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1、四种生长调节剂对猕猴桃产量及品质调节作用试验方案 设计人:赵赞伟1 试验目的猕猴桃营养丰富,不仅具有良好的口感,而且具有非常好的营养保健功效,更有超级水果的美称。其维生素C含量在水果中名列前茅,还含有良好的可溶性膳食纤维。正因这些优点,猕猴桃具有广阔的市场前景,我国猕猴桃种植面积、产量均居世界各国之首。但是我们的猕猴桃产品出口量却在的主要生产国中垫底。主要原因是滥用化肥、植物生长调节剂等对猕猴桃的品质造成了很大的影响。为促进猕猴桃优质高产,研究植物生长调节剂对猕猴桃产量及品质的调节作用,选择0.04%芸苔素内脂、1.4%复硝酚钠、PBO、碧护这四种植物生长调节剂对猕猴桃进行试验,对猕猴桃单果重
2、、总糖量、总酸度、维生素C及可溶性固形物等进行检测,以探讨影响猕猴桃产量及品质的因素。2 试验材料试验概况:试验于2012年xx月xx日在xxxx进行,海拔为,年均温,供试材料:供试猕猴桃品种为栽培 年 猕猴桃试剂药品: 0.04%芸苔素内脂 商品名:云大-120生产产家:郑州润达化工有限公司1.4%复硝酚钠商品名:复硝酚钠 生产产家:山东海源生化科技有限公司 PBO商品名:华叶PBO(原名新型果树叶面肥)生产产家:江苏省江阴市华叶农业科技有限公司0.136%赤吲乙芸苔可湿性粉剂 商品名:碧护生产企业:德国阿格福莱农林环境生物技术股份有限公司 国内代理:北京诚禾佳信咨询服务有限公司 3试验设计
3、方法3.1实验设计设芸苔素内脂(A)、复硝酚钠(B)、PBO(C)碧护(CK)四个因素,四个重复,每重复3株。其中芸苔素内酯: 300倍液;复硝酚钠: 20000倍液(3克/亩);CPPU:450倍液,碧护:20000倍液(3克/亩),叶面喷雾。选择合适的猕猴桃园区,划分三个小区,每个小区20株猕猴桃树。采用随机试验设计编码值方案见表1:表1:试验小区设计重复处理1234ACKBCBACCKBC CK ACKACBA:芸苔素内脂:300倍液 B:复硝酚钠: 20000倍液C : PBO:300倍液 CK:碧护:20000倍液3.2测定指标及方法分时期采样,每株随机采摘3个果实,贴好标签,带回实
4、验室尽快进行各项指标的测量,不能马上测量的应在适合条件下储藏,以免样品受污染或成分发生生化变化,影响测定结果。单果重从样品中随机取10个单果,用感量01g的天平称重,称量结果保持小数点后一位数,测定结果以单果重范围表示,即“最小值最大值”。果型指数用游标卡尺分别测果实的纵径和横径,以的纵径和横径比值表示。单果体积:先测纵径和横径,取纵横径平均值为半径,利用球体积公式计算猕猴桃体积。(此法只能测出近似值)果实硬度:果实硬度是指水果单位面积(S)承受测力弹簧的压力(N),它们的比值定义为果实硬度(P)。 P=N/S P被测水果硬度值105帕或(千克/厘米2) N测力弹簧压在果实面上的力N牛顿或(千
5、克) S果实的受力面积平方米或(平方厘米)用硬度计进行测量测量前:转动表盘,使驱动指针与表盘的第一条刻度线对齐(GY-1型的为刻度线2,GY-2和GY-3型的为刻度线0.5);将待测水果削去1平方厘米左右的皮。测 量:用手握硬度计,使硬度计垂直于被测水果表面,压头均匀压入水果内,此时驱动指针开始驱动指示指针旋转,当压头压到刻度线(10毫米)处停止,指示指针指示的读数即为水果的硬度,取三次平均值。测量后:旋转回零旋钮,使指针复位到初始刻度线。果实水分含量采用烘干法进行测量。先称鲜果重,然后将其置于105烘箱中烘干,取出冷却至室温,称干物质重,两者的差即为水分含量。果实色泽运用WSCS测色色差计测
