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1、1阐述操纵子(operon)学说:A、乳糖操纵子的组成:大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因,分别编码半乳糖普酶、半乳糖背透酶和半乳糖普乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列 O,一个启动子P和一个调节基因B1 Z ,Y,A基因的产物由同一条多顺反子的 mRNA分子所编码2该mRNA分子的启动区位于阻遏基因和操纵基因之间,不能单独起始半乳糖普酶和透过酶基因的高效表达3操纵区是DNA上的一小段序列,是阻遏物的结合位点4遏物与操纵区结合时lacmRNA的转录起始受到抑制5诱导物与阻遏物结合,改变它的三维构象,使之不能与操纵子区相结合,从而激发lacmRNA的合成。就是说诱导物存在时,操纵区没有被阻
2、遏物占据,所以启动子能够顺利起始mRNA的转录2、乳糖操纵子的作用机制?/简述乳糖操纵子的结构及其正、负调控机制答:A、乳糖操纵子的组成:大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因,分别编码半乳糖普酶、透酶和半乳糖普乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列 O, 一个启动子P和一个调节基因I。B、阻遏蛋白的负性调节:没有乳糖存在时,I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。所以,乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。C、CAP的正性调节:在启动
3、子上游有 CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高,与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点,激活 RNA聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶。D、协调调节:乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与 CAP的正调控两种机制,互相协调、互相制约。3、基因调控的水平有哪些?基因调控的意义?答:a、DNA水平的调控。b、转录水平上的调控。c、转录后的调控。d、翻译水平的调控。e、细胞质与基因调控。意义:适应物理,化学等环
4、境因素变化,调节代谢,维持细胞生长与分裂。4、简述乳糖操纵子的结构及其正负调控机制。答:结构:A、丫和Z,以及启动子、控制子和阻遏子。正调控机制:CAP分解代谢产物激活蛋白质,直接作用于操纵子区上与cAMP结合形成CAP-cAMP复合物,转录进行。负调控机制:a、无诱导物时结构基因不转录。b、有诱导物时与阻遏基因相结合,形成无活性阻遏物,RNA聚合酶可与启动子区相结合,起始基因转录。5、基因调控的水平有哪些?基因调控的意义?答:a、DNA水平的调控。b、转录水平上的调控。c、转录后的调控。d、翻译水平的调控。e、细胞质与基因调控。 意义:适应物理,化学等环境因素变化,调节代谢,维持细胞生长与分
5、裂。6、简述乳糖操纵子的结构及其正负调控机制。答:结构:A、丫和Z,以及启动子、控制子和阻遏子。正调控机制:CAP分解代谢产物激活蛋白质,直接作用于操纵子区上与cAMP结合形成CAP-cAMP复合物,转录进行。负调控机制:a、无诱导物时结构基因不转录。b、有诱导物时与阻遏基因相结合,形成无活性阻遏物,RNA聚合酶可与启动子区相结合,起始基因转录。 7、简述操纵子学说。答:是关于原核生物基因结构及其表达调控的学说,以乳糖操纵子为例,其主要内容为:a、Z、Y、A基因的产物由同一条多顺反子的mRNA分子所编码。b、该mRNA分子的启动区位于阻遏基因与操纵区之间,不能单独起始半乳糖普酶和透过酶基因的高
