《微生物标本采集、送检及处理原则》由会员分享,可在线阅读,更多相关《微生物标本采集、送检及处理原则(5页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。
1、微生物标本采集、送检及处理原则一、标本采集的一般原则:1、病程早期、急性期或症状典型时,使用抗生素前。2、无菌采集应无污染,严格进行无菌操作。3、根据目的菌的特性用不同的方法采集适量标本,采集量不应过少。4、注意在不同病程采集不同部位标本。5、采集标本时要防止传播和自身感染。二、标本的处理:1、标本保存在4C环境中,在2h之内送检。脑脊液则要在25C保存,用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h。对环境敏感的细菌应保温并立即送检。2、标本中可能含有致病菌,必须注意安全防护。切勿污染环境。对于烈性传染病标本运送时更要由专人运送,严格按规定包装。3、厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送,有时可
2、直接用抽取标本的注射器运送。I血液及骨髓标本:血液标本的细菌培养是诊断菌血症或败血症的基本方法。如从患者血液中检出细菌,一般应视为病原菌。常见的病原菌主要有金黄色或表皮葡萄球菌、链球菌(A、B群、肺炎链球菌等)、肠球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、伤寒及副伤寒沙门菌和厌氧菌等。1、采血时间及次数2、抽血部位及抽血量3、报告方式:培养5d无菌生长者报告“培养5d无菌生长”查见细菌报告菌名和药敏结果。4、菌血症、败血症的诊断标准:1)两次培养均出现同一种细菌(可排除污染);2)发病星期后血中抗体滴度上升。II脑脊液标本:脑脊液的细菌学检查对于细菌性脑膜炎的诊断有重要价值。正常人的脑脊液是无菌
3、的检出细菌提示有细菌性(急性化脓性、结核性等)脑膜炎。常见的病原菌主要有脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、链球菌(A、B群和肺炎链球菌)、葡萄球菌、产单核细胞李斯特菌、结核分枝杆菌等。1、涂片检查:(1)一般细菌涂片检查:例如:革兰阴性、凹面相对的球菌,可能是脑膜炎奈瑟菌链状排列的革兰阳性球菌;长丝状等多形态性的革兰阴性杆菌,可能是流感嗜血杆菌。(2)结核分枝杆菌涂片检查(3)新生隐球菌涂片检查2、分离培养3、报告方式:培养48小时,仍无菌生长者报告“培养2天无细菌生长”。查见细菌报告细菌,报告菌名和药敏结果。Ill呼吸系统标本:(一)痰标本下呼吸道的痰液是无细菌的,而经口腔咳出的痰带有多种上呼吸道
4、的正常寄生菌(如草绿色链球菌)。若从患者痰标本中查见致病菌或条件致病菌,提示有上呼吸道感染。常见的病原菌主要有肺炎链球菌、A群链球菌、金黄色葡萄球菌、卡他布兰汉菌、白喉棒状杆菌、结核分枝杆菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌和军团菌。1、标本的采集时间2、标本采集方法:(1)自然咳痰法(2)气管镜下采集法(3)气管穿刺法(4)结核分枝杆菌标本收集法:收集24h痰液以提高阳性检出率。3、涂片检查:(1)一般细菌涂片(2)结核分枝杆菌涂片(3)放线菌及诺卡菌涂片4、培养:(1)培养标本的选择:应选择粘液痰作涂片。(2)痰标本培养前处理:用无菌盐水将痰洗涤3次,加入等量的1%胰酶溶液(PH7.6)