6、定猕猴桃果实的颜色。测定L(亮度)、a(绿色红色)和b(蓝色黄色),每个果实测定4次(取果实表皮的4个不同位置),测定L、a、b值,取平均值。将所有数据根据公式:色光值=2000a/L(a2+b2)1/2计算。可溶性固形含量可溶性固形物是指液体或流体食品中所有溶解于水的化合物的总称。包括糖、酸、维生素、矿物质等等。用折射仪法测定。取猕猴桃果实切碎、混匀,称取250g,精确至0.1g,放入高速组织捣碎机捣碎,用纱布挤出匀浆汁液测定。调节恒温水浴温度在200.5,使水流通过折射仪恒温器。循环水可在1525范围内调节。用蒸馏水校准折射仪读数,在20摄氏度时将可溶性固形物调整至0%,将棱镜面擦干后,滴
7、加23滴待测液与棱镜中央,立即闭合上下两块棱镜,对准光源,转动消色调节旋钮,使视野分成明暗两部分,再转动棱镜旋钮,使明暗分界线恰在物镜的十字交叉点上,读取刻度尺上百分数,并记录测定时的温度。温度不在20时查表校正。总糖含量总糖是指食品中所含各种糖类的总量,包括各种单糖、双糖和多糖中的淀粉。实验试剂:碱性酒石酸铜甲液:称15g硫酸铜(CuSO45H2O)及0.05g次甲基蓝,加水溶解并稀释至1000ml。碱性酒石酸铜乙液:称取50g酒石酸钾纳和75gNaOH溶于水中,加入4g亚铁氰化钾,完全溶解后用水稀释到1000ml,储存于橡胶塞玻璃瓶内。乙酸锌溶液:称取21.9g乙酸锌,加3ml冰乙酸,再加
8、水溶解并稀释至100ml。亚铁氰化钾溶液:称取10.6g亚铁氰化钾,加水溶解稀释至100ml。葡萄糖标准溶液:准确称取1.00g经过96+2干燥2小时的纯葡萄糖,加水溶解后加入5ml盐酸,再用水稀释至1000ml。1ml此溶液相当于1.0mg葡萄糖。盐酸(1+1)溶液:量取50ml盐酸,用水稀释至100ml。氢氧化钠溶液(20g/L):称取20g氢氧化钠,加水溶解并稀释至100ml。实验步骤:1) 样品前处理 除去猕猴桃的外皮,切成小块,用粉碎机粉碎成均匀的果泥。2) 样品处理称取适量样品(准确至0.001g)于100ml烧杯中,用水将试样全部转移至250ml容量瓶中,加一定量的盐酸溶液,在一
9、定温度的水浴中加热振荡一定时间,冷却至室温。用氢氧化钾溶液中和,慢慢加入5ml乙酸锌溶液及5ml亚铁氰化钾溶液,定容后静置30分钟。用干滤纸过滤,弃去初滤液,续滤液备用。3) 碱性酒石酸钾溶液的标定 吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5.0ml,置于150ml锥形瓶中,加水10ml和玻璃珠2粒,从滴定管滴加约9ml葡萄糖标准溶液,在分钟内加热至沸腾,趁热2s/滴的速度滴加葡萄糖标液,直至蓝色刚好褪去,此时为滴定终点,记录消耗葡萄糖标液的总体积。平时重复3次,取平均值,计算每10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg)4) 试样溶液预测吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液置于150ml锥形瓶中,加水10m
10、l和玻璃珠2粒,在2分钟内加热至沸腾,趁沸以先快后慢的速度滴加试样溶液,并保持溶液沸腾状态。待测液颜色变浅时,以2s/滴的速度滴加,直至溶液的蓝色刚好褪去,记录样品溶液消耗的体积。5) 试样溶液测定吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液置于150ml锥形瓶中,加水10ml和玻璃珠2粒,从滴定管滴加比预测体积少0.5ml的试样溶液至锥形瓶中,在2分钟内加热至沸腾,趁沸以2s/滴的速度滴定,直至溶液的蓝色刚好褪去,记录样品溶液消耗的体积。同法平行操作3次,求平均值。6) 结果计算总糖含量(以葡萄糖计)的计算公式为:A=(F250100)/(Vm)式中:X:试样中还原糖的含量(以某种还原糖计),g/100g;F