6、效建立。c、操纵区是DNA上的一小段序列,是阻遏物的结合位点。d、当阻遏物与操纵区相结合时,lacmRNA的转录起始受到抑制。e、诱导物通过与阻遏物结合,改变它的三维构象,使之不能与操纵区相结合,从而激发lacmRNA的合成。即有诱导物存在时,操纵区没有被阻遏物占据,所以启动子能够顺利起始mRNA转录。8简述Trp操纵子的结构及其调控机制。答:Trp操纵子由5个结构基因TrpE、TrpD、TrpC、TrpB、TrpA组成一个多顺因子的基因簇,在 5端是启动子、操纵子、前导顺序和 弱化子区域。机制:a、辅阻蛋白参与的负调控阻遏调节。/、trp诱导物含量高,与游离的辅阻遏蛋白相结合,形成有活性阻遏
7、物,与操纵子区DNA紧密结合,进行转录。/、trp诱导物含量 低,不能与辅阻遏物结合,辅阻遏物从。区上解离,trp操纵子阻遏转录进行。b、弱化作用。/、trp浓度高时,2-3不配又3、4区自由配对形成茎环状终止结构,转录停止。/、trp浓度低时,2,3配对,4区片段无配对,结构基因转录。9细菌的trp操纵子为什么除需要阻遏体系外还需要弱化系统。答:细菌的trp操纵子通过弱化作用弥补阻遏作用的不足,因为阻遏作用只能使转录不起始,而对于已经起始的转录,只能通过弱化作 用使之中途停顿下来,阻遏作用的信号是细胞内trp的多少,弱化作用的信号是细胞内载有 trp的tRNA的多少,两种作用相辅相成,体现周
8、密的调控作用。10、简述原核生物转录后调控的机制。答:a、mRNA自身结构元件对翻译起始的调节。b、mRNA稳定性对转录水平的影响。c、调节蛋白的调控作用。d、反义RNA的调节作用。e、稀有密码子对翻译的影响。f、重叠基因对翻译的影响。g、翻译的阻遏。h、魔斑核昔酸水平对翻译的影响。11、简要概括真核生物基因表达调控的7个层次答:a、转录水平的调控,包括基因的开与关和转录效率的高与低。b、DNA水平上的表达调控,包括基因丢失、扩增、交换、重排、 DNA甲基化。c、转录水平的调控,顺式作用元件与特异转录因子结合影响转录,反式作用因子能识别结合于顺式作用元件上,参与调控。d、反式作用因子的 DNA
9、识别域或结合域。e、蛋白质修饰、磷酸化和去磷酸化。f、转录后水平的调控。g、翻译水平的调控 mRNA的“扫描模式”与蛋白质合成起始mRNA5端帽子结构及polyA尾巴,mRNA稳定性与基因表达调控,蛋白质的修饰。12、真核基因表达调控与原核生物有什么异同点。答:同:a、都有转录水平上调控和转录水平后调控,并且都以转录水平上的调控为重要。b、在结构基因的上下游都存在着许多特异的调控成分,并依靠特异蛋白因子与这些调控成分的结合与否,调控基因的转录。异:a、真核基因表达调控环节多,位点多,区域大,位置多样化。b、真核基因的转录与染色质的结构变化相关。c、无操纵子和衰减子。d、受环境影响小。e、以正性
10、调控为主。3调控的基因组很大,而原核基因组小。13、简述DNA水平对真核基因表达的调控。答:DNA水平的调控是真核生物发育调控的一种形式,包括基因丢失,扩增,重排和移位等方式,通过这些方式可以消除或变换某些 基因并改变它们的活性。主要有:a、染色质状态对基因表达调控。b、修饰作用(乙酰化甲基化)与染色质状态的关系。c、基因丢失,扩增,重排,交换。14、真核基因顺式作用元件及各自的特点。答:a、启动子,位于转录起始点附近且为转录起始所必需的DNA序列。/、核心启动子,指保证RNA聚合酶2转录正常起始所必需的,最少的DNA序列,包括转录起始位点及位点上游 -30-负25bp处的TATA区。/、上游
