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1、文件编号作业文件版次页码1/1化妆品细菌总数检测方法生效日期适用范围适用于化妆品厂细菌总数检测方法。参照GB7918化妆品微生物标准检验方法总则。2 实验用具2.1实验用具:恒温培养箱、干燥箱、恒温水浴锅、高压灭菌锅、酒精喷壶、酒精灯、打火机、去离子水、棉签、500ml锥形瓶、直径9cm培养皿.25ml具塞刻度试管、移液枪、1ml吸头、150ml锥形瓶、酒精棉、剪刀、生理盐水、电子称、量筒。2.2培养基与生理盐水卵磷脂-吐温80-营养琼脂培养基生理盐水：氯化钠8.5克，蒸镭水1000毫升。3 实验准备：3.1培养基的配制：配制方法：卵磷脂-吐温80-营养琼脂培养基称取粉末51克，加入蒸镭水或去
2、离子水1L,搅拌加热至完全溶解分装三角瓶。培养基的配制方法，具体以参照购买的培养基说明书上的要求进行操作。3.2用具和培养基灭菌：将上述实验用具及培养基于121C高压灭菌20分钟，冷却后待用。4 样品制备：4.1液体样品：水溶性的液体样品，可量取2克加到18克灭菌生理盐水中，混匀后制成1:10稀释液。油性液体样品，取样品2克，先加5ML灭菌液体石蜡混匀，再加10ML灭菌吐温80,加入灭菌生理盐水75ML,制成1:10稀释液。42膏霜类半固体状样品亲水性样品，称取10克，加来灭菌带玻璃珠加有90ML生理盐水的锥形瓶中，充分混匀，用其上清液作为1:10的稀释液。疏水性样品，称取10克，放到灭菌的研
3、钵中，加10ML灭菌液体石蜡，研磨成粘稠状,再加上10ML灭菌吐温，研磨待溶解后，加70ML灭菌生理盐水，制成1:10的稀释液。4.3固体样品称取2克，加到18克灭菌生理盐水中稀释，混匀，使其分散混悬后，取上清液作为1:10稀释液。操作步骤5.1用灭菌吸管吸取1:10稀释的检样2ML,分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1ML。将卵磷脂-吐温-营养琼脂培养基倾注平皿内，每皿约15ML,另倾注一个不加样品的，作空口对照。随即转动平川I,使样品与培养基充分混合均匀，等琼脂凝固后，翻转平皿，置于37C培养箱内培养48小时。52点数每个平川L的菌落数。菌落数量X10即为最终结果。（10为稀释倍数）。文件编号作业文件版次页码1/1化妆品细菌总数检测方法生效日期6相关记录仪器使用记录试剂配制记录酒精配制记录微生物检验原始记录
