液应用。狗、猫iV或ip80100mg/kg。也可与戊巴比妥钠或乌拉坦合用,可减少剂量。四、药物的剂型在动物实验中,常用的药物剂型有:水溶液、油溶液、乳剂和混悬液。1水溶液:是最方便,最常用的剂型。2油溶液:不溶于水而溶于油的药物,如挥发油、甾体化合物等,可以溶在植物油中灌胃或肌内注射。3乳剂:不溶于水而溶于油的药物,除可做成油溶液外,还可先加入少量乳化剂研匀,然后慢慢加水搅拌,做成乳剂。常用的乳化剂有吐温80,吐温60等。吐温80等也有助溶作用,因其本身有一定药理作用,故用量不宜
10、过大。4混悬液:对不易溶于水的,特别是水或油中都不易溶解的药物,可以将药物放在助悬液中搅拌或研磨,做成混悬液。助悬液的浓度以既能将药物悬浮,又不太粘稠为宜。一般用12西黄芪胶浆剂或12羧甲基纤维素(CMC),也可用35阿拉伯胶浆或5煮沸淀粉做助悬剂。但淀粉液易变质,不可久放。五、药量单位、药物浓度及剂量换算药物的重量以“克”为基本单位,容量以“毫升”为基本单位。这是衡量的公制,现将公制列表如下表1-1 公制重量与容量表单位名称简写符号折算注微克毫克克千克(公斤)毫升升ug()mggkgmll1/1000毫克1000微克1000毫克1000克1/1000升1000毫升0.32旧市钱2市斤药物溶液
11、的换算表药品溶液采用量药量mg百分浓度比例浓度10%1%0.1%0.01%0.001%0.0001%0.00001%1:101:1001:10001:100001:1000001:10000001:100000001ml1ml1ml1ml1ml1ml1ml1001010.10.010.0010.0001药物浓度是指一定量液体或固体制刑中所含主药的分量。常用以下几种表示法:1百分浓度:是按照每100分溶液或固体物质中所含药物的分数来表示浓度,简写为.由于药物或溶液的量可以用体积或重量表示,因而有三种不同的表示浓度方法。(1)重量体积(WV)法:即每100毫升溶液中含药物的克数,如5葡萄糖即每10
12、0毫升含葡萄糖5克。此法最常用,不加特别注明的药物浓度即指此法。(2)重量重量(WW)法:即每100克制剂中含药物克数,适用于固体药物,如10氧化锌软膏100克中含氧化锌10克。(3)体积体积(VV)法:即100毫升溶液中含药物的毫升数。适用于液体药物,如消毒用75乙醇即100毫升中含无水乙醇75毫升,相当于WW法75乙醇。2比例浓度:常用于表示稀溶液的浓度,例如1:5000高锰酸钾溶液是指5,000毫升溶液中含高锰酸钾1克;1:1000肾上腺素即0,1肾上腺素。3摩尔浓度(M):一升溶液中所含溶质的摩尔数称为该溶液的摩尔浓度。如0.1MNaCl溶液表示1000ml中含1molNaCl。剂量换
13、算:(1)动物实验所用药物的剂量,一般按mgkg(或g/kg)体重计算,应用时须从已知药液浓度换算出相当于每公斤体重应注射的药液量(m1),以便于给药。 例:小鼠体重10克,腹腔注射盐酸吗啡100mg/kg,药液浓度为0.1,应注射多少量(m1)? 计算方法:0.1的溶液每毫升含药物1毫克,剂量为18mgkg,小鼠体重为18g换算成公斤为0.018公斤,故l0ml0018=0.18ml。小鼠常以mg/10g计算,换算成容积时也以ml10g汁算较为方便。18g重小鼠注射0.18ml,相当于01m1/10g,再计算给其他小鼠药量时很方便。如20g体重小鼠,给0.2ml,以此类推。(2)在动物实验中
14、有时须根据药物的剂量及某种动物给药途径的药液溶量,然后配制相当的浓度以便于给药。 例:给兔静注苯巴比妥钠30mg/kg,注射量为1mlkg,应配制苯巴比妥钠的浓度是多少? 计算方法:30mg/kg相当于:1ml/kg,因此1ml药物应含30mg药物,现算成百分浓度1:30= 100:x,x=3000mg=3g,即l00ml含3克,故应配成3的苯巴比妥钠。习题:1给体重2.2kg的兔子注射30mgkg的尼可刹米注射液浓度为10,应注射多少毫升?2大鼠口服双氢氯噻嗪剂量为5mgkg,规定灌胃所需药液量为2.5ml/100g应配制的浓度是多少?3硫喷妥钠注射剂每支0.5g,免体重1.8kg,静注硫喷
15、妥钠剂量为100mg/kg容量为1m1kg,该药0.5g应配成多少ml?注射的药量是多少m1?六、动物捉拿及固定方法1小鼠右手抓住其尾,放在台上或鼠笼盖铁纱网上。然后用左手拇指及食指沿其背向前抓住其颈部皮肤。并以左手的小指和掌部夹住其尾固定在手上,另抓法是只用左手,先用食指和拇指抓住小鼠尾巴后用手掌及小指夹住其尾巴,再以拇指及食指捉住其颈部皮肤。前一方法易学,后方法稍难,但便于快速捉拿给药。2兔用手抓起它脊背近后颈处皮肤,抓的面积越大其吃重点越分散。如家兔肥大应再以另一手托住它的臀部,将吃重点承托手上。将兔作仰卧时,手仍抓住颈皮,另一手顺其腹部扶摸至膝关节,压住关节,另一人用绳带捆绑兔的四肢。使兔腹部向上固定布兔子手术台上头部则用兔头固定夹固定。3大鼠 以右手或持夹子抓住鼠尾,左手戴上防护手套或用厚布盖住鼠身作防护,握住其整个身体,并固定其头骨防止被咬伤,注意不要握力太大。勿捏其颈部以免窒息致死。根据实验需要可固定于大