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1、知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练网络构建网络构建 知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练1构构建建基基因因表表达达载载体体是是基基因因工工程程的的核核心心。基基因因表表达达载载体体由由目目的的基基因因(插插入入基基因因)启启动动子子终终止止子子标标记记基基因因(如如抗抗生生素素基基因因)等等组组成成。启启动动子子位位于于基基因因的的首首端端；终终止止子子位位于于基基因因的的尾端。尾端。2基基因因表表达达需需要要启启动动子子与与终终止止子子的的调调控控，所所以以目目的的基基因因应应插插入到启动子与终止子之间的部位。入到启动子与终止子之间的
2、部位。知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练【例例1】下下图图是是绿绿色色荧荧光光蛋蛋白白转转基基因因克克隆隆猪猪的的培培育育过过程程图图，请请据图回答下列问题。据图回答下列问题。(1)过程用到的工具有。程用到的工具有。(2)过程常用的具体方法是程常用的具体方法是(3)重重组质粒中除含有目的基因外粒中除含有目的基因外还要含着要含着_、标记基因。基因。(4)图示示过程中涉及的具体技程中涉及的具体技术手段有手段有_、_、_。(5)该重重组细胞培养至一定胞培养至一定阶段可通段可通过_方法，从而一次方法，从而一次
3、获得多得多个个转基因猪。基因猪。知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练解解析析目目的的基基因因和和运运载载体体结结合合用用到到了了限限制制酶酶和和DNA连连接接酶酶。将将目目的的基基因因导导入入动动物物细细胞胞常常用用显显微微注注射射法法。重重组组质质粒粒中中除除含含有有目目的的基基因因外外还还要要含含有有启启动动子子、终终止止子子和和标标记记基基因因。图图中中涉涉及及了了转转基基因因技技术术、细细胞胞核核移移植植、动动物物细细胞胞培培养养、胚胚胎胎移移植植等等技技术术手手段段。若若想想一一次次获获得得多多个个基基因因猪猪，可可通通过过胚胚胎胎分分割割方方法法实现。实
4、现。答答案案(1)DNA连连接接酶酶、限限制制性性内内切切酶酶(不不全全不不正正确确)(2)显显微微注注射射法法(3)启启动动子子和和终终止止子子(4)转转基基因因技技术术细细胞胞核核移移植植动物细胞培养胚胎移植动物细胞培养胚胎移植(写出任意写出任意3个即可个即可)(5)胚胎分割胚胎分割知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练请据图回答下列问题。请据图回答下列问题。(1)在在培培育育转基基因因牛牛过程程中中，过程程常常用用的的方方法法是是_。转基基因因牛牛可可通通过分分泌泌乳乳汁汁来来产生生人人生生长激激素素，在在基基因因表表达达载体体中中，人人生生长激激素素基基因因的
5、的首首端端必必须含含有有_，其作用是能，其作用是能够被被_识别并并结合从而启合从而启动转录过程。程。(2)prG能能激激发细胞胞不不断断分分裂裂，通通过基基因因工工程程导入入该调控控基基因因来来制制备单克克隆隆抗抗体体，最可能是最可能是_细胞，胞，代表的代表的细胞具有胞具有_和和_的特点。的特点。知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练(2)浆浆细细胞胞能能分分泌泌特特异异性性抗抗体体，但但不不能能无无限限增增殖殖，故故导导入入prG的的浆浆细细胞胞既既能能分分泌泌特特异异性性抗抗体体，又又能能无无限限增增
6、殖殖。(3)农农杆杆菌菌中中的的Ti质质粒粒上上的的TDNA可可转转移移到到受受体体细细胞胞中中并并整整合合到到受受体体细细胞胞的的染染色色体体DNA上上，故故将将抗抗虫虫基基因因插插入入到到Ti质质粒粒的的TDNA上上，通通过过农农杆杆菌菌的的转转化化作作用用就就可可以以使使抗抗虫虫基基因因进进入入棉棉细细胞胞。可可利利用用能能与与抗抗虫虫基基因因表表达达的的蛋蛋白白质质发发生生特特异异性性结结合合的的抗抗体体，发发生生抗抗原原抗体反应，对目的基因表达的产物进行检测。抗体反应，对目的基因表达的产物进行检测。答答案案(1)显显微微注注射射法法启启动动子子RNA聚聚合合酶酶(2)B(浆浆)无无限