11、启动子元件,包括通常位于 -70bp附近的CAAT区 和GC区等能通过TF2D复合物调节转录起始的频率,提高转录效率。b、增强子,指能使与之连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列,位于离转录起始点较远位置上,具有参与激活和增强起始功能的序列元件。c、绝缘子,负调控作用元件(与增强子作用相反)。15、反式作用因子的 DNA结合域有哪几种?各自的结构特点?答:a、螺旋-转折-螺旋结构(HTH)。这类蛋白质分子中有至少两个 a螺旋,中间由短侧连氨基酸残基形成“转折”,近竣基端的a螺旋中AA残基的替换会影响该蛋白在 DNA双螺旋大沟中的结合。b、锌指结构。由小组保守的 AA和锌离子结合,在蛋白中形成了
12、相对独立的功能域,像一根根收支伸向DNA大沟。c、碱性-亮氨酸才遵1。 C/EBP家族蛋白的竣基端35个AA残基具有能形成&螺旋的特点,其中每隔 6个AA就有一个亮AA拉链, 导致第七个亮 AA残基都在螺旋的同一方向出现,这类蛋白都以2聚体形式与DNA结合,两个蛋白a螺旋上的亮AA-侧基形成拉链型2聚体的基础。d、碱性-螺旋-环-螺旋,(BHLH结构)。竣基端100-200个AA残基可形成两个双性 a螺旋,被非螺旋的环状结构所隔开,蛋白质 的氨基端则是碱性区,其 DNA结合特性与亮AA拉链类蛋白相似。e、同源域蛋白。同源域是指编码60个保守氨基酸序列的DNA片段,广泛存在真核生物基因组内,该遗
13、传位点的基因产物决定了躯体发育。16、真核基因转录调控的主要模式答:启动子、转录模板、RNA聚合酶2、RNA聚合酶2基础转录所需的蛋白质因子、增强子及绝缘子对转录的影响、反式作用因子对转录的影响。17、简述DNA加工水平对基因表达的调控答:RNA加工水平:a、rRNA加工成熟,包括分子内的切割和化学修饰(主要是核糖甲基化)。b、mRNA加工成熟,包括 mRNA5 末端加“帽子” ,3端加上polyA尾巴。c、tRNA的3末端CCA-OH , 5端加上甲基鸟昔酸。翻译水平:a、真核生物 mRNA “扫描模式”与蛋白质合成的起始。b、mRNA的稳定性与基因表达的调控。 c、mRNA5端帽子结构的识
14、别与蛋白质的合成。d、可溶性蛋白因子的修饰与翻译起始调控14、简述Trp操纵子的结构及其调控机制。 答:Trp操纵子由5个结构基因TrpE、TrpD、TrpC、TrpB、TrpA组成一个多顺因子的基因簇,在5端是启动子、操纵子、前导顺序和弱化子区域。机制:a、辅阻蛋白参与的负调控阻遏调节。/、trp诱导物含量高,与游离的辅阻遏蛋白相结合,形成有活性阻遏物,与操纵子区DNA紧密结合,进行转录。/、trp诱导物含量低,不能与辅阻遏物结合,辅阻遏物从 。区上解离,trp操纵子阻遏转录进行。b、弱化作用。/、trp浓度高时,2-3不配对,3、4区自由配对形成茎环状终止结构,转录停止。/、trp浓度低时
15、,2,3配对,4区片段无配对,结构基因转录。15、细菌的trp操纵子为什么除需要阻遏体系外还需要弱化系统。答:细菌的trp操纵子通过弱化作用弥补阻遏作用的不足,因为阻遏作用只能使转录不起始,而对于已经起始的转录,只能通过弱化作 用使之中途停顿下来,阻遏作用的信号是细胞内trp的多少,弱化作用的信号是细胞内载有trp的tRNA的多少,两种作用相辅相成,体现周密的调控作用。16、简述原核生物转录后调控的机制。答:a、mRNA自身结构元件对翻译起始的调节。b、mRNA稳定性对转录水平的影响。c、调节蛋白的调控作用。d、反义RNA的调节作用。e、稀有密码子对翻译的影响。f、重叠基因对翻译的影响。g、翻译的阻遏。h、魔斑核昔酸水平对翻译的影响。17、简要概括真核生物基因表达调控的7个层次答:a、转录水平的调控,包括基因的开与关和转录效率的高与低。b、DNA水平上的表达调控,包括基因丢失、扩增、交换、重排、DNA甲基化。c、转录水平的调控,顺式作用元件与特异转录因子结合影响转录,反式作用因子能识别结合于顺式作用元件上,参与调控。d、反式作用因子的DNA识别域或结合域。e、蛋白质修饰、磷酸化和去磷酸化。f