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1、上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，
2、可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注上海海洋大学硕士学位论文天然产物对非酶糖基化的抑制作用摘要非酶糖基化反应指的是氨基化合物蛋白质、氨基酸与羰基化合物还原糖之间发生的一系列非酶促反应，最终产物为非酶糖基化终产物（AGEs）。非酶糖基化与糖尿病、动脉粥样硬化、老年痴呆症、肾病等病症密切相关。因此，非酶糖基化的相关研究对于人类健康具有重大意义。目前对于非酶糖基化反应的抑制作用研究正处于初级阶段，以抑制非酶糖基化反
3、应为治疗靶点的药物比较罕见，且氨基胍等疗效较好的抑制剂多对人体具有较强的副作用。因此，研究开发安全、高效的非酶糖基化抑制剂具有重要意义。本文采用果糖与谷氨酸于沸水浴下反应模拟食源性非酶糖基化反应，乙二醛与牛血清蛋白（BSA）于 37下恒温培养模拟生理条件下非酶糖基化反应；检测了非酶糖基化反应中果糖胺、二羰基化合物、5-羟甲基糠醛和荧光性末端产物的生成量，通过上述指标，考察非酶糖基化的反应程度。从黄酮类化合物中选取黄酮醇类代表化合物槲皮素、芦丁和异黄酮类代表化合物葛根素，分析测试了黄酮类化合物对非酶糖基化的抑制作用；从天然多糖中选取壳聚糖与黄原胶在酸性和碱性条件下降解寡糖，分析测试了天然多糖对非
4、酶糖基化的抑制作用。本研究包括以下几个部分：1.黄酮类化合物对食源性非酶糖基化反应的抑制作用研究表明：槲皮素、芦丁和葛根素皆可促进果糖胺的生成，而对二羰基化合物的生成具有较强的抑制作用。槲皮素与芦丁对非酶糖基化反应末端产物表现出显著的抑制作用，芦丁对 5-羟甲基糠醛具有抑制作用。在反应时间为 9 h，样品浓度为 5.0 mmol/L时槲皮素与芦丁对荧光性末端产物的抑制率分别1上海海洋大学硕士学位论文达到 80.5%，66.9%，其中槲皮素的抑制作用强于氨基胍。而葛根素对荧光性末端产物无显著影响。槲皮素、芦丁与葛根素分子中芳烃基的取代位置不同可能是导致其非酶糖基化抑制能力差异的原因。2.黄酮类化
5、合物对生理条件下非酶糖基化反应的抑制作用研究表明槲皮素、芦丁和葛根素皆促进果糖胺的生成，而抑制二羰基化合物的生成。槲皮素与芦丁对非酶糖基化反应末端产物表现出显著的抑制作用。在反应时间为 9 h，样品浓度为 5.0 mmol/L时，槲皮素与芦丁对二羰基化合物的抑制率分别为 28.8%和 50.5%。而葛根素对末端产物无显著影响，这与食源性非酶糖基化实验结果相似。槲皮素、芦丁与葛根素分子中芳烃基的取代位置不同可能是导致其非酶糖基化抑制能力差异的原因。3.天然多糖及其衍生物对食源性非酶糖基化反应的抑制作用研究表明壳聚糖、黄原胶酸降解与碱降解寡糖皆对食源性非酶糖基化反应的中间产物果糖胺、二羰基化合物和
6、 5-羟甲基糠醛的生成皆具有促进作用；壳聚糖和黄原胶酸降解产物对荧光性末端产物具有促进作用，黄原胶碱降解寡糖对末端产物表现出显著的抑制作用。反应时间为 9h，样品浓度为 1.0mg/mL时，抑制率为 33.3%。而壳聚糖和黄原胶酸降解产物对末端产物具有促进作用。这可能与天然多糖的抗氧化能力和本身含有的还原糖基团有关。4.天然多糖及其衍生物对生理条件下非酶糖基化反应的抑制作用研究表明壳聚糖、黄原胶酸降解与碱降解寡糖对生理条件下非酶糖基化反应的中间产物果糖胺、二羰基化合物和 5-羟甲基糠醛的生成都表现出促进作用；壳聚糖和黄原胶酸降解产物对荧光性末端产物具有促进作用，而黄原胶碱降解寡糖对末端产物表现
7、出较强的抑制作用。反应时间为 8d，样品浓度为 1.0 mg/mL时，抑制率为 41.2%。而壳聚糖和黄原胶酸降解产物对末端产物具有促进作用，这与食源性非酶糖基化的实验结果相一致。这可能与天然多糖的抗氧化能力和本身含有的还原糖基团有关。关键词：非酶糖基化，黄酮类化合物，天然多糖2上海海洋大学硕士学位论文Inhibition of nonenzymatic glycation by natural productsABSTRACTNonenzymatic glycation refers to a series of non-enzymatic reaction between theamino
8、 compounds of proteins, amino acids with reducing sugars of carbonyl compounds.The final product is the non-enzymatic glycation end products (AGEs). Non-enzymaticglycation also have been with implicated in a variety of diseases, such as diabetes,atherosclerosis, Alzheimers disease, kidney disease an
9、d other illnesses. Therefore, theresearch of non-enzymatic glycation is important for human health. Because of theirimportance, inhibitors of nonenzymatic glycation have been considered as compounds ofinterest for a long time. For its study is in the primary stage, there is little drugs astherapeuti
10、c targets to restrain the enzyme glycation reaction, and effective inhibitors suchas aminoguanidine usually possess side effects to the human body. Therefore, the researchand development of safe and efficient non enzymatic glycation inhibitor has importantsignificance.In this paper, nonenzymation gl
11、ycation (of foodborne) was prepared by fructosereacting with glutamic acid in a boiling water bath; nonenzymatic glycation (physiologicalconditions) was simulated by reaction of glyoxal and bovine serum albumin (BSA)incubated at 37 . The nonenzymatic glycation inhibition effects were monitored throu
12、ghfructosamine, dicarbonyl compounds, 5 - HMF and fluorescent. The inhibitor in thisresearch includes flavonoids (quercetin, rutin and puerain) and natural polysaccharides(chitosan and xanthan oligosaccharides). This research including several parts as follow:1. Flavonoids were evaluated as inhibito
13、rs of foodborne nonenzymatic glycation. Theresults indicated that quercetin, rutin and puerain can promote the generation offructosamine, but they can strongly inhibit the generation of dicarbonyl compounds.Quercetin and rutin showed significant inhibition of end product of nonenzymaticglycation; ru
14、tin also showed inhibition of 5 - HMF. The inhibition rate of quercetin andrutin (reaction time: 9 h,concentration: 5.0 mmol/L) to the end fluorescent productreached 80.5% and 66.9%. In this assay, quercetin showed better inhibition thanaminoguanidine and puerain, however, showed none inhibition. These results may berelated to the different substituted positions of aromatic hydrocarbon group.2. Flavonoids were evaluated as inhibitors of nonenzymatic glycation under3上海海洋大学硕士学位论文physiological conditions. The res
