兽医药理学试验指导课件

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1、主讲教师：杨林富 云南农业大学动物医学实验教学中心,兽医药理学实验指导,课程性质和任务,动物药理学是兽医专业一门重要专业基础课，也是兽医相关专业的基础课。通过动物药理学实验课程的学习，使学生掌握药理学的实验方法和兽医基本技能。帮助学生掌握常用或代表性药物的作用机理、不良反应和临床药物应用，为疾病预防和治疗打下基础。,教学内容和方法,教学内容 1.用常用或代表性药物对实验动物进行在体或离体实验，验证药物效果。 2.通过药物配伍禁忌、配合用药方面的实验，掌握常用药物的配伍。 3.通过药物对动物毒性的实验，理解药物的毒性和毒理。 4.通过药物在动物中的血药浓度测定，了解药物在体内的代谢过程。 5.通

2、过药物片剂的制备和质量检测实验，了解片剂的生产工艺和质检方法。 6.通过病原微生物对药物的敏感性实验，了解临床用药的筛选方法。 教学方法：在教师的讲解、示教和指导下，完成实验任务。要求学生严格操作、独立完成并掌握。学生在教师示教时仔细观察实验步骤和方法，认真学习并掌握。,教学目的要求,1.通过动物药理学实验课程教学，使学生掌握药理学的实验方法和一般仪器的调试使用。 2.帮助学生掌握常用或代表性药物药效学的基本内容。 3.帮助学生掌握药物对动物体的毒性和毒理学方面的知识。 4.了解药动学的基本内容。 5.了解药物片剂制备和药物片剂的质量检测方法。 6. 锻炼学生的设计能力和创新思维，掌握临床用药

3、的筛选方法。,实验教材或指导书,实验教材：兽医药理学实验指导云南农业大学自编教材。 参考书： 药理学实验方法 药剂学实验 兽医药实验室检验技术 王俊东 主编 中国农业科学技术出版社,目 录,实验一 实验动物的给药方法 实验二 药物的局部作用与吸收作用试验 实验三 敌百虫急性LD50的测定 实验四 药物的药理性配伍禁忌 实验五 硫酸钠和液体石蜡导泻原理 实验六 消沫药的作用观察 实验七 氨甲酰胆碱、毛果芸香碱与阿托品对离体肠肌活动的影响 实验八 亚硝酸盐的中毒与解救 实验九 洋地黄制剂、肾上腺素、咖啡因对离体蛙心的作用观察 实验十 片剂的制备 实验十一 家兔血和肝中游离磺胺嘧啶浓度的测定 实验十

4、二 抗菌素的平板抑菌试验,实验一 实验动物的给药方法,一、目的： 练习对实验动物给药方法的操作常规：实验动物（主要以兔、小白鼠和鸡为主）的捉拿、保定和常规给药方法，为以后的实验操作打下基础。,（一）青蛙淋巴囊注入法(如图) 青蛙(或蟾蜍)之皮下有数个淋巴囊，注射药物容易吸收，腹淋巴囊常作为给药途径。注射方法：一手抓住青蛙、固定使腹部朝上，另一手取注射器，并连上5号注射针头，将针头插入口腔，穿过下颔肌层进入胸淋巴囊，再向前伸即可到腹淋巴囊。 也可自大腿部进针通过皮下进入腹淋巴囊，然后注射药液。,蛙的皮下巴囊 1颔下囊2胸囊 3腹囊 4股囊 5胫囊 6侧囊,二、方法,(二)小白鼠的给药方法(如图)

5、 1口服 左手捏住小白鼠颈背部皮肤，以同一手的第四指或小指将尾巴紧压在掌上，使腹部朝上，右手持灌胃管(12商)，注射器上连接用注射头磨钝制成灌胃管长45cm，直径lmm。先从小白鼠口角插入口腔内，然后用灌胃管压其头部使口腔与食道成一直线，再将灌胃管沿上鄂壁轻轻进入食道。当灌胃继续轻轻进入时。稍感有抵抗，此位置(体重20g的小白鼠，灌胃管插入12)相当于食道通过隔肌的部位。一般在此部位注射则可。如此时动物安静，呼吸无异常，即可注药液。注药液后轻轻拉出灌胃管。一次投药量为O103mllOg体重，操作时不宜粗暴以免损伤食道及隔肌。 2。皮下注射 注射部位在颈部，将皮肤拉起，注射针刺人皮下，把针头轻轻

