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1、实验四 植物生根培养一、目的要求通过在超净工作台上进行无菌操作训练掌握试管苗生根操作技术。二、基本原理试管苗增殖阶段要将增殖的嫩枝进行壮苗和生根培养。多采用1/2MS。本实验以菊花为例,学习生根培养的操作技术。三、材料与用具1设备与用具 超净工作台、70的乙醇、95的乙醇、盛有培养基的培养瓶、接种器械(主要指剪刀、镊子等)、酒精灯、无菌纸。2材料 菊花的试管苗。四、方法步骤 1准备生根培养基,培养基为1/2MS+蔗糖+琼脂。 2将接种需用的消毒剂、接种用具、酒精灯、烧杯、无菌水、无菌培养皿、培养基等置于超净工作台的接种台面;打开超净台的电源开关,打开鼓风开关(调节送风量),并打开紫外灯消毒20
2、min,之后关掉紫外灯,继续送风20min,打开荧光灯开关,准备接种。3无菌操作前,将双手用70%乙醇棉球擦拭消毒,剪刀、镊子等金属工具在用酒精灯外焰灼烧灭菌,后置于支架上冷却备用。4无菌纸置于超净工作台,打开包纸,用镊子将无菌纸取出,置于操作人员的正前方。5在酒精灯火焰处打开外植体材料瓶,将植物材料用无菌的镊子取出置于无菌纸上。6一手持镊子,一手持剪刀,将植物材料按照要求切割。切割时,应尽可能使单株上的茎、叶保持完整,切去原来的变褐根,仅留色白、幼嫩的根。依照形态学上端向上,形态学下端向下的原则,将材料接种于生根培养基中,每瓶可适当多接材料,分布要均匀。同时宜将大小较一致的材料接种于一瓶中,以便移栽时,每瓶中材料大小一致。 7将接好的培养瓶暂时放在超净工作台上,材料接完后一块取出培养瓶。在标签上写上植物编号,日期、班级、学号,放于培养箱中进行培养。 8接种结束后,关闭和清理超净工作台,并清洗用过的玻璃器皿等。五、结果与分析(附图)