免疫学检验-抗原抗体反应ppt课件下载课件

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1、第一章 概 述,第一节 免疫学简介,传统的概念认为,免疫(immunity)系指机体对感染有抵抗能力,而不患疾病或传染疾病。现代免疫学的发展认识到,宿主体内的免疫系统,能识别并清除从外环境中侵入的病原微生物及其产生的毒素、内环境中因基因突变产生的肿瘤细胞、自身衰老残损的组织细胞或自身变性抗原,实现免疫防御(immunological defence)免疫自稳(immunological homeostasis)和免疫监视(immunological surveillance)的功能,保持机体内环境稳定。所以,免疫是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能。,免疫应答反应是一个复杂的连续的过程,为

2、了便于理解,通常将免疫应答过程分为识别阶段、活化阶段和效应阶段。,第二节 临床免疫学,临床免疫学(Clinical immunology)是将免疫学基础理论与免疫学技术相结合,用于研究临床疾病的免疫病理机制、诊断与鉴别诊断、评价治疗效果和判断预后的多个分支学科的总称。,第二章 抗原抗体反应,抗原抗体反应(antigenantibody reaction)是抗原与相应抗体之间的特异性结合反应。它既可发生在体内,也可发生在体外。,第一节 抗原抗体反应的原理,抗原与抗体的特异性结合是基于抗原决定簇(表位)与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的。,抗原抗体反

3、 应两个阶段,特异结合阶段,可见反应阶段,此阶段仅需数秒至数分钟,但并不出现可见的反应,这一阶段抗原抗体复合物在适当的电解质、PH、温度和补体等的影响下,进一步交联聚集,出现凝集、沉淀、溶解和补体结合介导的生物现象等肉眼可见的反应。,一、抗原抗体结合力 抗原和抗体的结合为分子间结构互补的特异结合,它是一种非共价的结合,不形成牢固的共价键。在抗原抗体特异结合后有四种分子间引力参与并促进其结合。,静电引力(electrostatic forces)是抗原和抗体带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互吸引的力,又称库伦引力 范登华引力(Vonder Waals forces)是原子与原子、分子与分子相互

4、接近时分子极化作用发生的一种吸引力,是抗原抗体两个大分子外层轨道上电子之间相互作用时,因两者电子云中的偶极摆动而产生的引力。促使抗原抗体的结合,这种引力的能量小于静电引力,氢键结合力 是供氢体上的氢原子与受氢体上氢原子间的引力。 疏水作用力 在水溶液中两个疏水基团相互接触,由于对水分子排斥而趋向聚集的力称为疏水作用力。,二、抗原抗体的亲和性和亲和力 亲和性(affinity)是指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而存在着的引力,它是抗原抗体间固有的结合力。,三、亲水胶体转化为疏水胶体 大多数抗原为蛋白质,抗体是球蛋白,它们在水中均溶解为胶体溶液,不会发生自然沉淀。,第二节 抗

5、原抗体反应的特点,抗原抗体反应的特异性(specificity)是指抗原分子上的抗原决定簇和抗体分子超变区结合的特异性,由这两个分子之间空间结构的互补性决定的。 多数天然抗原物质的构成十分复杂,其物质表面往往不止一种抗原决定簇,而两种不同抗原物质可具有部分相同或类似结构的抗原决定簇,称为共同抗原(common antigen)。,一、特异性,比例性(pro-portionality)是指抗原与抗体特异性结合反应时,生成肉眼可见结合物的量与反应物浓度的关系,只有当二者浓度比例适当时,才出现可见反应。,二、比例性,从图2l中可见,曲线的高峰部分是抗原抗体分子比例合适的范围,称为抗原抗体反应的等价带

6、(zone of equivalence)。当抗体过量时,称为前带(prezone);抗原过量时称为后带(postzone)。,抗原与相应抗体结合成复合物后,在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性称为抗原抗体结合的可逆性(reversibility)。抗原抗体复合物解离取决于两方面的因素:一是抗体对相应抗原的亲和力;二是环境因素对复合物的影响。,三、可逆性,第三节 影响抗原抗体反应的因素,影响抗原抗体反应的因素较多,主要有两方面:一是反应物自身的因素;另一方面是反应环境的因素。 一、反应物自身因素 抗原抗体反应中,抗原与抗体是反应的主体,所以它们的特性直接影响它们的结合情况 (一)抗原 抗

7、原的理化性状、表面抗原决定簇的种类和数目均可影响抗原抗体反应的结果。,(二)抗体 抗体对抗原抗体反应的影响主要有以下三方面: .来源 来源于不同动物的免疫血清,其反应性有差异。 .浓度 抗体的浓度往往是与抗原相对而言,二者合适的浓度才易出现可见的反应结果,故试验前应预先滴定抗原抗体最佳反应浓度。 .特异性与亲和力 特异性与亲和力是影响抗原抗体反应的关键因素,它们共同影响试验结果的准确程度。,二、反应环境条件 (一)电解质 抗原抗体结合后,由亲水性向疏水性转换过程中必须要有电解质参与才能进一步使抗原抗体复合物表面失去电荷,破坏水化层,使复合物相互靠拢聚集,形成大块凝集、沉淀。 (二)酸碱度 抗原抗体反应必须在合适的PH环境中进行,PH过低或过高都会影响抗原抗体的反应。,抗原抗体反应中一般以pH69为宜。有补体参与的反应最适PH为7.27.4,超过此范围均因不同程度降低补体的酶活性而影响反应。 (三)温度 抗原抗体反应需要合适的温度才有利于二者结合。一般以1540为宜最适温度为37。,

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