艾滋病快速检测手册课件

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1、2009.9.,Email:,艾滋病病毒抗体快速检测 技术手册 全国艾滋病检测技术规范 （2009年修订版）,眉山市艾滋病确证实验室 杨俊英,前言,艾滋病检测相关的国家技术规范和管理办法： 全国艾滋病检测技术规范（2009年修定） 全国艾滋病检测工作管理办法（2006年） 艾滋病病毒抗体快速检测技术手册 （2011年）,前言,艾滋病检测实验室设置全国艾滋病检测工作管理办法 艾滋病参比实验室（设在中国疾控中心） 艾滋病检测确证实验室： 艾滋病检测确证中心实验室（设在省级疾控中心） 艾滋病检测确证实验室（设在市级疾控中心、医疗机构、血液中心、计划生育服务机构等） 艾滋病检测筛查实验室： 艾滋病筛查

2、中心实验室（市（地）疾控中心）、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点（设在疾控中心、医疗机构、采供血机构、计划生育服务机构等,我市艾滋病检测实验室设置,市疾病预防控制中心艾滋病确证实验室 艾滋病筛查实验室：23个 检测点19个,艾滋病病毒抗体快速检测 技术手册,主要内容,第一章：人员要求 第二章：检测点的设置、要求与管理 第三章：试剂选择 第四章：标本采集及使用注意事项 第五章：检测策略及流程 第六章：实验记录 第七章：结果报告与告知 第八章：检测质量控制 第九章：生物安全与个人防护,2009.9.,Email:,第一章 人员要求,人员要求,1.1 理论培训至少包括： HIV在我国特别是本地区的流行

3、状况与流行特征 HIV抗体快速检测理论基础及重要性。 检测的种类与方法。 样本类型、样本采集、贮存与运输。 检测结果的判读、解释、实验记录、结果报告及保密、感染者转介与咨询。 检测的质量控制。 生物安全知识，个人防护，职业暴露预防与处理，废弃物处理。 掌握告知相关的知识和技巧。,人员要求,1.2 实验操作培训至少包括： 准确理解试剂说明书，掌握标准操作程序。 自静脉血中分离血清/血浆。 按照操作说明书，独立完成快速检测试验，至少检测5-10份已知结果的盲样。 正确判读教员已完成操作的阴性，阳性结果的试剂条。 正确记录检测结果。 掌握质量控制方法。,人员要求,未经正规培训或培训后考核未合格的人员

4、,不得进行快速检测工作。 对从事快速检测的人员,应根据需要进行再培训。 至少有2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员,第二章 检测点的设置、要求与管理,各省可根据艾滋病流行情况和防治工作整体需求，统筹考虑检测点设置，有效开展快速检测。 2.1 检测点设置 2.1.1根据当地艾滋病流行情况和实际需求，可在有检测需求、但不具备建立实验室条件的地方设置检测点。 2.1.2 各级卫生行政部门负责组织检测点的审批，艾滋病确证实验室或筛查实验室负责培训、验收。,2.2 检测点要求 2.2.1 快速实验所在房间温度可控（空调），保证室内温度达到快速检测试剂盒说明书要求的温度，有检测工作台，光线充

5、足，可以消毒（紫外灯）。 2.2.2 需配备快速检测所需物品，至少包括：普通冰箱、消 毒与污物处理设备（高压灭菌器或消毒桶）、一次性消耗品、安全防护用品和资料柜。 2.2.3 开展快速检测时，保证室内温度达到快速检测试剂盒 说明书的要求。 2.2.4 严格按照快速检测试剂说明书要求操作，保存原始记 录及实验结果（不少于十年！）。 2.2.5 必须参加省或地、州（市）组织的快速检测能力验证。,第二章 检测点的设置、要求与管理,2.3 检测点管理 艾滋病确证中心实验室负责本省HIV快速检测的实施及其质量保证。 2.3.1各省统筹考虑检测点的发展与规划，指导检测点的建立与理管 2.3.2 对已建立的

