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1、2022年高考生物二轮复习 考前三个月 第一部分 第一部分 专题九 生物技术实践教案直击考纲1.微生物的分离和培养。2.培养基对微生物的选择作用。3.运用发酵加工食品的基本方法。4.制备和应用固相化酶。5.蛋白质的提取和分离。6.PCR技术的基本操作和应用。1判断下列有关传统发酵技术的叙述(1)在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长(xx江苏，21A)()(2)在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，让发酵装置接受光照并放在45 处(xx北京，1AD)()(3)在果酒和果醋制作过程中，果酒的制作过程是在缺氧条件下，而果醋整个制作过程一直处于有氧条件下(xx江苏，7AC改编)()(4)与果醋、果酒制作相比，
2、腐乳的制作所需要的适宜温度最高，所用菌种为乳酸菌(xx江苏，3AC)()(5)在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与，所用豆腐的含水量为70%左右，水分过多腐乳不易成形(xx江苏，17AB改编)()2判断下列有关微生物的培养与应用的叙述(1)常用液体培养基分离获得细菌单菌落 (xx大纲全国，5B)()(2)用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板(xx安徽，6A)()(3)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法(xx新课标全国，39)()3判断下列有关酶的研究与应用的叙述(1)多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层(xx江苏，15D)()(
3、2)CaCl2溶液的作用是使海藻酸钠形成凝胶珠(xx江苏，25B改编)()(3)利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件(xx江苏，3C)()(4)利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物(xx江苏，3D)()(5)固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显(xx江苏，3A)()4判断下列有关蛋白质技术的叙述(1)蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNA(xx江苏，23C)()(2)蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化(xx江苏，23D)()(3)利用透析法纯化蛋白酶时，应以蒸馏水作为透析液(xx江苏，3C)()重点一微生物的利用1微生物的培养(
4、1)无菌技术：主要包括消毒和灭菌。消毒方法：常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。常用灭菌方法：灼烧灭菌接种环、接种针等金属器具；干热灭菌主要针对玻璃器皿等；高压蒸汽灭菌主要针对培养基等。(2)如图为倒平板操作过程，操作时要待培养基冷却至50_左右时，在酒精灯火焰附近进行。制备固体培养基最后要将平板倒置，其主要目的是防止培养皿盖上的水珠滴入培养基造成污染。(3)平板划线操作(4)稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列梯度稀释后涂布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落。如图所示：2培养基对微生物的选择作用(1)培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌
5、。(2)培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。(3)培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物。(4)当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。(5)改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。技能点拨1平板划线操作的注意事项(1)每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。(2)灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。(3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。(4)划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。2平板划线法中的“连续划线”及稀释涂布平板法中的“系列稀释”目的是一样的，都是为了保证菌种在培养基
6、中单个分布(平板划线法中最后一次划线的末端处的菌种最纯)。对位训练1(xx新课标全国卷，39)临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：(1)为了从样本中获取致病菌单菌落，可用_法或_法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释，用_法接种于固体培养基表面，在37 培养箱中培养24 h，使其均匀生长，布满平板。(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A
7、的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明_；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的_。(4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素_。答案(1)划线稀释涂布(或涂布)(2)涂布(3)敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比A的弱耐药菌(4)A解析微生物纯化的方法主要为平板划线法和稀释涂布平板法。根据微生物的特点对其进行一系列浓度梯度稀释，然后用涂布法接种于固体培养基表面，然后在适宜条件下培养；抗生素是由真菌产生
