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1、低温胁迫对甘蓝幼苗叶片抗寒性的影响作者(东北农业大学园艺学院，哈尔滨，150030)摘要:研究低温胁迫对甘蓝叶片抗寒性的影响。以甘蓝叶片为材料采用电导法测定植物组织 的抗逆性，以及通过植物组织中过氧化物酶活性的测定来分析低温胁迫对甘蓝叶片抗寒性的 影响。经电导法测定甘蓝叶片的伤害率为58.42%，低温处理前的过氧化酶活性为608U，处 理后的活性为112U，与邻组相比我组测得的甘蓝伤害率较高，通过过氧化酶活性的测定可 知甘蓝叶片具有一定程度的抗寒性 关键词：低温；甘蓝；冻害；抗寒性0前言：甘蓝是人们经常食用的主要蔬菜，它属于十字花科、芸薹属。甘蓝在整 个生长发育过程中，需要外界有一个适宜的温度
2、范围。当外界气温和地温明显低 于甘蓝所需的适宜温度，接近或超过其在这一时期生理状态所能忍受的极限最低 温就会造成胁迫和伤害。4目前。对甘蓝抗寒性的研究已总结出许多度量指 标，但细胞膜是对逆境最敏感的原始反应部位，低温胁迫时，被伤害的关键部 位是膜系统。2。低温胁迫对膜破坏的程度，即对膜透性的影响，在研究甘 蓝抗寒性方面是至关重要的指标。目前电导法已成为甘蓝抗性栽培、育种上鉴 定甘蓝抗逆性强弱的一个方法。3过氧化物酶是植物保护酶之一，它和超氧化 物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)，等组成植物的防御系统。口因此过氧 化物酶的活性也可反映甘蓝的抗寒性。1材料与方法1.1材料甘蓝(BrassOl
3、eracea-L.Var.capitataL):市售1.2方法将甘蓝叶片置于-20C冰箱中冷冻处理10分钟作为处理，另一份甘蓝叶片置于室温做对 照。1.3生理指标的测定方法过氧化物酶活性测定：愈创木酚法11、酶液的制备称取0.5g叶片、加入少量磷酸缓冲液研磨至匀浆，转入离心管中，4000r、离心10min,然后取上清液定容至10ml,备用。2、过氧化物酶活性的测定酶活性测定的反应体系，包括2.9ml0.05M磷酸缓冲液；1ml 2%H2O2； 1.0ml 0.05M愈 创木酚和0.1ml酶液。用加热煮沸5分钟后的酶液作对照，反应体系加入酶液后，立即于 37。C水浴中保温15分钟，并加入2.0m
4、l 20%的三氯乙酸终止反应，然后于470nm波长下测 定吸光值。外渗电导率测定：电导率仪法1称取叶片0.5g，打孔20片各于小烧杯中2份，其中一份做-20。低温处理15分钟，再加15mL蒸馏水，再注射器抽气使叶片沉入水下，浸泡10分钟期间多次摇动，测出电导率S1,用微波炉煮沸，测得电导率S22结果与分析表一 过氧化物酶活性(Ug-i min-i)的数据012345CK( n s/um)0.6200.6550.6910.7260.7570.772-20 C (n s/um)0.6250.6380.6450.6490.6510.653公式：过氧化物酶活性二(AA470XVt)/(WXVsX0.0
5、1Xt)经计算CK：过氧化物酶活性为608U ;冷冻：过氧化酶活性为112U表二 外渗电导率的测定的数据未煮沸煮沸Sck73.2237St(-20C)278391S0=3.35公式：L=(St1-S0)/(St2-S0)伤害度()= (Lt-Lck) / (1-Lck)X100%经计算 Lt=0.7085 lis/um ； Lck=0.2990 ns/um；伤害率为 58.42%。2.1外渗电导率的变化冷冻后的甘蓝叶片的外渗电导率比室温的要大;煮沸后的甘蓝叶片的外渗电导率比煮沸前 的要大。也就说明当植物受到逆境影响时，如高温或低温、干旱、盐渍、病原菌侵染后，细 胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使
6、细胞内的电解质外渗，以致植物细胞浸提液的电导率增 大。由此可得出，电导率越大，表明甘蓝叶片受到伤害的程度也越大。2.2过氧化物酶活性的变化经低温处理过的甘蓝叶片过氧化酶活性低于室温下测得的甘蓝叶片的过氧化酶活性，但却 并未完全消失。而过氧化酶是植物体内普遍存在的、活力较高的一种酶，它与呼吸作用、光 合作用及生长素的氧化等都有密切关系，在植物生长发育过程中，它的活力不断发生变化， 因此测量这种酶，可以反映某一时期植物内代谢的变化。&)。470越大，说明对应的过氧化 物酶活力越高，反之亦然。3讨论本次试验以甘蓝为实验材料，通过过氧化物酶活性和外渗电导率两个生理指标的 测定来研究低温胁迫对大头菜幼苗
7、叶片抗寒性的影响。植物叶片中的过氧化酶活 性越大，细胞膜的稳定性越强，植物的抗寒能力越强；过氧化酶活性越小则细胞 膜受到的伤害越大。测得的实验数据表明经低温处理过的大头菜叶片过氧化酶活 性明显低于室温下测得的过氧化酶活性，但过氧化酶活性并未完全消失，因为 SOD，POD等组成的保护酶系在清除活性氧，维持细胞的正常生命活动。大头菜 叶片受到低温胁迫后，细胞膜的通透性变大，细胞内的电解质会发生外渗，大头 菜浸泡的电导率增大表明其抗寒性降低。所测得的电导率越大，植物叶片的抗寒 性越弱，植物组织所受的伤害越大；电导率越小，植物的抗寒性越强，植物受到 的伤害越小。综合这两个生理指标可知低温胁迫会降低植物自身的抗寒性。参考文献1 郝再彬，苍晶，徐仲.植物生理学实验.哈尔滨：哈尔滨工业大学出版社，20042 王学奎.植物生理生化实验原理与技术.北京：高等教育出版社，2002： 164-165.3 朱广廉等，植物体内游离脯氨酸的测定.植物生理学通讯，1983, 19（1）： 35-36.4 张恩慧，甘蓝高效栽培关键技术，金盾出版社，2010-06, 2-35 刘健等，羽衣甘蓝的组织培养，植物生理学通讯，2001,06
