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1、,如何解读细菌学检验报告,2,你知道吗?(1)有关病原菌与报告解读,下列哪些细菌属于条件致病菌? A 大肠埃希菌 B 铜绿假单胞菌 C 肺炎克雷伯菌 D 白喉棒状杆菌 下列哪些菌属于条件致病真菌? A 念珠菌 B 曲霉菌 C 卡氏肺孢子菌 D 隐球菌 判断题: 所有的阴性报告都表示没有感染 所有报告的细菌均为病原菌,3,你知道吗?(2)有关细菌耐药与用药选择,选择题:A.天然耐药;B.少见的耐药 嗜麦芽窄食单胞菌对碳青霉烯类药物耐药属于: 葡萄球菌对万古霉素耐药属于: 产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌下列哪些药物不能选用 A 青霉素类 B 头孢类 C 氨曲南 D 碳青霉烯类 治疗MRSA
2、最有效的药物是 A 苯唑西林 B 头孢唑啉 C 亚胺培南 D 万古霉素,4,“沟通、理解、合作”是当前临床医生与细菌检验人员之间最缺乏的,也是最应该做到的。,5,主要内容,正常菌群与病原菌 药敏试验与报告解读 经验用药与目标用药,6,一、正常菌群与病原菌,正常菌群的概念与分布 致病菌与条件致病菌 各类标本中的常见病原菌,7,正常菌群的概念,正常菌群:在人的体表及与外界相通的口腔、鼻咽部、肠道、泌尿生殖道等腔道中寄居着微生物,在正常情况下对宿主无害而有益,这样的微生物为正常微生物群,其中以细菌为主,通称正常菌群。,8,人体各部位的正常菌群,汪复.感染性疾病与抗微生物治疗.第2版.上海:上海医科大
3、学出版社,2000,1.,9,10,病原菌的分类,临床上常将病原菌和致病菌称谓混用。但前者包含的范围显然较后者为广,或者可认为通常所说的致病菌是广义的概念。,病原菌:是指能入侵宿主引起感染的微生物,包括细菌、真菌、病毒等。病原菌按致病性分类如下:,11,致病菌的概念,致病菌的概念 患者有典型的感染症状 随时可从其体内分离出特定的细菌 将细菌接种易感动物感染症状与人相同 从动物体内可分离出与人相同的细菌 致病菌与条件致病差别是:致病菌侵害人体的能力远远大于条件致病菌.,12,条件致病菌与菌群失调,条件致病菌:某些细菌在正常情况下并不致病,当在某些条件改变的特殊情况下可以致病,这样的细菌称为条件致
4、病菌或机会致病菌。这种特定的条件大致有以下几种:寄居部位的改变、免疫功能低下、菌群失调。 菌群失调:是宿主部位正常菌群各类菌间的比例发生较大幅度变化而超出正常范围的状态。由此产生的一系列表现,称为菌群失调症或菌群交替症。,13,条件致病菌的主要特点,毒力弱或无明显毒力; 常为耐药菌或多重耐药菌; 引起感染的对象是长期使用抗生素, 机体免疫功能下降的患者。,14,条件致病菌的几种身份,病原菌:会于宿主体内繁殖并侵入或破坏组织,引起感染的微生物。患者由这类菌引起感染,用细菌报告提示的抗生素治疗,疗效明显。 定植菌:(定植:细菌或真菌在人体的某个部位定居下来形成相对稳定的寄生状态,不会随外界机械冲击
5、而完全离开原来寄居部位。)会于体内繁殖但不会入侵或破坏组织的微生物。以下现象提示报告的细菌为定植菌: 用细菌报告提示的抗生素治疗,该菌消失,感染症状依然存在。或是由于该菌泛耐药,临床凭经验联合用药,感染症状好转,但该菌依然存在。 污染菌:留取标本过程中,污染了非感染部位的细菌。按其治疗无效,多次送检可排除。,15,各类标本中的常见病原菌,16,各类标本中的常见病原菌,17,二、药敏试验与报告解读,基本概念 药敏试验的临床价值 报告解读与相关问题,18,1.基本概念,药敏试验 CLSI与敏感、耐药、中介 抑菌环直径与MIC 抗生素的等效性与抗菌谱 细菌的耐药性,19,药敏试验,概念: 测定抗感染
