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1、Hygiena SystemSURE PlusTM ATP荧光仪作业指导1.目的：现场检测清洗消毒效果，以确保食品卫生的安全。2.适用范围：适用于对食品接触器具和生产环境、加工人员手的消毒效果检测以及对生产过程微生物污染水平的分析、检测和加工前清洁消毒的评价。3.ATP检测程序的建立：1.确定控制点和关键控制点ATP检测限定值的建立 2. 彻底清洁产品表面，重复两到三次以到达最佳清洁度Hygiena 为用户提供了参考限定值：合格10RLU不合格30RLU警惕10-30RLU间3.在每个控制点上进行 ATP 卫生监控检测，重复检测510次4.计算这些结果（RLU）数值的平均值和标准偏差（s.d）
2、用户可根据自身情况和不同检测环节建立自己的限定值5.按以下方式设置限定值： Pass（合格） = Mean RLU = Mean RLU + 3 (s.d) 6.设置检测频率与周期7.根据ATP快速检测结果制定纠偏措施3.1 确定控制点和关键控制点:需要检测的主要是食品接触的区域和难以清洗的区域。食品接触区域包括食品直接和间接接触的表面。l 食品直接接触区域指那些如有污染存在会直接污染产品的区域。l 食品间接接触区域指有冷凝物溅出、或有可能有灰尘或液体滴落或进入产品的区域。难清洗区域包括漏斗口、O环、管口以及表面不规则的区域、角落、沟槽和缝隙。a) 肉制品加工生产线食品直接接触区域控制点:（仅
3、供参考）编号：检测项目：检测部位：1.注射机/搅拌机桶壁 、叶片、盘2.嫩化机/切片机桶壁、叶片3.滚揉机桶壁4.蒸煮桶/蒸箱/烟熏箱桶/箱壁5.压模盖机操作台面6.输送带带面b) 例图（不同项目检测区域）：传送带 水槽3.2 检测表面取样示例：a）规则表面规则表面用拭子头涂抹被测区域（30-45角、1010 CM表面）b）不规则表面不规则表面当不能取得1010 CM表面积时，应该尽量涂抹足够的区域。3.3 Hygiena SystemSURE PlusTM荧光仪与UltrasnapTM拭子使用方式: 1. 使用UltrasnapTM 取样，用拭子头涂抹被测区域 （30-45角、1010 CM
4、表面）2. 将涂抹完的拭子头插回管内3. 折断拭子头上端阀门，挤压两至三次，挤入反应液。4. 轻轻摇晃UltrasnapTM 拭子5秒钟。5. 将UltrasnapTM 拭子置入SystemSURE PlusTM荧光仪。（请在反应后1分钟内进行此步）6. 按OK键，15秒后测出反应结果。3.4 设置限定值:a) Hygiena推荐通用限定数值如果时间紧迫，需要立即建立ATP卫生监控程序，则Hygiena有一组推荐的通用限定数值。这些限定数值的设定是根据不同仪器设备、表面等的平板计数来确定的。（仅供参考）合格（Pass）不合格（Fail）警惕（Caution）检测结果（RLU）：10301030
5、b)建立用户自己的限制值：l 标本应取自每次深层清洁后，肉眼看上去很干净的表面。l 重复检测5次，统计结果。范例1：l 以下为某检测表面5次清洁后检测结果数值：检测项目：输送带检测部位：带面编号：检测结果（RLU）：126229332419524l 首先计算这些结果（RLU）数值的平均值平均值为 （26+29+32+19+24）/ 5 = 26l 再计算这组数据的标准偏差（s.d） 公式为：标准偏差（s.d）的计算为 S = Sqr(xn-x平均值)2 /(n-1)= Sqr (26-26) 2+(29-26) 2+(32-26) 2+(19-26) 2+(24-26) 2 / (5-1)=
6、Sqr (0+9+36+49+4) / (5-1)= Sqr 98 / (5-1)= Sqr 24.5= 4.95 （取整约等于5） 注备：Sqr 为开平方、 为求和、x为每个检测结果数值、 n为检测项目数量标准偏差（s.d）为一种量度数据分布的分散程度之标准，用以衡量数据值偏离算术平均值的程度。l 按以下方式设置限定值：结算公式结果合格（Pass） = 平均值 + 3倍的标准偏差(s.d)26+5*3=41警惕（Caution） =平均值平均值 + 3倍的标准偏差(s.d)2641 注备：如用户已有控制点菌落总数标准平板计数标准，可将ATP检测结果与之参照。但请注意ATP是来自于微生物或有机
7、物残留，所以只能说ATP水平与微生物数目有着密切的相关性，ATP检测与平板计数结果间不能完全一一对应，但有密切的相关性。3.5 设置检测频率与周期a) 检测时机：1）ATP检测表面应为干燥表面。2）一般情况下，ATP检测应在使用消毒剂使用前进行。3）但部分CIP程序需在消毒剂使用后进行ATP检测，这种情况下，消毒剂的消毒接触时间为5分钟-15分钟。依照消毒使用规范，等待这段时间消毒剂干燥后，再进行表面取样检测。 注备：可通过高压蒸汽消毒配合ATP检测，可有效节省消毒剂的使用。b) 取样、检测频率：根据资金状况，选取适合的取样点数量，推荐以下策略：1）ATP检测应作为抽检和初筛手段。（结果可疑环
