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1、九组微生物的实验室培养详解九组微生物的实验室培养详解演示文稿演示文稿1页，共76页，星期三。优选九组微生物的实验室培养优选九组微生物的实验室培养2页，共76页，星期三。1.1.细菌的形态细菌的形态球菌球菌弧菌弧菌杆菌杆菌3页，共76页，星期三。二分裂二分裂2.2.细菌的繁殖细菌的繁殖3.3.细菌的菌落细菌的菌落.定义：定义：单个或者少数单个或者少数单个或者少数单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖细菌在固体培养基上大量繁殖时，会形成一个肉眼可见的、具有一定形时，会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的态结构的子细胞群体子细胞群体子细胞群体子细胞群体，叫做菌落。，叫做菌落。.特征：特征：大小、形
2、状、光泽度、颜色、硬度、透大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。明度等。.功能：功能：每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以以以以作为菌种鉴定的重要依据作为菌种鉴定的重要依据。为抵抗不良环境可形成细菌的休眠体为抵抗不良环境可形成细菌的休眠体为抵抗不良环境可形成细菌的休眠体为抵抗不良环境可形成细菌的休眠体芽孢芽孢芽孢芽孢4页，共76页，星期三。几种菌落及其形态5页，共76页，星期三。几种菌落及其形态6页，共76页，星期三。微生物需要的五大类营养要素物质是：微生物需要的五大类营养要素物质
3、是：. .微生物需要的营养物质及功能微生物需要的营养物质及功能1.1.碳源碳源碳源碳源 2. 2. 2. 2.氮源氮源氮源氮源 3. 3. 3. 3.生长因子生长因子生长因子生长因子 4. 4. 4. 4.无机盐无机盐无机盐无机盐 5. 5. 5. 5.水水水水：凡是能为微生物提供所需：凡是能为微生物提供所需碳元素碳元素的营的营养物质。养物质。无机碳源：无机碳源：COCO2 2；NaHCONaHCO3 3等等等等有机碳源：有机碳源：有机碳源：有机碳源：糖类糖类、脂肪酸、花生粉饼、脂肪酸、花生粉饼、石油等石油等构成细胞物质和一些代谢产物构成细胞物质和一些代谢产物异养微生物的能源异养微生物的能源异
4、养微生物的能源异养微生物的能源.概念概念.来源：来源：.作用：作用：1.1.微生物的碳源微生物的碳源7页，共76页，星期三。无机氮源：无机氮源：无机氮源：无机氮源：N N N N2 2 2 2、NHNHNHNH4 4 4 4+ + + +、NONONONO3 3 3 3- - - -、NHNHNHNH3 3 3 3等。等。等。等。有机氮源：有机氮源：有机氮源：有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等酸等酸等酸等凡是能够为微生物提供凡是能够为微生物提供凡是能够为微生物提供凡是能够为微生物提供N N N N元素元素元素元
5、素的营养物质。的营养物质。的营养物质。的营养物质。主要用于合成蛋白质、核酸及含主要用于合成蛋白质、核酸及含主要用于合成蛋白质、核酸及含主要用于合成蛋白质、核酸及含N N N N的代谢产的代谢产的代谢产的代谢产物。物。物。物。2.2.微生物的氮源微生物的氮源.概念：概念：概念：概念：.来源：来源：来源：来源：.作用：作用：作用：作用：3.3.生长因子生长因子.常见的生长因子：常见的生长因子：常见的生长因子：常见的生长因子：.概念：概念：概念：概念：.作用：作用：作用：作用：微生物生长不可缺少的微量有机物。（微生物生长不可缺少的微量有机物。（微生物生长不可缺少的微量有机物。（微生物生长不可缺少的微
6、量有机物。（而自而自身不能合成）身不能合成）酶和核酸的组成成分。酶和核酸的组成成分。酶和核酸的组成成分。酶和核酸的组成成分。维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。8页，共76页，星期三。. .培养基培养基 1.1.概念：培养基（培养液）是由人工方法配制概念：培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的营养基质。而成的，专供微生物生长繁殖使用的营养基质。3.3.3.3.培养基的类型和用途培养基的类型和用途培养基的类型和用途培养基的类型和用途2.2.培养基的成分：培养基的成分：一般都含有一般都含有
