血液学检验绪论课件

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1、血液学检验,检验教研室 马雪莲,2016-1-10,中西医结合学院,血液病离我们远吗,绪 论,概论,发展史,与检验关系,绪 论,概论 血液学（hematology） 临床血液学（clinical hematology） 临床血液学检验 （hematologic laboratory science）,概论,发展史,与检验关系,绪 论,概论 一 血液学（hematology）： 研究对象：血液、造血组织 研究内容：,绪 论,概论 二 临床血液学： 研究对象： 血液病（原发、继发）,病因、病机、临床表现、诊疗,绪 论,绪 论,临床科室-血液科,绪 论,概论 临床血液学检验：,手段,基础,对象,绪

2、论,概论 临床血液学检验：临床血液学实验室,绪 论,发展史 # 血液探索史： 中国 西方 # 血液学研究史-显微镜发明： 一. 血细胞 二. 血栓与止血 三. 造血干细胞 四. 血液学检验发展史,概论,发展史,与检验关系,绪 论,血液探索史,概论,发展史,与检验关系,石器时代- 砭石放血病,公元前400年内经-藏神主血脉， 刺络放血,“滴血认亲”,吸血强身,公元前400年希波克拉底,公元500-1500)理发师用柳叶刀放血,16世纪末期-荷兰人制作简易显微镜,1628年哈维提出了血液循环,1674年列文虎克观察血液,1799年开国总统华盛顿-死于放血疗法,1840年-维多利亚女王家族血友病,中

3、国,西方,乔治华盛顿-美国首任总统（17321799）,维多利亚女王（18191901）,哈维-英国科学家（1578-1657）,绪 论,血液探索史 我国古代：石器时代-砭石放血治病 公元前400年内经-“藏神”和“主血脉” ,刺络放血 “滴血认亲” 西方： 早期曾崇拜，神秘血液-吸血强身 古希腊医圣希波克拉底（公元前460年-前370年）-血在四种体液中占主导地位 中世纪（公元500-1500)理发师用柳叶刀放血 16世纪末期-荷兰人制作简易显微镜， 1628年哈维提出了血液循环 1674年荷兰亚麻商人安东尼凡列文虎克-血液由含有非常小的圆球状物的水晶体般雾状 的水组成，测量了它们的大小 1

4、799年开国总统华盛顿-死于放血疗法，20世纪逐渐淘汰 1840年-维多利亚女王的9子中，3/4男为血友病，5女为携带者-皇室遗传病,概论,发展史,与检验关系,绪 论,血液研究发展史-显微镜发展,概论,发展史,与检验关系,16世纪末-简易显微镜-放大几十倍,19世纪-普通光学显微镜-分辨率1微米（放大率极限2000倍） 显微结构,2个世纪,绪 论,血液研究发展史-显微镜发展,概论,发展史,与检验关系,电子显微镜-分辨率10nm （放大率上万倍） 超微结构（亚显微结构）,绪 论,血液研究发展史-显微镜发展,概论,发展史,与检验关系,纳米显微镜（扫描探针显微镜） 分辨率0.1nm （放大率百万倍）

5、 实现原子水平的观察及操控-纳米生物学,扫描探针示意图,纳米显微镜照片,绪 论,血液研究发展史 血细胞发展史 16世纪到17世纪-显微镜-红细胞、白细胞及血小板。 19世纪-计数法的改善，红细胞来源于骨髓及建立血细胞染色法-形态学阶段。 1900年-ABO血型确立-开创输血领域。 1945年-Coombs建立抗人球蛋白试验-对免疫血液学做出贡献。 1949年-镰状贫血是Hb异常而提出“分子病”-分子水平。,概论,发展史,与检验关系,绪 论,1. 红细胞认识,概论,发展史,与检验关系,血细胞发展史,1871-1876年-发现了红细胞有携氧能力，且参与组织的呼吸作用。 20世纪20年代-红细胞体外

6、保存需葡萄糖，30年代体外保存血液，40年代建立血库 1946年-红细胞寿命120天左右，1959年以后对红细胞糖代谢全面了解。 20世纪80年代-A、B型转化为O型血成功，Rh阳性转换为Rh阴性。,绪 论,一.血细胞发展史 2 白细胞认识 1892-1930年-白细胞有趋化、吞噬和杀菌作用。 1910年-单核细胞为“打扫战场的清道夫”，1976年之后称之为“单核吞噬细胞系统”。 1959年-淋巴细胞转化为免疫母细胞并能分裂增殖，浆细胞是B淋巴细胞转化。B淋巴细胞产生抗体，T淋巴细胞产生细胞因子。,概论,发展史,与检验关系,白细胞,单核细胞,淋巴细胞分裂,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展