8、节可进一步采样进行标准平板计数）2）检测方案（仅供参考）l 每座车间建立5-10个检测点。l 每个检测点每周抽检1-2次。l 定期将检出结果以图表形式进行总结和报告，为控制措施提供短期评价。l 提供季度或年度报告，对更长期数据进行分析。3.6 根据ATP快速检测结果制定纠偏措施检测结果结果判断检测值低于合格（Pass）值清洁合格检测值介于合格（Pass）值与不合格（Fail）值之间，需要警惕（Caution）下次清洁时应特别留意该区域清洁检测值高于不合格（Fail）值重新清洁3.7 ATP快速检测关键点控制列表例1（用户可参照下表建立相关关节控制表）：加工步骤控制环节危害关键限值预防措施监控程
9、序纠偏行动记录/审核肉制品蒸、熏蒸箱/烟熏箱箱壁微生物污染、残渣1030（RLU）（仅供参考）清洁消毒ATP快速检测每周抽检2次，辅以平板记数检测1-2次。改善清洁消毒措施4. ATP快速检测Q&A： 1）为什么用ATP作为有效清洁的指标？ ATP存在于所有的有机物中，多数食品本身也都含有一定量的ATP，因此检测ATP可以作为判断是否洁净的指标。SystemSURE PlusTM荧光仪与UltrasnapTM 拭子配合使用，采用生物发光技术检测残留的ATP以作为表面清洁度的指标。表面ATP的存在表明表面没有充分清洗，有滋生细菌的可能。残渣中也可能含有某些有害物质如潜在的过敏原等。2）Syste
10、mSURE PlusTM荧光仪工作原理？ SystemSURE 系列荧光仪采用化学反应检测ATP，用Ultrasnap TM 拭子采集标本Ultrasnap TM 拭子被缓冲液浸湿，这样有助于从干燥或湿润的表面提取生物物质（ATP）。拭子也含有一种可以冲破生物膜的试剂，使其下可能存在的生物体暴露出来。标本采集后，拭子应浸泡在能将细胞内ATP释放出来的容剂中。而后细胞内部释放出的ATP、以及拭子从设备表面抹取的ATP再和UltrasnapTM 拭子独特的液体试剂一起反应。UltrasnapTM 拭子的液体试剂含有两种萤火虫酶-荧光素和荧光素酶，虫荧光素和虫荧光素酶在ATP存在的条件下会发光。发出
11、的光可由SystemSURE PlusTM荧光仪进行检测。检测的发光量与ATP的总量成正比。数值越高，表明ATP的量越多，也就意味着表面的残留物越多。3）结果数字表示什么？ SystemSURE PlusTM荧光仪以RLU（相对光单位）数值显示结果。在UltrasnapTM 拭子中发生的ATP反应所产生的光以光子的形式发散出来。光子是微小的能量束，也是光的基本单位。SystemSURE对这些光子进行检测后直接以RLU数值的形式显示出来。SystemSURE PlusTM检测的光子数量越多，RLU的数值就越大。这种线性比例使得人们很容易在洁净与不洁表面之间做出判断。 SystemSURE Plu
12、sTM荧光仪检测的是总的ATP量，这些ATP来自细菌、酵母菌和霉菌体内以及食品加工设备表面的食物残渣中。所以RLU读数与微生物菌落形成单位（CFU）并不相同。由于SystemSURE PlusTM荧光仪检测总ATP，它不能分辨其显示的RLU读数是微生物体内的ATP检测值还是残留物中的ATP检测值，或者是两者的结合。因此不能在ATP/RLU数值和标准平板计数之间进行比较。在没有食物残渣存在的情况下微生物很容易被消毒剂杀死，所以如果设备表面不含ATP或ATP水平很低，表明没有或很少有食物残渣存在，此时消毒剂的使用效果最好。4）可以将RLU数和CFU计数进行对比吗？ Hygiena SystemSU
13、RE系列ATP荧光仪只能检测表面存在的总ATP，但它不能区分ATP是来自于微生物产生的亦或是因未充分清洗而残留在表面上的。所以不能直接将Hygiena SystemSURE系列ATP荧光仪测定的RLU读数与标准平板计数相对比。但是，ATP水平与微生物数目有着密切的相关性。5. ATP快速检测注意事项：l UltrasnapTM 拭子平时需2-8冷藏保存，另应避免强光直接照射。 l 不要用手触摸UltrasnapTM 拭子取样头，以免污染。l 如果待检表面可以用肉眼看到污物，则无需再浪费拭子进行检测。拭子是用来检测肉眼不能识别其洁净度的表面。l 不要用UltrasnapTM 拭子涂抹湿润表面，等表面干后再进行涂抹检测。6. SystemSURE 系列ATP荧光仪用户（肉制品加工企业）美国泰森食品公司美国泰森食品股份有限公司（Tyson Foods Inc.）创始于1935年，总公司位于美国阿肯萨州。泰森公司于2001年与美国IBP公司合并，目前是是全球最大的鸡肉、牛肉、猪肉供应商及生产商，也是最大的牛皮（盐/蓝湿皮）和猪皮生产商。在美国鸡肉市场占为25%。经历了70多年的稳健成长，现列世界财富500强中第二大食品公司。2004年度营业收入为 264亿美金，2004年度平均每
