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1、加试特训7生物技术实践相关综合应用(A)1(2016仙居县校级月考)请回答与“果酒和果醋制作”实验有关的问题：图1(1)葡萄先用水洗净后，需用鲜红紫色的_溶液浸泡5 min；榨汁前需要除去果柄，此操作是在清洗之_(填“前”或“后”)进行的。(2)接种菌种前干酵母制成糊状后，为使酵母迅速发生作用，可加极少量_。(3)葡萄浆放入发酵瓶中，装量不要超过_。(4)为缩短制作果醋的周期，下列选项中采取的措施无效的是_。A用果酒为原料B增加醋化醋杆菌的数量C控制适宜的发酵温度D发酵阶段封闭充气口(5)在葡萄酒和葡萄醋发酵的整个过程中，某物质浓度随时间变化的示意图如图2，该物质是_。2(2017台州月考)如
2、图是“分离以尿素为氮源的微生物”实验的基本流程，请回答下列问题：(1)该实验培养基可以不含有_。A尿素 B氯化钠C葡萄糖 D琼脂(2)尿素溶液可用_使之无菌。若要检查B过程灭菌是否彻底，可以采用的方法是_。(3)图中步骤C为_。相对于划线分离法，过程D涂布分离法的优点是_。(4)如果菌落周围出现_色环带，说明该菌落能分泌脲酶。3(2016浙江月考)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图1所示)。(1)图1中，为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以_作为唯一碳源。、过程需重复几次，目的是_。(2)某同学尝
3、试过程的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图2所示，该同学的接种方法是_；推测该同学接种时可能的操作失误是_。(3)以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，工程酵母菌的发酵罐需要先排气，其原因是_。(4)上述工程酵母菌培养过程中，有关操作正确的是_。A玻璃刮刀用火焰灼烧进行灭菌B培养基分装到培养皿后进行灭菌C倒平板和取菌液都必须在酒精灯火焰旁进行D获得的菌种如果需要保存，可置于37 恒温保存4如表是4组生物学实验培养基，请回答下列问题。(1)进行动物细胞培养应选用_培养基(填组别)。在进行细胞培养时，首先，将动物体内的一部分组织取出，经过机械消化或_消化，使其分散
4、成单个的细胞。如果是培养胚胎干细胞，则首先需要在培养皿底部制备一层胚胎成纤维细胞，称为_，这层细胞具有_特点。胚胎干细胞是一种未分化细胞，具有_性和_核型。(2)分离以尿素为氮源的细菌应选用培养基b。在含有_酶的细菌菌落周围会出现_，这是由于尿素被分解产生的_使pH升高，酚红指示剂产生颜色变化。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力_。该实验用的分离方法是_。(3)用培养基a进行植物组织培养，则培养基还需要加入_。(4)下表对应关系中，错误的是_。5.(2016杭州一模)据报道，一些企业生产的速冻食品中检出金黄色葡萄球菌超标，加上熟卤制品的大肠杆菌超标，“细菌门”事件引起公众普遍关注。金黄色葡
5、萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环。请回答下列问题：(1)某生物兴趣小组欲检测某果汁类食品中是否含有金黄色葡萄球菌以及该菌的含量。配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后_，分装到锥形瓶后利用_进行灭菌，在无菌状态下加入卵黄液(100 mL10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀)摇匀后立即倒平板。接种：该小组采用涂布分离法检测果汁样品中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_；然后，将1 mL果汁样品稀释10倍，在3个平板上用涂布分离法
6、分别接入0.1 mL稀释液。培养及结果：将培养皿_放入恒温培养箱中经适当培养，3个平板上的菌落数分别为19、18和17。据此可得出每升果汁样品中的活菌数为_。(2)下图A和B中，_表示的是用涂布分离法接种培养后得到的结果。(3)下列有关常用涂布分离法的操作正确的是_。A在超净工作台中进行接种时应关闭紫外灯B接种前需先稀释，然后过滤除去杂菌C在每个固体培养基表面都可形成单菌落D玻璃刮刀浸泡在70%的酒精中灭菌，不用灼烧(4)菌种保存：在无菌条件下将单菌落用接种环取出，再用划线分离法接种在空白_上，在37 下培养24 h后，置于4 冰箱中保存。6(2016浙江诸暨中学联谊学校联考)泡菜是人们喜爱的
