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氯霉素眼药水的高效液相色谱分析法一、实验目的了解高效液相色谱仪的结构及正确使用，学习内标法和外标法测定组分的含量。实验学时 6h。二、实验原理高效液相色谱是在经典液谱的基础上发展起来的。以液体作为流动相，根据柱填料不同可分为吸附、分配、离子交换、凝胶渗透四种高效液相法。内标物可以消除仪器与操作或制备样本时带来的误差，精密称取样品后，加入一定量的内标物，然后制成适当溶液进样分析。根据样品和内标物的重量及其相应的峰面积比，求出某组分的含量。外标法又称校正法或定量进样法。本法要求能准确地定量进样。配置一系列已知浓度的标准液，在同一操作条件下，按同量注入色谱仪，测量其峰面积（或峰高），作峰面积（或峰高）与浓度的标准曲线。然后在相同条件下，注入同量样品溶液，测量待测组分的峰面积（或峰高），根据标准曲线计算样品中待测组分的浓度。氯霉素是抗生素类药物，微溶于水，且具苯环结构，所以可以用反相高效液相色谱法进行分离，并用 UV254nm 进行检测，甲醇 -水作流动相。三、实验仪器高效液相色谱仪