7、一般都含有一般都含有水水、碳源碳源、氮源氮源、无机盐无机盐等营养物质，等营养物质，另外还需要满足微生物生长对另外还需要满足微生物生长对pHpHpHpH、特殊营养物质特殊营养物质以以以以及及及及氧气氧气等的要求。等的要求。等的要求。等的要求。 P14P14P15P159页，共76页，星期三。培养基的用途培养基的用途液体培养基：增菌液体培养基：增菌固体培养基：纯化，增菌固体培养基：纯化，增菌半固体培养基：动力检测，保种半固体培养基：动力检测，保种10页，共76页，星期三。划分标准划分标准培养基种类培养基种类特点特点用途用途物理性质物理性质化学成分化学成分天然培养基天然培养基合成培养基合成培养基用途
8、用途鉴别培养基鉴别培养基培养基的种类培养基的种类不加凝固剂不加凝固剂加凝固剂，如加凝固剂，如琼脂琼脂工业生产工业生产观察微生物的运动、观察微生物的运动、分类鉴定分类鉴定微生物分离、鉴定、微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种活菌计数、保藏菌种含化学成分不明确的天然物含化学成分不明确的天然物质质工业生产工业生产培养基成分明确培养基成分明确分类、鉴定分类、鉴定在培养基中加入某种化学物质在培养基中加入某种化学物质, ,以以抑制不需要的微生物的生长抑制不需要的微生物的生长, ,促进促进所需要的微生物的生长所需要的微生物的生长培养、分离出特定微培养、分离出特定微生物生物在培养基中加入某种指示剂或化学在培养
9、基中加入某种指示剂或化学药品药品, ,用以鉴别不同种类的微生物用以鉴别不同种类的微生物鉴别不同种类微生鉴别不同种类微生物物选择培养基选择培养基液体培养基液体培养基半固体培养基半固体培养基固体培养基固体培养基P84P8411页，共76页，星期三。练习练习1.不能作为异养微生物碳源的是（不能作为异养微生物碳源的是（ ）A牛肉膏牛肉膏B含碳有机物含碳有机物C石油石油D含碳无机物含碳无机物D D14页，共76页，星期三。2.自养型微生物与异养型微生物的培养基的自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是（主要差别是（ ）A碳源碳源B氮源氮源C无机盐无机盐D生长因子生长因子 A A15页，共76页，星
10、期三。3.下列关于生长因子的说法中，不正确的一项是下列关于生长因子的说法中，不正确的一项是（ ）A是微生物生长不可缺少的微量有机物是微生物生长不可缺少的微量有机物B是微生物生长不可缺少的微量矿质元素是微生物生长不可缺少的微量矿质元素C主要包括维生素、氨基酸和碱基等主要包括维生素、氨基酸和碱基等D一般是酶和核酸的组成成分一般是酶和核酸的组成成分B B16页，共76页，星期三。4 4. .通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在碳源为纤维素的培养基上，大部分微生物无法生长；微生物。在碳源为纤维素的培养基上，大部分微生物无法生长；
11、在培养基中加入青霉素，可以抑制细菌和放线菌。利用上述方法在培养基中加入青霉素，可以抑制细菌和放线菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出（）能从混杂的微生物群体中分别分离出（）大肠杆菌大肠杆菌霉菌霉菌放线菌放线菌纤维素分解菌纤维素分解菌A.A.B.B.C.C.D.D.解析：解析：选选A A。本题考查了微生物分离知识。纤维素分解菌可。本题考查了微生物分离知识。纤维素分解菌可以利用纤维素，大部分微生物却不能；培养基中加入青霉素可以利用纤维素，大部分微生物却不能；培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌，但霉菌能够生长。以抑制细菌和放线菌，但霉菌能够生长。17页，共76页，星期三。编号编号成分