7、开胃食品，请回答：(1)泡菜是利用天然微生物在_条件下进行发酵，发酵产物有有机酸和_等。(2)泡菜中的酸味主要来自_的发酵产物。A酵母菌 B醋杆菌C乳酸菌 D黑曲霉(3)在西餐的泡菜中通常要加一点果醋如苹果醋，苹果醋制作的原料是苹果酒和蒸馏水的混合物，两者的比例一般为_。A12 B14C21 D41(4)由于泡菜中含有一定量的对人体有害的_，所以需要对其进行定量测定，常用的方法是_。(5)泡菜腌制过程中往往要加入一定量的白酒，其作用是_和_。7(2016浙江金华十校联考)酶经过固定化后，不仅能提高酶的稳定性，而且容易与产物分开，具有可反复使用等优点。下图为利用枯草杆菌生产淀粉酶及酶固定化实验流
8、程图，回答有关问题：(1)筛选高表达菌株的最简便方法之一是_，一般通过_、_两种手段实现。筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用_培养基进行扩大培养。(2)下列不会影响发酵速率的是_。A氧气供应量 B发酵液营养配比C接种的菌量 D接种的方式(3)利用物理或化学的方法将淀粉酶固定在_的介质上成为固定化酶。答案精析1(1)高锰酸钾后(2)蔗糖(3)(4)D(5)乙醇(酒精)2(1)B(2)G6玻璃漏斗过滤将空白培养基放在适宜温度下培养一段时间，观察有无菌落出现(3)倒平板单菌落更易分开(4)红解析(1)分解尿素的细菌是异养微生物，因此培养基中应该加入有机碳源，如葡萄糖；分离分解尿素的细菌的培养基从功能
9、上分属于选择培养基，应该以尿素为唯一氮源；从物理性质上分属于固体培养基，因此应加入凝固剂琼脂。故选B。(2)尿素溶液可用G6玻璃漏斗过滤使之无菌。若要检查B过程灭菌是否彻底，可以采用的方法是将空白培养基放在适宜温度下培养一段时间，观察有无菌落出现。(3)图中步骤C为倒平板。相对于划线分离法，过程D涂布分离法的优点是单菌落更易分开。(4)如果菌落周围出现红色环带，说明该菌落能分泌脲酶。3(1)淀粉筛选出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(2)涂布分离法涂布不均匀(3)工程酵母菌利用淀粉的速度很快，发酵产生CO2的速度也很快(4)C4(1)d胰蛋白酶(或“胰酶”)饲养层抑制分化，促进生长全能性二倍体
10、(2)脲红色环带NH3越强涂布分离法(3)植物生长调节剂(或“植物激素”)(4)A解析(1)进行动物细胞培养要选用液体培养基，因此应选择d培养基。在进行细胞培养时，首先，将动物体内的一部分组织取出，经过机械消化或胰蛋白酶(或“胰酶”)消化，使其分散成单个的细胞。如果是培养胚胎干细胞，则首先需要在培养皿底部制备一层胚胎成纤维细胞，称为饲养层，这层细胞具有抑制分化，促进生长特点。胚胎干细胞是一种未分化细胞，具有全能性和二倍体核型。(2)分离以尿素为氮源的细菌应选用以尿素为唯一氮源的培养基，因此应选择培养基b。在含有脲酶的细菌菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的NH3使pH升高，酚红指示
11、剂产生颜色变化，变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力越强。该实验用的分离方法是涂布分离法。(3)进行植物组织培养时，需要在培养基中加入植物生长调节剂(或“植物激素”)。(4)b培养基需用G6玻璃漏斗过滤的尿素溶液，A错误；培养皿应该选用高压蒸汽灭菌法，B正确；超净台应该用紫外灯照射来消毒，C正确；自然生长的茎段应该用70%酒精和5%次氯酸钠进行消毒，D正确。5(1)调节pH高压蒸汽灭菌锅检测培养基平板灭菌是否合格倒置1.8106(2)B(3)A(4)斜面6(1)无氧醇类物质(2)C(3)B(4)亚硝酸盐光电比色法(5)抑制杂菌的生长调味解析在无氧条件下，假丝酵母和乳酸菌利用菜中的糖和其他营养
12、物质进行发酵，发酵产物有有机酸和醇类物质等。利用果酒制作果醋时，将200 mL果酒与800 mL蒸馏水混合作为发酵的原料。泡菜制作过程中产生的亚硝酸盐可以与对氨基本磺酸发生重氮化反应，产物再与N1萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物，可用光电比色法定量测定。白酒既可以杀菌抑菌，又可以起到调味的作用。7(1)单菌落分离划线分离(稀释)涂布分离液体(2)D(3)非水溶性解析(1)单菌落分离是筛选高表达菌株的最简便方法之一，一般通过划线分离和涂布分离两种手段实现。筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用液体培养基进行扩大培养。(2)接种的方式不会影响发酵速率。(3)利用物理或化学的方法将淀粉酶固定在非水溶性的介质上成为固定化酶。7
