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1、Word文档如何选择培养基、培养温度和培养时间?微生物EM(环境监测)检测中最常遇到的问题之一与培育策略和培育基的选择有关。 使用一种培育基(TSA)或者两种培育基(TSA和SDA),使用单个温度、两个温度,是否从低温到高温,还是高温到低温。影响微生物回收率的因素有:结果观看时间(单一温度通常比两个温度早)、成本(只用TSA比使用TSA+SDA廉价)以及微生物回收率的凹凸。很少有讨论报告回收率相关的培育条件选择,但是,已有报告单一温度条件30-35培育对于霉菌回收的不如两个温度培育的好。下面的数据总结了在我们试验室进行的一项小讨论。 采纳标准TSA LP80培育基、分别使用30-355天、25
2、-305天、20-2572小时+30-3548小时3种方案进行评价。以SDA培育基20-255天条件为对比,对霉菌的回收状况进行评价。 这些样本是从生产车间入口四周的非受控区域采集的,以确保足够高的计数以获得合适的数据大小。在每个地点取3个表面接触皿和1个浮游菌(1立方SAS180),每天取12个点。每个点取3组重复样本,每个培育温度测试1组样品。试验2中还收集了SDA样本。样本分别在12月至1月,以及9个月后的8月至9月采集,以掩盖季节变化。培育后对每组样品进行计数,以确定菌落计数。在试验2中,三位分析员还计算了每个组的霉菌菌落数,并计算了每个样本的平均值。 图1、在试验1的3天内,在每种培
3、育策略下检测到的细菌菌落总数 图2、在试验2的8月至9月的3天内,在每种培育策略下检测到的细菌菌落总数 总的来说,25-30的单一温度日变化最小,可能比其他2种方法回收了更多的菌落。这种类型的测试存在相当大的差异,因此需要讨论更大的面以获得更牢靠的数据集。 霉菌检测 在整个试验过程中,每个试验点霉菌菌落的发生频率都被记录下来。结果如图3所示。正如我们所看到的那样,SDA(22.5)回收了大部分的菌落,组合温度(25-30+30-35)次之,然后是25-30,最终是30-35。在30-35条件下,回收率小于SDA(22.5)的1%。 图3.在3天的试验中,每种培育策略检测到的霉菌菌落总数 总结 假如成本是驱动因素,那么单一培育基,组合温度培育(从低到高)的TSA是最佳选择。假如速度是主要的要求,那么25-30的单一温度是最好的。假如需要全部回收,那么优选2种培育基,TSA和SDA。 3