6、检测点备案。 2.3.3 定期进行人员培训，必要时进行岗位再培训。,第二章 检测点的设置、要求与管理,第二章 检测点的设置、要求与管理,2.3.4 对本省使用的快速试剂质量进行评价。 2.3.5 不定期抽检快速试剂检测为阴性的样品，使用酶联试剂进行复检，发现漏检应及时处理，并上报国家参比实验室 2.3.6 组织本省快速检测能力验证活动。也可分级实施，由各地、州（市）艾滋病确证实验室负责、县级疾控中心艾滋病筛查实验室协助，对HIV快速检测点进行培训和质量管理 2.3.7 统筹考虑提供阴阳性外部质控品，开展室内质控,2.3.8 各级卫生行政部门和疾病预防控制中心应制订切实可行的现场督导计划，确定督

7、导内容（参考附表5）。 2.3.9不定期组织人员对检测点进行督导。新建立的检测点至少第一年应督导检查一次。 2.3.10发生问题的检测点，应在现场提供培训和技术支持。督导中，可在现场对检测人员实验操作进行考核，观察检测人员的操作过程是否标准，实验结果的判定是否正确，实验结果的记录是否规范等。,第二章 检测点的设置、要求与管理,第三章 试剂选择,快速检测是相对于酶联检测，获得结果时间较短而言。与酶联检测相比，快速检测具有以下优点：可以较快获得检测结果（一般30分钟内）；可用全血 (末梢血)或静脉血检测，样本容易采集；只需较少的实验设备，可在边远和没有实验室条件的地区使用，如农村乡（镇）卫生院、社

8、区卫生服务中心、艾滋病自愿咨询检测点（VCT）、医疗卫生机构的医务人员主动提供艾滋病检测咨询点（PITC）、预防母婴传播(PMTCT)等场所。接受相关培训后，基层卫生人员能够掌握；可以直观地判定和解释结果。,3.1快速检测试剂分类 HIV快速检测试剂按原理不同，分为以下三类 3.1.1 免疫渗滤试验：以硝酸纤维膜为载体，HIV抗原点状固定在膜上。加待检样品后，阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点。有效试验质控点必须显色。,第三章 试剂选择,第三章 试剂选择,3.1.2 免疫层析试验：以硝酸纤维膜为载体，HIV抗原线状固定在膜上，加待检样品后，阳性结果在膜上抗原部位显示出有色条带。有效试验的质控

9、带必须显色。 3.1.3 明胶颗粒凝集试验（PA）：将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，加待检样品后。当待检样品含有HIV抗体时，明胶颗粒与抗体发生凝集反应，根据凝集情况判读结果。,3.2 快速检测试剂使用要求 3.2.1 必须使用经国家食品药品监督管理局注册批准的快速试剂目前通过国家食品药品监督管理局（SFDA）批准的快速检测试剂有20余种，详细信息可登录国家药品食品管理局网站http:/ 3.2.2 试剂必须在有效期内使用。 3.2.3 根据检测目的选择试剂。初筛选择敏感性高的试剂，复检选择特异性高的试剂。 3.2.4推荐使用临床评估质量好并且近几年连续考评结果稳 定的试剂【见中国疾病预防控

10、制中心网站（http:/），2008年-2010年的评估结果见表1】,第三章 试剂选择,第四章 样本采集及使用注意事项,用于快速检测的样品可以为血清、血浆或全血（末梢血或静脉血）。 4.1 采样前准备 根据检测项目的具体要求，确定采集样品的种类及样品处理、保存和运输的时限和方法，按照临床采血技术规范的要求操作，遵守生物安全要求。检查所需物品是否备齐，是否在有效期内，有无破损，是否足量，特别应检查受检者信息与样品收集试管表面的标记是否一致，注明样品采集时间。选择合适的室内（外）采血空间，受检者坐（卧）于合适的位置，准备采血用具、皮肤消毒用品、采血管及试管架、废弃物容器等。,采血的准备工作,采血过

11、程,采血后,一、血液的采集,二、样品的运送,针头的处理,针刺点的处理,三、样品保存,标本采集工作流程：,生物安全,1. 穿白大褂； 2. 带无菌乳胶手套； 3. 原有创口要有保护：如创可贴。,被采血者的准备,1.询问有无出血史， 2. 坐姿； 3. 采血部位消毒； 采血用具的准备 1、皮肤消毒用品 2、采血管及试管架、硬质废弃物容器等,采血者的准备工作,4.2 样品采集 样品应按试剂盒说明书的要求确定是采集末梢血或静脉血。采血时要注意安全，应用一次性采血针和一次性真空采血管，采血部位要严格消毒，谨慎操作，防止刺伤皮肤和造成外界污染。 4.2.1 末梢全血（通常为指尖血）采集：消毒局部皮肤（成人

