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1、文档供参考，可复制、编制，期待您的好评与关注！ 高效液相色谱仪培训检测一、选择题1. 以下属于光学性质检测器的是（ ） A. 紫外-可见光检测器 B. 荧光检测器 C. 电导检测 D. 光声检测器2. HPLC流动相对溶剂的要求有（ ） A. 纯度高、化学稳定性好B. 对待检测样品具有合适的极性和选择性C. 用于紫外检测时，溶剂在检测器的工作波长下不能有紫外吸收D. 分析纯级别即可以被用来作为流动相3. 高效液相色谱的流动相常见的脱气方法有（ ）A. 超声波脱气 B. 抽真空脱气 C. 在线真空脱气 D. 加热脱气4. 液相使用过程中若发现有盐析出导致压力较高，应该选择用哪种流动相进行冲洗（
2、） A. 水 B. 甲醇 C. 乙腈 D. 缓冲盐5. 不可以用来对泵头进行冲洗的试剂是（ ） A. 异丙醇 B. 甲醇 C. 水 D. 缓冲盐6. 在高效液相色谱流程中，试样混合物在（ ）中被分离。 A. 检测器 B. 记录器 C. 色谱柱 D. 进样器7. 液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜（ ） A. 0.5m B. 0.45m C. 0.6m D. 0.55m8. 在液相色谱法中，提高柱效最有效的途径是（ ） A. 提高柱温 B. 降低板高 C. 降低流动相流速 D. 减小填料粒度 9. 在液相色谱中，不会显著影响分离效果的是（ ） A. 改变固定相种类 B. 改变流动相流速
3、C. 改变流动相配比D. 改变流动相种类10. 在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是（ ） A. 贮液器 B. 输液泵 C. 检测器 D. 温控装置二、判断题11. 液相色谱柱没有方向区别，所以接色谱柱时无需根据流路方向来接。（ ）12. 液相色谱仪使用完后，如果管路中有缓冲盐，需要用水冲洗。（ ）13. 不建议使用乙醇代替甲醇作为常用的流动相，但可以作为低含量改性剂使用。（ ）14. 脱气后的溶剂放置时间长了，又会溶解新的气体，使用时需要重新处理。（ ）15. 乙腈作为流动相时，其体积浓度比例最好不超过75%。（ ）16. 液相使用人超过申请使用时间后，若后续无其他人使
4、用，可以不用申请，继续使用。（ ）17. 流动相必须贴有配制标签，用水做流动相时需要每天进行更换。（ ）18. 若临时有事离开，可以让未经培训的同事，经自己家临时培训后使用液相设备。（ ）19. 间隔3小时以上不用液相时，可以不用关闭液相仪器和紫外灯。（ ）20. 液相使用结束，用大量水相冲洗完系统和色谱柱后即可关闭系统。（ ）三、填空题：21. 高效液相色谱法系采用 将规定的流动相泵入色谱柱进行分离测定的。22. 高效液相色谱仪基本由 ， ， ， 和 组成。 23. 色谱系统的适用性试验通常包括 、 、 、 等四个指标。 24. 开机步骤：接通电源，依次开启 、 、 、 ，待泵和检测器自检结
5、束后，打开 、 ，最后打开 。 25. 高效液相的维护：最后一次进样完成后，应用流动相冲洗 分钟，以保证洗脱完全，若流动相中含有无机盐类，应用 冲洗 分钟。四、简答题：26. 流动相为什么要脱气？常用的脱气方法有哪几种？ 27. 操作液相时发现压力很小，可能的原因是什么；操作过程若发现压力非常高，可能的原因是什么？ 28. 长时间分析中如何保证液相色谱的保留时间漂移不大？29. 高效液相色谱有哪几种定量方法，其中哪种是比较精确的定量方法，并简述之。答案：一、 选择题1-5：AB，ABC，ABCD，A，CD 6-10：C，B，D，B，B二、 判断题11-20：错，对，对，对，对，错，对，错，错，
6、错三、 填空题21. 高压输液泵 22. 泵，进样器，色谱柱，检测器和色谱数据处理器 23. 理论板数、分离度、重复性和拖尾因子 24. 电源、 真空脱气机、泵、 检测器；电脑显示器、主机；色谱工作站 25. 20，高纯水，30四、 简答题1. 流动相中溶解气体存在以下几个方面的害处： （1）气泡进入检测器，引起光吸收或电信号的变化，基线突然跳动，干扰检测。 （2）溶解在溶剂中的气体进入色谱柱时，可能与流动相或固定相发生化学反应。 （3）溶解气体还会引起某些样品的氧化降解，对分离和分析结果带来误差。 因此，使用前必须进行脱气处理。 常用的脱气法有以下几种： A、 加热脱气法；B、真空脱气法C、
7、超声波振荡脱气法。 2. 压力很小：排气阀没有完全关闭、色谱柱没有连接不良、系统的管件连接有漏、泵的单向阀闭锁不全、泵腔有气泡。 压力过高：管路已堵、色谱柱堵塞。3. 要保证保留时间的长期稳定性，主要从几方面来考虑：（1）保证仪器的运行稳定性，泵流量稳定，比例阀工作正常，流路没有渗漏和堵塞现象，避免泵和管路中存在气泡。（2）温度尽量保持恒定，最好配备柱温箱，房间要有空调，柱温与方面的温差要小。（3）注意挥发性流动相的密封性，流动相的温度应与周围环境温度保持一致，避免采用高比例的流动相。（4）分析前流动相平衡足够的时间。（5）流动相的PH值与样品（离子化合物）的等电点最好相差两个单位以上。（6）采用质量好的色谱柱，柱子在分析前必须冲洗干净。4. 高效液相色谱的定量方法主要有归一化法、外标法和内标法。其中内标法是比较精确的定量方法。它是将已知量的内标物加到已知量的试样中，在进行色谱测定后，待测组分峰面积和内标物峰面积之比等于待测组分的质量与内标物质量之比，求出待测组分的质量，进而求出待测组分的含量。4 / 4