12、成分含量含量粉状硫粉状硫10g10g（NHNH4 4）2 2SOSO4 40.4g0.4gK K2 2HPOHPO4 44.0g4.0gMgSOMgSO4 49.25g9.25gFeSOFeSO4 40.5g0.5gCaClCaCl2 20.5g0.5gHH2 2OO100ml100ml5 5右表是某微生物培养基右表是某微生物培养基成分，请据此回答：成分，请据此回答：（1 1）右表培养基可培养）右表培养基可培养的微生物类型是的微生物类型是 。（2 2）若不慎将过量）若不慎将过量NaClNaCl加入培养基中。如不想浪费加入培养基中。如不想浪费此培养基，可再加入此培养基，可再加入 ，用于培养，用于
13、培养 ， 自养型微生物自养型微生物 含碳有机物含碳有机物 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 18页，共76页，星期三。（3 3）若除去成分）若除去成分，加入，加入（CH2OCH2O），该培养基可用于培养），该培养基可用于培养 。（4 4）表中营养成分共有）表中营养成分共有_ 类。类。（5 5）不论何种培养基，在各种成分都）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是溶化后分装前，要进行的是 。（6 6）右表中各成分重量确定的原则是）右表中各成分重量确定的原则是_。 （7 7）若右表培养基用于菌种鉴定，）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分应该增加的成分 。固氮微生物固氮微生物 3 调整
14、调整pHpH 依微生物的生长需要确定依微生物的生长需要确定 琼脂（或凝固剂）琼脂（或凝固剂） 编号编号成分成分含量含量粉状硫粉状硫10g10g（NHNH4 4）2 2SOSO4 40.4g0.4gK K2 2HPOHPO4 44.0g4.0gMgSOMgSO4 49.25g9.25gFeSOFeSO4 40.5g0.5gCaClCaCl2 20.5g0.5gHH2 2OO100m100ml l19页，共76页，星期三。1.1.无菌技术的概念无菌技术的概念 无菌操作泛指无菌操作泛指在培养微生物的操作在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。中，所有防止杂菌污染的方法。无论是无论是随后将要学到
15、的随后将要学到的倒平板倒平板、平板划线平板划线操操作，还是作，还是稀释平板涂布法稀释平板涂布法，其操作中的，其操作中的每一步都需要做到每一步都需要做到“无菌无菌”，即防止，即防止杂菌污染。只有熟练、规范地进行无杂菌污染。只有熟练、规范地进行无菌操作，才可能成功地培养微生物。菌操作，才可能成功地培养微生物。 . .无菌技术无菌技术20页，共76页，星期三。（）（）消毒定义：消毒定义：利用化学或物理方法，杀死大部份致利用化学或物理方法，杀死大部份致病微生物的过程。区分为病微生物的过程。区分为高程度消毒高程度消毒（High-level DisinfectionHigh-level Disinfect
16、ion）、）、中程度消中程度消毒毒（Intermediate-level DisinfectionIntermediate-level Disinfection）、）、低程度消毒低程度消毒（Low-level DisinfectionLow-level Disinfection）三种）三种方式。方式。2.2.消毒与灭菌的概念消毒与灭菌的概念 21页，共76页，星期三。（2 2）灭菌的定义：）灭菌的定义：以化学剂或物理方法消灭以化学剂或物理方法消灭所有所有微生物，微生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒，而达到病毒，而达到完全无菌完全无菌之过程。之过程。 灭菌与消毒技术是微生物有关工作灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。中最普通也是最重要的技术。22页，共76页，星期三。分类分类定义定义方法方法灭菌法灭菌法杀灭一切微生物杀灭一切微生物物理法：热力、辐射、微物理法：热力、辐射、微波、等离子体波、等离子体化学法：醛类、烷化剂化学法：醛类、烷化剂高效消高效消毒法毒法杀灭一切致病微杀灭一切致病微生物生物紫外线、含氯剂、臭氧、紫外线、含氯