6、向左右摆动，容易摆动则表明已刺入皮下，然后注药液。拨针时，以手指捏住刺针的部位，可防止药液外漏。注射药量为01O3mllOg体重。,二、方法,3静脉注射 一般多用静脉注射，注射前先将小白鼠装入固定筒内或铁丝罩内或重烧杯内，使其尾巴露出，尾部用75酒精棉球擦试消毒，使血管扩张并使表皮角质软化，以拇指和食指捏住尾根部的左右侧，使血管更加扩张，尾部静脉显得列清楚，以第四指和小指夹着尾部，以中指从下面托起尾巴，以使尾固定。用4号细针头选其粗大静脉(左右两侧静脉)注入。如针确已在血管内，则药液进入无阻。注射过毕后，把尾巴向注射部位内侧弯曲以止血，一次注射药量为O0501 mllOg体重。,小白鼠灌胃法,

7、二、方法,(三)兔 1液体药物灌胃法：一个人将兔的躯体夹于两腿之间，左手紧握双耳，固定其头部，右手抓住前肢。另一人将兔用开口器横放于兔口中，将舌头压在开口器下面，把开口器固定。将合适的胃管(如导尿管)经开口器中内小孔慢慢沿上颚壁插入食道约5_-6寸长，为避免错人气管，可将胃管外端放于清水杯中，若有气泡从胃管逸出，则证明在气管内，应拨出重新插入，若无气泡则注射人药液，然后再注入小置清水，将胃管内药液冲入胃内，灌洗完毕后先拨出尿管，后拿出开口器。 2皮下注射：用左手拇指及中指将兔的背颈部皮肤提起成一皱折，并用食指按压皱折的一端，使成三角体，增大皮下空隙，以利针刺。右手持注射器，自皱折下刺入，证实针

8、到皮下时，松开皱折，注入药液。 3静脉注射：一般采用耳缘静脉注射(耳外缘的血管为静脉，中央的血管为动脉，先剪去注射部位的兔毛，用酒精棉球消毒注射部位，以左手食指在耳下作垫，并以拇指压着耳边缘部分，右手持带有1820号针间注射器，尽量从静脉末端处刺入血管(不一定有回血)，一般是注射针先经皮下，后进血管，且针头入血管内少许。推动针栓，感觉有阻力或发自隆起，表示针在皮下，这时应将针头稍退回一点，再往前端刺针，如无阻力或发自隆起现象，即可注药，注射完毕后，压住针眼，拨去针头，继续压迫数分钟，以防流血。,二、方法,开口器,导尿管,兔灌胃法,小鼠尾静脉注射,兔耳静脉注射法,开口器,(四)狗静脉注射法：己麻

9、醉的狗可选用股静脉给药。未麻醉的狗可选用前肢皮下头静脉后肢小隐静脉给药，注射前先将注射部位毛剪去，在静脉向心处用橡皮带绑紧(或用手抓住)使血管充血。针向近心端刺入。为保证药物确实注入静脉，应在注入药液之前。回抽针栓，倘有回血即可推注药液。,狗后肢小隐静脉注射,二、方法,实验二 药物的局部作用与吸收作用试验,： 了解药物对机体的局部作用和吸收作用。 材料： 药物松节油、硝酸士的宁注射液、麻醉乙醚、5水合氯醛注射液。 器械注射器、针头(5号)，兔用麻醉口罩(如无可用小茶缸代替)，精制棉花、镊子。 动物兔。,一、目的：,第一部分 取兔一头，固定后，将两耳对光观察血管的粗细，颜色等情况，然后对一个耳朵

10、涂擦松节油，过2分钟后，对比两个耳朵的情况。 第二部分 1取兔一头，先观察正常活动情况，用镊子轻击四肢或背部，看有何反应。 2给兔皮下注射01硝酸士的宁注射液，观察动物反应：每隔数分钟用镊子轻击四肢，观察兔有何反应。 3待兔出现典型的士的宁中毒症状：全身痉挛，角弓反张，呼吸暂停等，立即套上有麻醉乙醚的口罩，再观察兔的反应。 4当兔的中毒症状消失时，除去麻醉口罩,二、方法:,记录实验结果，说明哪种作用是局部作用?哪种作用是吸收作用?,讨论,实验三 敌百虫急性LD50的测定,通过实验了解测定LD50的方法及计算过程。 材料： 小白鼠、注射器及针头、小铁丝笼、2敌百虫溶液、苦味酸溶液。,一、目的：,

11、一、预试：取小白鼠8-12只，以2只为一组分成4-6组，选择组距较大的一系列剂量分别按组腹腔注射敌百虫溶液，观察出现症状并记录死亡数，找出0100死亡率剂量的所在范围。 二、正式实验：在预试找出的范围内选用几个剂量(使其相邻剂量之间是1：0.8之比)尽可能使半组数的死亡率在50以上，另半组数的死亡率在50以下。再将动物随机分组，再以相应的剂量腹腔注射4敌百虫药液(注意：小鼠腹腔注射01O2ml10g为宜)。,二、方法：,数据记录：,三、统计试验结果：最后一只动物给药一定时间，清点各组的死亡动物数，选择一组统计方法计算敌百虫的LD50，包括可信限及可信限率。 (附：LD50的计算方法： 寇氏法：

