实验三 白细胞分类计数 DC[原理]将血液制成血涂片， 用瑞氏染液染色，根据各 种白细胞形态特征分类计 数100个白细胞，即可求 出各种白细胞的相对比值 （百分率）[器材] 1、显微镜 2、采血用具 3、载玻片、推片、蜡笔 4、分类计数器[试剂] 1、瑞氏染液或瑞氏-姬 姆萨染液 2、PH6.4 - 6.8磷酸盐缓冲液一、血片制作：（示教） 1、良好涂片标准：呈头、体、尾舌形血膜厚薄适宜 两边留有空隙头体尾2、涂片好坏与下列因素有关： 血滴大小 推片与玻片之间角度推片速度二、染色 1、染色方法： 用蜡笔在血膜两头划线 将血片平放在桌上 瑞氏染液3～5滴染30s ～１分钟 加等量缓冲 液混匀染3～5分钟 细 小流水冲去染液 干燥 后镜检 2、染色结果判断： 1）正常：外观呈粉红色镜下红细胞染粉红色 ，可见有碟状感白细胞浆中的颗粒能 显示各种细胞的特有色彩 ；核染紫红色，染色质清 楚，粗细松紧可辨 2）偏酸：红细胞和嗜酸性颗粒 偏红，白细胞核呈浅兰色 或不着色太酸则只见一片红染 ，白细胞除嗜酸性颗粒外 ，均不着色。
3）偏碱：细胞呈灰兰色 ，白细胞颗粒深暗，嗜酸 性颗粒变成暗褐色，甚至 黑色中性颗粒也偏粗偏 碱（紫黑色）红细胞偏 蓝、深蓝，血片过厚的地 方呈绿色 3、注意事项： １)未干透血膜，染色时 易脱落，故血膜应干透再 染色 ２)冲洗前，先在低倍镜 下观察有核细胞是否着色 ，否则适当延长染色时间 ３)染液不能过少，以防 蒸发，染料沉着在血膜上 不易冲掉，影响观察 ４)勿先倒掉染液，直接 流水冲洗，防染料沉着 ５)染色应注意保存血片 尾部，不能用蜡笔划去， 因体积大的细胞常在此出 现 三、 分类方法： 制片 染色 低倍镜观察（内容），选 择细胞分布均匀、染色好 的部位 转油镜下计数 100～200个白细胞,求出 各种白细胞所占百分比细胞分布: 头体部以淋巴细胞较多 尾部和两侧以中性粒、单核细胞较多, 片尾部,异常、大的细胞 较多.一般选择片头至片尾 的2/3区域计数较好,即体 尾交界处,按一定方式,有 规律的移动视野头体尾四、外周血正常白细胞形 态： 2、大小不均：中毒颗粒：空泡变性：空泡变性：杜勒体：核棘突：巨型变和分叶过多核变性：核棘突 核碎裂 核固缩Ⅰ型（空泡型） Ⅲ型（不成熟型） Ⅱ型（不规则型）浆细胞型 幼稚型 单核细胞型[注意事项]： １、有时病人白细胞极 少（一张片<100个WBC ），可数50个细胞，再算 出百分数，同时应注明， 或数2张片子，并注明。
２、发现幼稚或异常白 细胞，应分类报告，包括 在分类百分率中 ３、 如遇到不能确认的 细胞，应另列入分类不明 一项，如实报告，并保留 血片 ４、 发现有核红细胞， 应报告分类100个白细胞 所见有核红细胞数 ５、按一定顺序移动视 野 ６、白细胞总数×各种白细胞的百分率，即得各种 白细胞的绝对值。