11、:碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量,mg;V:平均消耗试样溶液的体积,ml;m:试样质量蛋白质含量凯氏定氮法测蛋白质含量。实验试剂: 40%氢氧化钠溶液; 混合指示剂:取1滴2g/L甲基红乙醇溶液与5滴2g/L溴甲酚绿 乙醇溶 液,临用时混合即成; 20g/L硼酸溶液; 0.05mol/L盐酸标准溶液。 实验步骤:1) 消化 精密称取样品0.2g,置于凯氏烧瓶中,依次加入粉状硫酸钾0.32g,硫酸 铜0.2g及硫酸4.10mL,摇动烧瓶使全部样品浸没于硫酸内。置于消化器上。放上已装好密封圈的排污管,打开抽气三通进水(自来水),使抽气三通处于吸气状态。再接通电源,打开各自控制开关,转运电位器至
12、电压220V,使其快速消化。在消化初始阶段,须注意观察防止样品因急速加热而飞溅。消化至消化液澄清并呈蓝绿色(大约30分钟)。停止加热,取出放于样品架上冷却。同时消化1份试剂空白。 2) 蒸馏用橡胶管连接仪器侧面的各个接口。H20接口用橡胶管连接到H2O瓶内冷却水接口和自来水相连,排水阀和出水口连接到水槽内即可。开机前先观察蒸发炉内水位,不能超过电极底部。打开电源开关,打开自来水,打开蒸汽开关,关掉排水阀,机器将进入自动加热状态。直到蒸汽从蒸馏塑料管内喷出,让其喷30分钟左右,关掉蒸汽开关,仪器进入正常的待机状态。先量取20g/L硼酸溶液10mL于锥形瓶中,加入混合指示剂1滴的三角瓶放到蒸馏器上
13、,消化管内加20ml水和加(消化时硫酸5倍)的NaOH,打开蒸汽开关进行蒸馏。当三角瓶收液到60ml左右时将收液下移,使接收管脱离液面,用H2O冲洗接收管,继续蒸馏半分中左右,蒸馏结束。这时请先把接收液取下,再关掉蒸汽开关,倒掉蒸馏完的废液。同时作 1份试剂空白。3)滴定吸收氨后的吸收液立即用0.05mol/l的盐酸标准溶液滴定,滴定至溶液由淡绿色变成淡紫色时为止,记录盐酸标准溶液的耗用量。同时做一份空白测定。4)结果计算 TP(%)=(V-V0)*CHCL*0.0140*6.25*100/M 式中符号:Protein:样品含氮化合物;V:样品滴定时消耗的盐酸标准溶液的体积(ml);V0:空白
14、对照滴定时消耗的盐酸标准溶液的体积(ml);M:称取试样的质量(g);CHCL:盐酸标准溶液的浓度(mol/L);0.0140:1ml盐酸标准溶液相当的含氮量(g);6.25:氮换算成蛋白质的系数。维生素C的含量碘量法测定猕猴桃中维生素C的含量:1)样品制备取43.61g猕猴桃,加偏磷酸-醋酸溶液到200mL,匀浆3分钟后过滤,滤液放入碘量瓶或三角瓶中。 2) 滴定 精确量取一定体积的样品溶液(如5mL)于100mL碘量瓶中,加10mL30%KI溶液(抗坏 血酸稀溶液含量低于1mg时可用50%KI溶液)。再加数滴淀粉指示剂溶液。随即用标准硫酸铜 溶液(0.01mol/L)进行滴定。边滴定边振摇,直至显示出红色,记录滴定量。再做一个空白试验,在计算前,需将样品的滴定量减去空白试验的滴定量得V。 3) 计算: L-抗坏血酸含量(mg/每份)V*C L-抗坏血酸含量(mg/每份)V*C V:0.01mol/L标准硫酸铜溶液的mL数。 C:0.88,即1mL0.01mol/L标准硫酸铜溶液相当于0.88mg抗坏血酸。可滴定酸含量采用酸碱滴定法试剂的配制011N 氢氧化钠标准溶液: 称取4 克分析纯氢氧化钠于100 毫升烧瓶中,加水溶解后洗入1000 毫升容量瓶中, 冷却后定容至刻度,