7、增殖产生特异性抗体限增殖产生特异性抗体(3)TDNA抗原抗体杂交抗原抗体杂交 知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练(1)基因工程的基本工具基因工程的基本工具限制限制酶酶DNA连接接酶酶载体体作用作用切割目的基因切割目的基因和和载体体拼接拼接DNA片段，片段，形成重形成重组DNA携携带目的基因目的基因进入受体入受体细胞胞作用部位作用部位两脱氧核苷酸的脱氧核糖与磷酸两脱氧核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二形成的磷酸二酯键常用常用类型型EcoR限制限制酶酶Sma限制限制酶酶Ecoli DNA连接接酶酶T4 DNA连接接酶酶质粒、粒、噬菌噬菌体的衍生物、体的衍生物、动植物
8、病毒植物病毒知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练(2)基因工程中目的基因的获取方法基因工程中目的基因的获取方法一一是是直直接接提提取取法法，即即利利用用限限制制酶酶直直接接从从供供体体细细胞胞DNA中中提提取取；二是人工合成法，包括逆二是人工合成法，包括逆(反反)转录法和人工化学合成法。转录法和人工化学合成法。(3)将目的基因导入受体细胞中的方法将目的基因导入受体细胞中的方法生物种生物种类植物植物细胞胞动物物细胞胞微生物微生物细胞胞常用方法常用方法农杆菌杆菌转化法化法显微注射法微注射法Ca2处理法理法受体受体细胞胞体体细胞胞受精卵受精卵原核原核细胞胞知识对接知识对接
9、能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练(4)目的基因的检测和表达常用方法归纳目的基因的检测和表达常用方法归纳检检测测转转基基因因生生物物的的染染色色体体DNA上上是是否否插插入入了了目目的的基基因因DNA分分子子杂杂交交；检检测测目目的的基基因因是是否否转转录录出出了了mRNA用用标标记记的的目目的的基基因因作作探探针针与与mRNA杂杂交交；检检测测目目的的基基因因是是否否翻翻译译成成了了蛋蛋白白质质从从转转基基因因生生物物中中提提取取蛋蛋白白质质，用用相相应应的的抗抗体体进进行行抗抗原原抗抗体体杂杂交交；个个体体生生物物学学水水平平的的鉴鉴定定一一般般包包括括抗抗虫虫、抗抗病病的的
10、接接种种实实验验，以以确确定定待待测测个个体体是是否否具具有有抗抗性性以以及及抗抗性性的的程程度度；基基因因工工程程产产品品需需要要与与天天然然产产品品的的活活性性比比较较，以以确确定定其其功能活性是否相同等。功能活性是否相同等。知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练【例例2】世世界界上上第第一一只只克克隆隆绵绵羊羊
11、“多多利利”的的培培育育程程序序如如图图所所示示。请请看看图图后回答问题。后回答问题。(1)写出写出图中中a、b所指的所指的细胞工程名称：胞工程名称：a_，b_。(2)实施施细胞工程胞工程a时，所需的受体，所需的受体细胞大多胞大多采用采用动物卵物卵细胞的原因是胞的原因是_。(3)“多利多利”面部的毛色是面部的毛色是_，请根据根据遗传学原理学原理说明判断的原因是明判断的原因是_。(4)继植植物物组织培培养养之之后后，克克隆隆绵羊羊的的培培育育成成功功，证明明动物物细胞核具有胞核具有_。知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练答案答案(1)核移植胚胎移植核移植胚胎移植(2)