5、,37C水浴90min,使痰液均质化后备用。(3)分离培养5、报告方式:痰标本培养24小时后仅有草绿色链球菌生长而无致病菌生长,报告“正常菌群”。查出的致病菌,报告菌名和药敏结果,同时报告细菌的量化指标。(二)咽拭标本正常咽拭有多种上呼吸道的正常菌群(如草绿色链球菌)。若从患者标本中查出致病菌提示上呼吸道有细菌感染(如急、慢性扁桃体炎,咽炎,喉炎等)常见的病原菌主要有金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化脓性链球菌、微球菌和棒状杆菌等)。1、涂片检查(先培养后涂片)。2、分离培养3、报告方式:同痰标本检查。W穿刺液标本穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等。正常穿刺液是无菌的,若从患者穿刺液
6、中查见致病菌或条件致病菌提示该部位有细菌感染。胸腔感染的病原菌以结核分枝杆菌多见;腹腔感染的病原菌以肠道细菌如大肠挨希菌、粪肠球菌,以及结核分枝杆菌多见;心包炎和关节腔液以金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌多见。1、涂片检查(先接种后涂片)2、分离培养:(1)普通培养(2)厌氧培养(3)结核菌培养3、报告方式:培养24h无细菌生长,报告“培养24h无细菌生长”查见细菌,报告菌名和药敏结果。V泌尿、生殖道标本(一)尿液标本中段尿培养加计数对于泌尿道感染的诊断有重要价值。细菌培养必须结合菌落计数辨别是否为病原菌。有致病菌或条件致病菌生长,菌落计数105/m1,提示感染(膀胱炎,
7、肾盂肾炎、肾或膀胱结核等)。常见病原菌主要有大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌和伤寒沙门菌等。1、中段尿标本采集法2、涂片检查:(1)一般细菌及淋病奈瑟菌(2)念珠菌(3)结核分枝杆菌3、一般细菌培养:如培养2d无细菌生长,即可弃去。(1)倾注平板法(2)平板接种环法(3)标准接种环法:若定量接种环含量为.001m1,则整个平板菌落数超过100个,可报告“菌落数105/m1”4、特殊培养:(1)淋病奈瑟菌培养(2)厌氧菌培养(3)结核分枝杆菌培养5、报告方式:培养24h细菌生长,报告“24h无细菌生长”查见细菌,报告菌名及其菌落计数(菌落数/ml)和药敏结果。(二)生殖道标本正常的内生殖器
8、是无菌的,而外生殖器(包括男性尿道口和女性阴道)有多种细菌寄生。查见病原菌提示有细菌感染。常见的病原菌主要有葡萄球菌、肠球菌、链球菌、淋病奈瑟菌、大肠埃细菌、变形杆菌等。1、涂片检查:革兰染色镜检2、分离培养:(1)普通培养(2)淋病奈瑟菌培养(3)阴道加特纳菌培养(4)报告方式:如查见淋病奈瑟菌、阴道加特纳菌等病原菌,报告菌名和药敏结果。“粪便标本正常情况下肠道中有多种细菌。引起感染性腹泻的病原微生物有:(1)细菌性:产毒素型腹泻、侵袭型腹泻、食物中毒、慢性腹泻;(2)真菌性;(3)病毒性。1、标本采集:(1)自然排便采集;(2)直肠试子。2、涂片检查:粪便标本因各种正常菌群含量甚多,仅以染
9、色性和形态无法分辩是否为病原菌。因此,粪便标本一般不作涂片检查。3、养:(1)沙门-志贺菌培养(2)致病性大肠埃细菌培养(3)霍乱弧菌培养(4)副溶血弧菌培养(5)小肠结肠炎耶尔森菌培养(6)真菌培养(7)菌群失调的细菌学检验4、报告方式:W脓液及创伤感染分泌物标本化脓性感染可由单种或多种细菌引起。常见病原菌主要有金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌和结核分枝杆菌、诺卡菌,以及梭杆菌和拟杆菌等。1、标本采集:(1)开放性脓肿和脓性分泌物;(2)大面积烧伤的创面分泌物;(3)封闭性脓肿2、涂片检查:根据形态和染色特点,可报告“查见革兰X性细菌,形似XX菌”或报告“未查见细菌”。3、养:1)普通培养2)厌氧菌培养3)嗜血杆菌及奈瑟菌培养4)结核分枝杆菌培养5)真菌培养4、报告方式:查见致病菌,报告菌名和药敏结果。