12、要求各组实验动物数相等；最小剂量组死亡率为0；最大剂量组死亡率为100。 如按等比级数设计给药剂量：则 LgLD50=Xmd(pi一0.5) Xm：最大剂量的对数 pi：各组动物死亡率 d：相邻两组剂量对数之差 求：LD50的95可信限： (1)计算LD50的标准误 SLgLD50=dpi(1-pi)/ni-1 (2)LD50的95可信限为： Lg-1(LgLD50196SLgLD50),二、方法：,蓄积毒性试验 有些药物急性毒性较小，但长期应用后，在体内蓄积。逐渐产生毒性反应,而出现慢性中毒现象。了解药物蓄积作用的大小，可进行蓄积毒性试验，常用的是蓄积系数测定法，现介绍如下： 蓄积系数(K)

13、即分次给药所引起某效应的总剂量LD50(n)与一次给药所得相同效应的剂量LD50(n)之比值。公式如下： k= LD50(n)/ LD50(1) 此实验常用大鼠或小鼠，按剂量定期递增法给药，方法如下： 先测定动物的LD50（灌胃或腹腔注射），再取相同动物20只，每天给药（给药途径同LD50的测定），以4天为一期。给药剂量：第1-4天为0.1 LD50，以后按等级数1.5倍每4天递增一次，直至动物死亡半数为止，累计给药总剂量，按下列公式计算蓄积系数(k) k= LD50(n)/ LD50(1) 蓄积系数的评价标准见下表： 蓄积作用的分级表 蓄积系数 蓄积作用分级 1 高度蓄积 1 明显蓄积 3

14、中度蓄积 5 轻度蓄积,二、方法：,实验四 药物的药理性配伍禁忌,了解药物配合应用时可能出现的药理性配伍禁忌 。,一、目的：,不同药物作用的药物配伍应用时，可能产生相互拮抗的现象。使疗效降低，甚至消失，也可能引起毒性增加或产生严重的副作用。 1互相拮抗：取小自鼠2只，其中1只肌肉注射1安钠加注射液加注射液01ml10g，然后2鼠分别腹腔注射65mgml的硫喷妥钠溶液O1ml10g，观察2鼠的反应有何不同? 2毒性增加：取小白鼠3只，甲鼠肌注硫酸链霉素30mg10g；乙鼠腹腔注射硫酸链霉索30mg10g后，再腹腔注射5mgml的硫喷妥钠溶液01ml10g。丙鼠腹腔注射5mgml的硫喷妥钠溶液01

15、ml10g。观察三鼠的反应有何不同?,二、方法：,记录 ：,(一)试 管 法,(二)动 物 法,以实验结果说明药物的配伍禁忌的临床意义。,讨论：,实验五 硫酸钠和液体石蜡导泻原理,通过实验了解泻药导泻的几种方式和作用机理。,一、目的：,取健康兔1只，称重后以1硫喷妥钠注射液(1mlkg)静脉麻醉背位固定于解剖台上。沿腹正中切口，取出回肠，在回盲区将肠内容物挤向结肠，并用粗线在回盲部近端将回肠扎成3段，每段长3cm。结扎时慎勿损伤肠系膜血管，结扎的3段回肠应互不相通。然后分别给各结扎段注入下列药物之一：(1)20硫酸钠溶液2ml;(2)生理盐水2m1；(3)液体石蜡2ml。注射毕将肠管放回腹腔，

16、并用血管钳关闭腹腔。 2小时后观察各肠段的变化(如膨胀与充血管程度等)。最后用注射器抽取各肠段内液体，比较其体积；之后剪开肠壁，观察肠壁充血情况。,二、方法：,(1)打开腹腔后应尽量减少对肠管的刺激，并以少量温生理盐水温润之。(2)抽取肠段内液体时应尽量吸净，否则将影响结果的比较。(3)本实验亦可用其它动物作。如用小鼠时肠段长2cm，药物容量为01 ml；用蟾蜍或青蛙时肠段长152cm药物容量亦为O1 ml。,注意事项：,泻药导泻作用的方式有几种?硫酸钠为什么能导泻?,思考题：,实验六 消沫药的作用观察,观察几种消沫药剂在体外的消沫作用 材料： 药物松节油、煤油、菜籽油、15肥皂液。 器械试管、大烧杯、玻棒、滴管。,一、目的：,将15肥皂水数毫升，分别装入四支试管中，