12、具有使细胞核全能性表达的物质和营养条件具有使细胞核全能性表达的物质和营养条件(3)白色白色“多利多利”的全部细胞核基因来自白面绵羊的全部细胞核基因来自白面绵羊(4)全能性全能性知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练【预预测测2】甲甲流流(H1N1)在在世世界界各各地地大大面面积积蔓蔓延延，有有些些国国家家还还出出现现了了死死亡亡病病例例。科科学学家家已已分分离离出出H1N1病病毒毒(一一种种RNA病病毒毒)。某某制制药药厂厂根根据据下下面面流流程程图图生生产产预预防防和和治治疗疗甲甲流流的的抗抗体体，请据图回答有关问题。请据图回答有关问题。知识对接知识对接能力对接能力
13、对接方法对接方法对接对接精练对接精练(1)若若A细细胞胞是是小小鼠鼠骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞，则则B细细胞胞是是取取自自感感染染病病毒毒的的人人体体内内的的_细细胞胞，促促进进d过过程程的的常常用用诱诱导导剂剂是是_。(2)假假设设仅仅考考虑虑某某两两个个细细胞胞的的融融合合，则则可可形形成成_种种类类型型的的C细细胞胞，因因此此需需用用培培养养基基筛筛选选出出_(填填特特点点)的的D细胞用于培养。细胞用于培养。D细胞的名称是细胞的名称是_。知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练(3)理理论论上上，注注射射了了该该抗抗体体的的人人群群不不能能长长期期对对甲甲流流免免疫疫，
14、试试分析原因：分析原因：_。(4)不不同同种种动动物物的的体体细细胞胞融融合合，相相比比诱诱变变育育种种和和杂杂交交育育种种方方法，具有法，具有_等突出的优点。等突出的优点。(5)请请说说明明单单克克隆隆抗抗体体的的主主要要作作用用：_ _。知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练解解析析(1)由由于于本本题题的的目目的的是是制制备备用用于于预预防防和和治治疗疗甲甲流流的的单单克克隆隆抗抗体体，所所以以B细细胞胞只只能能是是取取自自感感染染H1N1病病毒毒的的动动物物或或人人体体内内的的B淋淋巴巴细细胞胞，经经诱诱导导剂剂聚聚乙乙二二醇醇或或灭灭活活的的病病毒毒等等诱诱
15、导导融融合合，得得到到的的杂杂交交瘤瘤细细胞胞才才能能用用于于生生产产预预防防和和治治疗疗甲甲流流的的单单克克隆隆抗抗体体。(2)仅仅考考虑虑两两个个细细胞胞的的融融合合，则则可可形形成成A细细胞胞A细细胞胞、B细细胞胞B细细胞胞、A细细胞胞B细细胞胞三三种种类类型型的的C细细胞胞，为为了了从从中中筛筛选选出出A细细胞胞B细细胞胞，必必须须用用特特定定的的选选择择培培养养基基进进行行筛筛选选，筛筛选选出出的的D细细胞胞(杂杂交交瘤瘤细细胞胞)既既能能无无限限增殖又能产生特异性抗体。增殖又能产生特异性抗体。知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练(3)因因为为单单链链RN
16、A容容易易发发生生变变异异，一一旦旦变变异异后后体体内内的的记记忆忆细细胞胞和和抗抗体体就就不不能能对对其其发发挥挥作作用用。(4)单单克克隆隆抗抗体体具具有有特特异异性性强强、灵灵敏敏度度高高、产产量量大大等等优优点点。(5)单单克克隆隆抗抗体体可可用用于于诊诊断断疾病、药物导向治疗等方面。疾病、药物导向治疗等方面。知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接精练对接精练答案答案(1)B淋巴淋巴(效应效应B)聚乙二醇聚乙二醇(PEG)(灭活的病毒灭活的病毒)(2)3既既能能无无限限增增殖殖又又能能产产生生特特异异性性抗抗体体杂杂交交瘤瘤细细胞胞(杂杂交交细胞细胞)(3)引起甲流的病毒不断发生变异引起甲流的病毒不断发生变异(意思相同则可意思相同则可)(4)目目的的性性强强；克克服服远远缘缘杂杂交交不不亲亲和和性性(能能有有效效地地打打破破物物种种的的生生殖隔离界限，意思相同即可殖隔离界限，意思相同即可)(任写一点任写一点)(5)作为诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物作为诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物(意思相同即可意思相同即可)知识对接知识对接能力对接能力对接方法对接方法对接对接