6、药物在体外对病原微生物有无抑菌或杀菌作用的方法称为药物敏感性试验,简称药敏试验。 目的:检测可能引起感染的细菌对一种或多种抗菌药的敏感性。 方法:纸片法、稀释法、Etest法 结果判断标准: 目前我国药敏试验判断标准参照CLSI标准文件,CLSI文件是我国的卫生部部颁文件。,20,CLSI简介,CLSI(Clinical and Laboratory Standards Institute,临床实验室标准研究所 ):以前称NCCLS(美国临床实验室标准化委员会),是一个国际性的、学科间的、非营利性的、制定标准的教育组织,它促使人们对标准和指南达成共识并促进其在医疗保健系统内的应用。在为临床试验
7、与相关的医疗问题制定标准与指南时,CLSI 实施了它所特有的达成一致的过程,因而得到全世界的认可。,21,CLSI简介,临床最常用到CLSI标准文件是抗菌药物敏感性试验标准文件。本文件是针对需氧菌药敏的标准指南。其主要内容包括需氧菌纸片法和稀释法药敏试验的选药(抗菌药物分组)、结果判断标准(折点)和质量控制。 CLSI根据细菌学、药动学和临床资料设定并定期修订抗生素对不同细菌敏感折点,通过折点将细菌分为敏感(S)、中介(I)、耐药(R)。,CLSI最新版本M100-S19,22,CLSI文件中关于敏感、中介、耐药的定义,CLSI.Performance Standards for Antimi
8、crobial Susceptibility Testing;Nineteenth Informational Supplement. M100-S19 ed.2009,28(1):21.,23,敏感: 最高血药浓度4倍MIC,使用常规剂量有效; 中介:最高血药浓度MIC,加大剂量或药物浓缩部位有效; 耐药:最高血药浓度MIC,无效。,24,CLSI推荐的药敏试验药物分组,25,抑菌环直径和最低抑菌浓度(MIC)分界值标准,肠杆菌科菌抑菌环直径和MIC解释标准,26,抑菌环直径与MIC,抑菌环直径:是指含抗菌药物的纸片能够抑制所有肉眼可见细菌生长的范围。 MIC(minimal inhibit
9、ory concentration ,最小抑菌浓度):是指在体外试验中,抗菌药物能抑制培养基中细菌生长的最低药物浓度。是抗菌药抗菌活性指标,显示出药物抑制病原微生物的能力。,27,抗生素的等效性与抗菌谱,抗生素的等效性:是指用一种相关抗生素的试验结果预测同类抗生素体内抗菌活性。如头孢噻吩与其他一代头孢具有等效性,可用头孢噻吩结果预测其他一代头孢。此特性允许检测少数几种抗生素而不影响临床对其他抗生素的广泛选择。 抗菌谱:是指细菌在“野生菌”状态下能被抗生素在体内达到有效浓度时抑制的种类。这些细菌称为对该抗生素的天然敏感菌。未列在抗菌谱中的细菌则为天然耐药菌。,28,细菌的耐药性,细菌耐药性:是细
10、菌抵抗抗菌药物杀菌、抑菌作用的一种防御能力,一种生物学的表型。 天然耐药(固有耐药):耐药性为某种细菌固有的特点称细菌的天然或固有耐药性。天然耐药非常稳定,据此就可预测某一细菌或可能存在的细菌对某种抗生素是否耐药。 获得性耐药:由于细菌获得耐药基因,使原来敏感的细菌变为耐药称细菌的获得性耐药。获得性耐药是目前临床面临的最主要的耐药问题。由天然敏感菌基因突变或获得一段基因片段,使其基因型改变而产生耐药。获得性耐药不断在变化(其变化频率与抗生素应用相关),不能预测,需要做药敏试验。,29,常见细菌的天然耐药情况,马越,李景云,金少鸿.细菌耐药性监测分析中应注意的问题.中国抗生素杂志,2005,30
11、(12):763,30,2.药敏试验的临床价值,评价抗菌药物敏感性,新抗菌药物的药效学评价。 评价指标:MIC、抑菌环直径、MIC50、MIC90 指导细菌感染治疗时的抗菌药物选择。 鉴于获得性耐药不断在变化,天然抗菌谱已无法指导对多数细菌治疗时的抗菌药物选择。因此,病原学检查和药敏试验对临床抗感染治疗具有重要意义。 监测细菌耐药性变化,为医院制订预防措施提供依据。,31,3.报告解读与相关问题,报告单简介 药敏试验药物选择 特殊耐药机制的解读 阴性报告结果的解读 各种标本阳性结果的解读 相关问题与临床可能的抱怨,32,革兰阴性板现有药物21种,33,革兰阳性板现有药物24种,34,药敏试验药
