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1、介绍虫草素提取途径与方法、前言:虫草素(cordycepin )又称冬虫夏草素、虫草菌素、蛹虫草菌素,是冬虫夏草和蛹 虫草中(尤其是核苷类)主要活性成分,也是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗 生素。虫草素一种天然来源的药物,具有中医医理中冬虫夏草一样的阴阳同补和 双向调节人体平衡的功能;它在护肝、保肾、润肺方面由于成分更纯效果更好, 而且大补气血,能消除现在不能治愈的痛经、偏头痛、颈椎增生等疾病。从西医 医理角度看虫草素具有抗肿瘤、抗衰老、抗菌、抗病毒、免疫调节、改善新陈代 谢、清除自由基等多种药理作用,有良好的临床应用前景。目前虫草素的研究现 正成为药物化学、抗衰老、美容、保健品领域中一个极
2、其活跃的领域。二、虫草素药用价值:1、免疫调节作用近年来,研究人员发现虫草素具有免疫调节作用。它能够极大地提高了人外周血 液单核细胞IL-10的分泌和IL-10mRNA的表达,同时,虫草素对诱导产生IL-2 的植物血球凝集素和外周血液单核细胞扩增都有抑制作用,抗IL-10中性抗体也 不能完全阻止虫草素对IL-2产生的抑制作用。在虫草素作用下,成熟树突状细 胞能诱导调节性T细胞增殖,而且还能抑制细胞分裂,促进细胞的分化,改变 胞膜上物质结构分布,对T淋巴细胞转化有促进作用,它还可以提高机体单核 巨噬细胞系统的吞噬功能,激活巨噬细胞产生细胞毒素直接杀伤癌细胞。2、虫草素的抗肿瘤作用虫草素对肿瘤的抑
3、制作用一直是广大科学家们关注的热点。研究发现,用虫草素 皮下注射接种了艾氏腹水癌的小鼠,可使小鼠中位生存期延长到60 d,而对照组 仅为19 d,这说明虫草素对小鼠艾氏腹水癌有明显的抑制作用,能明显延长接种 艾氏腹水癌小鼠的存活时间。还有研究表明,虫草素对人鼻咽癌KB细胞和人宫 颈癌HeLa细胞等皆具有明显的抑制作用。科学家推测虫草素可能有3种抑制 肿瘤的机制:一是虫草素的游离羟基可以渗入瘤细胞DNA中而发生作用;二是 抑制核苷或核苷酸的磷酸化而生成二磷酸盐和三磷酸盐的衍生物,从而抑制瘤细 胞的核酸的合成;三是阻断黄苷酸胺化形成鸟苷酸的过程。3、虫草素的抗炎作用经研究发现,虫草素可以拮抗NO产
4、物的生成,这一机制是通过对NO合酶和 COX-2基因表达负调控以及对NF-kB活性、AKT和p38磷酸化的抑制来实现的。 由此,虫草素很可能成为一种治疗由炎症引起的相关紊乱的药物。4、虫草素的抗白血病作用通过体内实验研究发现,虫草素作为一种腺苷脱氨酶抑制剂,对末端脱氧核苷酸 阳性白血病细胞(TdT+)的抑制大于对末端脱氧核苷酸阴性白血病细胞(TdT-) 的抑制。经过分析其抗TdT+白血病的机理。结果表明,3-dATP不是3-dA抗白 血病的主要原因,而TdT的活性才是主要原因,并且发现PBM对3-dA的细胞 毒性作用不敏感。其他研究发现虫草素对TdT+的白血病细胞的凋亡诱导与提高 蛋白激酶A(
5、PK-A)活性密切相关,并且经虫草素处理L1210白血病细胞,可 显著抑制RNA的甲基化。三、提取途径与方法途径:获取虫草素的办法不外乎三条途径:从天然虫草中提取、人工合成和通过生物工程的方 法从北虫草组织液中提取。化学合成目前处于探索阶段,国外有报道虫草素能够人工合成,但过程复杂且产量极低, 因此如何提高蛹虫草中虫草素的含量并实现虫草素的工业化生产,是目前国内外研究的主要 方向。天然虫草资源稀缺,价格昂贵,含量甚微,很难成为主要原料。人工合成虫草素虽然在 上个世纪六十年代我国曾有报道,但由于合成的起始原料较贵或设备投入巨大或产业化工艺 缺失或总收率太低或合成工艺技术无法重复,迄今难以实现产业
6、化。因此,通过生物工程的 方法,从人工培育的虫草子实体中提取虫草素,是实现虫草素作为治疗药物产业化生产的最 可行的途径。目前国内虽然有几家企业能生产虫草子实体,由于工厂化大规模培育和提取纯化的关键 技术尚未突破,其产品的虫草素含量很低,难以为虫草素开发新药,并实现产业化提供原料 药的保障。藏诺提取的虫草素,由藏诺创始人、虫草素提取专利发明人王智森教授带领科研 团队探索攻关,深入开展冬虫夏草虫草素分离与提取技术工艺的研究,历经8年科研攻关, 终于掌握了稳定的虫草素分离与纯化方法一一“双动态提取分离与纯化技术”并荣获国家发 明专利(专利号:ZL201210458821.0),解决这一世界级科研难题
7、。利用这种技术提取虫草 素,提纯度可达99.84%,处于国际领先水平。方法:1、双动态提取分离与纯化技术。经过对蛹虫草子实体及培养基的粉碎、石油醚脱脂、80C85C水浴12 h、调节 等电点沉淀、732-NH4离子交换树脂的分离、浓缩、4C下低温结晶,得到一定 纯度的虫草素晶体。采用微波/光波组合提取,可使虫草中所含的不同药效成分 分别溶出,提取迅速,转化完全。提纯度达到99.84%。2、以蛹虫草为材料的提取方法。米用超声波水提法、超声波醇提法、水热回流法和醇热回流法4种提取方法选 择虫草素最优提取方法,用正交试验方法考察水热回流法中提取温度、提取次数、 提取时间、料液比4个因素对虫草素提取效率的影响,确定水热回流法是提取虫 草素的最优提取方法,其最佳工艺条件为:用10倍量的水于80C热回流提取3 次每次90 min。