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1、一、植物组织培养再生植株的途径通过两条途径完成：器官发生途径和体细胞胚发生途径。二、植物组织培养问题分析1、玻璃化vitrification：指组织培养过程中特有的一种生理失调或生理病变，试管苗呈半透明状、外观形态异常的现象，又称过度水化现象。改善措施：（1）适当提高光照强度 （2）注意通气 （3）降低培养基中NH4+浓度 （4）注意细胞分裂素和生长素的配合以及激素和K+之间的配合使用 （5）控制温度，适当进行低温处理2、 褐变browning改善措施：（1）选择适宜的外植体 (2)选择适宜的培养条件 （3）经常进行细胞筛选和材料与处理 （4）使用抑制剂 （5）使用吸附剂三、人工种子的制作人工
2、种子artificial seed：又称合成种子、活体细胞种子，指将植物离体培养的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中的类似种子的颗粒。包括：人工种皮、人工胚乳、胚状体或芽。原生质体活力测定（一） 、染色法1、 荧光素双醋酸盐（FDA）法：能发出荧光的是具有活性的原生质体，不发出荧光的为死亡的原生质体。2、 酚藏花红染料法：具有活性的原生质体均不着色，死去的原生质体立即着染成红色。3、 伊文思兰染色法：有活力的细胞不吸收染料为无色，没活力的吸收染料显兰色。（二） 胞质环流法：在显微镜下观察是否存在胞质环流来判断原生质体的活力。有胞质环流证明有活力。（三） 渗透压法：将原生质
3、体放入低渗透压溶液中，体积膨胀；放入高渗透压溶液中，体积缩小，这样可证明是有活力的原生质体。体积不变的则是死亡的原生质体。（四） 氧电极法：用氧电极测定氧的变化来判定。有活力的原生质体在光照下会进行光合作用而放出氧气，在无光照条件下进行呼吸而耗氧。缺点：融合过程繁琐，PEG可能对细胞有害。体外受精动物培育步骤：1.精子采集与体外获能、卵子采集与成熟培养 2. 体外受精 3.重组胚激活与体外培养 4.胚胎移植 5.体内发育、出生转基因方法1.直接导入法2. 载体介导法3. 花粉管通道法4. 病毒感染法十五、贴附型细胞按照体外培养细胞的形态分为：成纤维型细胞 上皮型细胞 游走型细胞 多形型细胞动物
4、细胞大规模培养存在的问题：动物细胞大规模培养的影响因素：氨离子、乳酸、甲基乙二醛、二氧化碳、渗透压、载体、细胞死亡与凋亡、参数控制杂交瘤技术hydridoma technique：将骨髓瘤细胞与免疫的动物脾细胞融合得到即能够分泌抗体又能在体外长期繁殖的杂交瘤细胞，经过克隆化培养得到可以分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞，这种技术通称为杂交瘤技术。（1）单能干细胞 monopotent stem cell：只能分化为单一类型细胞的干细胞。（2）多能干细胞multipotent stem cell：能够形成两种或两种或两种以上类型细胞的干细胞。（3）全能干细胞 almighty stem cell：具有无限分化潜能的干细胞。三要素：1.种子细胞（seed cell） 支架材料 影响因子HAT培养及筛选。有三种关键成分：次黄嘌呤（H）、氨基蝶呤（A）、胸腺嘧啶核苷（T）补充名词解释：10、次级代谢产物（secondary metabolites):是通过次级代谢合成的产物，多为分子结构复杂的小分子化合物。细胞工程：看护培养：植物固定方法（三种）动物单克隆抗体的制备：注:黑色粗体为填空红色字体为简答蓝色字体为名称解释有些的没有写答案，你们自己在书本上找一下吧，呵呵因为我现在没有拿书，呵呵