12、物选择,药敏试验药物选择原则 代表药物在药敏试验中的作用,35,药敏试验药物选择原则,代表性:所选药物应具有代表性及对同类药物有提示作用,同类药物通常只选择一种或几种代表品种 ; 预报性:选择药物可对抗菌药物使用或耐药机制有提示作用。如金葡菌对苯唑西林耐药提示对所有-内酰胺类耐药;革兰阳性球菌耐庆大霉素提示对氨基糖苷类耐药;肺炎链球菌选择苯唑西林提示青霉素耐药性。如大肠和克雷伯菌药敏中选三代头孢(头孢他啶、头孢噻肟)或氨曲南可提示细菌是否产ESBLs;在肠球菌药敏中选高浓度庆大霉素或链霉素可提示能否采用联合用药方案。 特殊性:选择感染部位有较高浓度的抗菌药。如尿路感染的尿液标本可选择呋喃妥因,
13、中枢神经系统感染的脑脊液可选氯霉素、头孢呋辛等(能通过血脑屏障)。,36,代表药物在药敏试验 中的作用代表性,代表性药物在药敏试验中的作用不仅仅局限于该药物本身, 还代表与其相关的抗菌药物,37,代表药物在药敏试验 中的作用预报性,38,倪语星,王金良.抗微生物药物敏感性试验规范.上海:上海科学技术出版社,2002,7-8.,39,特殊耐药机制的解读,常见特殊耐药表型 ESBLs(产超广谱内酰胺酶) MRS(耐甲氧西林葡萄球菌)包括MRSA(耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)和MRSCN(耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌) BL(产内酰胺酶) HLAR(高水平氨基糖苷类耐药肠球菌) AMPC酶 碳青酶烯酶
14、,40,特殊耐药机制的解读,CLSI 规定不能报敏感的抗菌药和细菌组合,CLSI.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Nineteenth Informational Supplement. M100-S19 ed.2009,28(1):23.,41,阴性报告结果的解读,阴性报告提示以下可能 非感染性疾病 感染已治愈 感染未治愈,但各种原因导致病原体未检测出来 采样运送不当:标本采集、送检、保存不当,导致病原菌死亡,污染菌大量增殖; 抗生素影响:经抗菌治疗,标本中含大量抗生素,病原菌受到伤害,不能正常生
15、长; 苛养菌:如嗜血杆菌、军团菌、淋球菌等因培养基营养成份不佳或培养条件限制,导致漏检; 特殊病原体:常规培养无法检测的病原体如厌氧菌、结核杆菌、衣原体、支原体、病毒等。 检验技术受限:实验室条件和人员技术影响。,42,血培养阳性结果的解读,临床因素 病史、体征、白细胞计数、影像学、病程、其它部位的培养结果 实验室因素 微生物鉴定 血培养阳性率(阳性瓶/总数) 每套血培养阳性的瓶数 微生物阳性检出时间 菌株种类(如凝固酶阴性葡 萄球菌) 分子分型技术(如脉冲场 凝胶电泳) 传统方法(生化、抗菌谱),43,痰培养阳性结果的解读,痰培养结果包括:涂片染色结果、分离致病菌的鉴定结果、药敏试验结果。
16、痰涂片革兰染色报告的内容 白细胞和鳞状上皮细胞数量。包括白细胞和鳞状上皮细胞数/低倍镜、细胞内是否含有细菌和胞内细菌染色及形态学特性。 细菌学镜检的描述性报告。 痰标本直接涂片的目的和意义 评价标本质量。判别标本是否适合做细菌培养。 初步判定病原菌。判断病原菌的有无、数量及其类别。有助于初步报告、选择培养基和对培养结果的综合分析。,44,痰培养阳性结果分析,常见有三种情况 第一种情况:患者有典型的呼吸道感染症状,按细菌报告选抗生素疗效明显 这类患者的痰标本共同特征:痰涂片革兰染色:见大量的白细胞,并见白细胞吞噬或伴行大量形态一致的非上呼吸道正常菌;痰培养:生长大量非上呼吸道正常菌,痰培养与痰涂片所见一致 结论:报告的细菌为病原菌。,45,痰培养阳性结果分析,第二种情况:患者有典型的呼吸道感染症状,按细菌报告选用的抗生素治疗无效,改为凭经验联合用药 这类患者痰细菌检验时有如下特征:痰涂片:大量白细胞,吞噬或伴行的是革兰阳性球菌(形似葡萄球菌)、革兰染色阴阳不定的小球