KCM感受态细胞转化方法

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KCM 感受态细胞转化方法1. 建立体系,在10卩1连接产物中加入20卩1 KCM (5x)溶液和70卩1 ddH2O ;总体积为100卩1。如果转化质粒,可以直接取2卩1质粒加 入感受态细胞,略过此步骤,按步骤2 操作。2. 将上述体系加入感受态细胞中,冰上放置10 min;3. 37 C热激5 min,冰上放置2 min;4. 加入LB液体培养基500卩1后放置于37 C培养50-60 min;5. 将菌液涂在相应抗生素的平板上。 (推荐:双酶切连接产物转化,涂500卩1;质粒转化,涂50卩1)

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