12、和1岁以上儿童可选择耳垂、中指、无名指或食指）。用采血针刺破皮肤，用无菌纱布擦掉第一滴血。收集滴出的血液备用。,第四章 样本采集及使用注意事项,4.2.2 静脉全血采集：消毒局部皮肤，用未加或加EDTA抗凝剂的真空采血管抽取适量静脉血备用 4.2.3 血清：将上述未加抗凝剂的真空采血管所收集到的静脉血，室温下自然放置12小时，待血液凝固、血块收缩后吸出血清，置于合适的无菌保存管中备用。 4.2.4 血浆：将上述加抗凝剂的真空采血管所收集到的静脉血15003000转/分钟离心15分钟，上层即为血浆，吸出置于合适的无菌保存管中，备用。 注意：需要离心的样品在采集血样时最好不用玻璃质地的采血管！,第

13、四章 样本采集及使用注意事项,4.3 样品转运 4.3.1不在现场检测的样品，通常采集5毫升静脉血，现场分离血清或血浆后直接送到相关的检测点或筛查实验室。 4.3.2检测点进行快速检测时，应填写快速检测记录本，记录受检者的详细信息，对于阳性反应者，应重新采集全血分离血清或血浆，填写样品送检单，连同样品一同转送到上级实验室，如果路程较远或气候炎热时，装有样本的容器可加冰运送。 注意：对阳性标本必须进行三级包装并专人专车运送！,第四章 样本采集及使用注意事项,第一层容器：直接装样品，应防渗漏。样品应置于带盖的试管内（统一用带螺旋盖的冻存管不得用子弹头塑管），试管上应有明显的标记，标明样品的唯一性编

14、码或受检者姓名。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。 第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。 第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱（硬质的）。,4.4 样品保存 用于抗体检测的血清或血浆样品，短期（1周）内进行检测可存放于28，一周以上应存放于-20以下。 艾滋病快检点筛查的阳性样品应及时送当地区县疾控中心筛查室进行复查，筛查阴性样品，可根据具体需要决定保存时间，建议至少保存12个月。特殊用途或专项项目的样品根据具体要求确定保存时间。,第四章 样本采集及使用注意事项,第四章 样本采集及使用注意事项,区

15、县疾控中心艾滋病筛查实验室收检测点的筛查阳性样品后，按艾滋病检测技术规范（2009年版）进行复查，经筛查室复查仍为阳性标本送确证室确认，阴性结果出据阴性报告并及时反馈检测点。,第五章 检测策略及流程,HIV快速检测策略，根据检测点现场条件可分为以下二类 5.1当检测点上有两种快速检测试剂时 5.1.1常规检测： 5.1.1.1初筛试验，用敏感性高的快速检测试剂，结果为阴性，则报告阴性；结果为阳性反应，则进入复检试验。 5.1.1.2复检试验，在同一检测点，用第一种快速试剂加上第二种快速试剂进行复检。两种快速试剂复检结果均为阴性，则报告阴性。如一阴一阳或两种均为阳性反应，则按全国艾滋病检测技术规

16、范要求送艾滋病确证实验室进行确证试验。 5.1.1.3根据检测结果进行咨询，检测结果为阴性的按阴性咨询，对两种快速检测结果均为阳性反应或一阴一阳反应的，按照疑似阳性咨询（流程图5.1），建议尽快进行确证试验。,按凝似阳性咨询告知,按阴性咨询并告知,第五章 检测策略及流程,5.1.2应急检测: 在一些特殊情况下，如职业暴露、孕妇产时和手术前等，建议应用两种快速检测试剂同时检测，如两种试剂检测结果均为阴性，则报告阴性。如一阴一阳或两种均为阳性反应，则按全国艾滋病检测技术规范要求送艾滋病确证实验室进行确证试验。同时，对检测结果为阴性的按阴性咨询，检测结果为一阴一阳或两种均为阳性反应的按照疑似阳性咨询（流程图5.2）图5.2 HIV抗体快速检测流程图 5.2 当检测点上只有一种快速检测试剂时 用该种快速检测试剂进行初筛试验，检测结果为阴性，则报告阴性。检测