8、的，可以抑制生长、繁殖或杀死细菌等致病菌的一类物质，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明有抗生素A的地方该致病菌受到抑制；B的周围没有透明圈，说明致病菌对抗生素B不敏感，通过C的透明圈要比A的透明圈小，说明该致病菌对C的敏感性比A的弱；D出现了透明圈，说明该致病菌对D敏感，但是在透明圈上出现一个菌落，又排除杂菌污染，判断此菌落的微生物对抗生素D产生了耐药性。根据以上分析，为达到抗菌的目的，最好选用抗生素A。2请回答下列与微生物有关的问题：(1)微生物的分布：能降解某种除草剂(一种难以降解的含氮有机物)的细菌主要分布在_的土壤中。(2)微生物的消毒和灭菌：在菊花组织培养中，对外植体常用_和氯化汞进行
9、消毒；在微生物培养中，对培养基常用_法进行灭菌。(3)微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生型_发酵产生酒精。(4)微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是下面图示中A、B两种方法。常用来统计样品活菌数目的方法是_。(5)微生物的计数：运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是_。(6)微生物的鉴定：要从土壤样液中筛选出能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明)。设计培养基配方时，从用途来看，除加入必需的营养成分外，还应_；从物理性质来看，还应加入_。接种培养后，依据培养基中是否产生_来筛选能降解该除草剂的细
10、菌。答案(1)长期使用该除草剂(2)酒精高压蒸汽灭菌(3)酵母菌(4)A稀释涂布平板法(5)当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(6)以该除草剂为唯一氮源(或“在无氮培养基中添加该除草剂”)琼脂透明圈解析(1)能降解某种除草剂(一种难以降解的含氮有机物)的细菌主要分布在长期使用该除草剂的土壤中，这是由于长期使用该除草剂，选择出了能分解利用该除草剂的变异类型细菌。(2)对外植体常用酒精和氯化汞进行消毒；在微生物培养中，对培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(3)在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生型酵母菌发酵产生酒精。(4)方法A是稀释涂布平板法，方法B是平板划线法
11、，两种方法都可以用于分离微生物，但要统计样品活菌数目应该用稀释涂布平板法。(5)当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。(6)要从土壤样液中筛选出能降解除草剂的细菌，设计培养基配方时，从用途来看，除加入必需的营养成分外，还应以该除草剂作为唯一氮源；从物理性质来看，还应加入琼脂，这样便于观察形成透明圈的情况；接种培养后，依据培养基中是否产生透明圈来筛选能降解该除草剂的细菌。重点二微生物在传统发酵技术中的应用项目内容果酒和果醋的制作腐乳制作制作泡菜作用菌类果酒：酵母菌果醋：醋酸菌毛霉假丝酵母和乳酸菌原理(1)酵母菌在无氧条件下将
12、葡萄糖氧化成乙醇；(2)醋酸菌在有氧条件下将乙醇氧化为醋酸毛霉将蛋白质、脂肪分解成小分子有机物假丝酵母和乳酸菌将糖转化为乳酸和醇类原料选择新鲜葡萄(或苹果)豆腐大白菜、花椰菜等新鲜干净的蔬菜实验流程让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制装坛发酵成品操作注意事项材料选择与处理；防止发酵液污染，控制好发酵条件材料用量；防止杂菌污染；控制温度及酒精含量泡菜坛的选择；腌制条件(无氧)；共同点都是天然的发酵，利用了微生物新陈代谢过程中代谢产物的作用或直接获取代谢产物技能点拨1果酒和果醋的制作要注意温度、气体和发酵时间的控制。2腐乳制作中盐、酒和各种香辛料的作用有共同之处：既具有调味作用，也具有杀菌防
13、腐的作用。对位训练3人类利用微生物发酵制作果酒、果醋、泡菜的历史源远流长。请回答下列问题：(1)果酒的制作离不开酵母菌。酵母菌是一类_(呼吸类型)微生物。在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，其反应式为_。在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸，其反应式为_。(2)温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。20 左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在_。在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。在发酵过程中，随着酒精度数的提高，红葡萄皮的色素也进入发酵液，使葡萄酒呈现深红色。在_的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物却因无法适应这一环境而受到抑制。(3)醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。在变酸的酒的表面观察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。实验表明，醋酸菌对氧气的含量_。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成_；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为_，再进一步转变为_。醋酸菌的最适生长温度为_。(4)果汁发酵后是否有酒精产生，可以用化学试剂_来检验。在酸性条件下，该试剂与酒精反应呈现_色。(5)制作泡