7、史-血细胞发展史 3 血小板认识 1842年发现血小板，40年后了解到止血和修复血管作用， 1923年发现其粘附和聚集功能。 血小板超微结构研究 近年发现血小板颗粒,绪 论,概论,发展史,与检验关系,二 血栓与止血的发展史 2000年以前，犹太人记载了血友病 20世纪50年代后对凝血机制有了深入了解 60年代凝血机制的“瀑布学说”得到公认 70年代发现新的凝血与纤溶相关因子 80年代开展对纤维连接蛋白等粘附因子的研究 90年代至今，完善并拓宽“瀑布学说”，拓宽血栓与止血的研究领域。 分子水平研究：对内皮细胞、血小板、凝血和纤溶等在血栓中的作用从分子水平有了更深入的了解。,发展史,绪 论,概论,

8、发展史,与检验关系,1896年，Wilson在著作中用到“干细胞” 1981年Evans和Martin从小鼠胚囊内细胞团分离出胚胎干细胞,发展史 三 造血干细胞发展史,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史 三 造血干细胞发展史 20世纪提出造血干细胞概念， 60年代初，Tills等用致死量射线照射 小鼠进行骨髓移植，发现造血干细胞,1984年，Civin提出表达CD34抗原细胞即造血干细胞。 1979年，体外成功培养人造血祖细胞。 1990年，造血干细胞移植治疗遗传病、白血病和再障。,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史 三 造血干细胞发展史,干细胞(stem cell)是一类具有自我

9、复制能力的多潜能细胞。在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。 胚胎干细胞 （ES细胞） 1 根据发育阶段 成体干细胞 存在于成熟个体各组织中的干细胞 2 根据发育潜能 全能干细胞（TSC细胞）：胚胎干细胞 多能干细胞：造血干细胞，神经干细胞 专能干细胞 ：肝脏干细胞，肠上皮干细胞,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史 三 造血干细胞发展史,胚胎干细胞是早期胚胎中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境，ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。,绪 论,概论,发展史,与检验关系,1 胚胎干细胞研究在美国颇具争议,发展史 三 造血干

10、细胞发展史,2 美国科学家从成体动物提取成体干细胞，并不能转化成各种器官组织，不能取代胚胎干细胞。 3 iPS细胞是将多能遗传基因导入皮肤等细胞中而成。让普通体细胞“初始 化”具备干细胞功能即iPS细胞 iPS细胞和ES细胞除了不能生成胚胎以外，可以产生所有细胞，如用于医疗，那么理论上可以治愈所有疾病凡是不好的组织去除，替换为重新生长的正常组织。,绪 论,概论,发展史,与检验关系,血细胞是造血干细胞增殖和分化的结果。不断生成新细胞替代衰老退变细胞，维持体内各类细胞恒定。,造血干细胞是由胚胎干细胞发展而来，具有高度自我更新和多向分化两个基本特征,发展史 三 造血干细胞发展史,绪 论,概论,发展史

11、,与检验关系,四 血液学检验的发展史,发展史,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,1 无染色的血细胞形态学检验时期 （17世纪后期19世纪中期）,1852-1867年，血细胞显微镜计数（包括血细胞吸管、血细胞计数板）,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,2 染色的血细胞形态学检验时期（19世纪中期起),1856年，Erb用某些合成染料染血液 1879年，Ehrlich(德国细菌学家欧立希）用纺织染料染色固定血涂片 1898年，Ehrlich等报告三酸染色法（橘黄G、甲基绿及酸性品红组成的混合染色液） 1891年，Romanowsky（

12、罗曼若夫斯基）用改良的甲基蓝混合染色液鉴定疟原虫，并可区分不同的白细胞 1902年, Wright,Giemsa改进染色剂 Romanowsky型混合物染色剂具有良好的染色效果，直到现在其基本配方仍被广泛使用，这一混合染色剂由甲基蓝、伊红和天青组成，依据染色后细胞的大小、形状及色彩深浅进行鉴别,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,2 染色的血细胞形态学检验时期（19世纪中期起),绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,3 骨髓细胞形态学检验时期（20世纪20年代起）,1903年，Wolff首创骨髓穿刺术，用于动物实验。同年，Pianess

13、应用于人体 1929年，Arinkin用改进的简便胸骨穿刺吸引法，在住院病人身上获取胸骨骨髓涂片，为骨髓检查奠定了基础,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,4 骨髓组织学检验时期（20世纪20年代-70年代进入快速发展时期）, 骨髓病理组织学研究与骨髓抽吸物涂片检查几乎同时起步 20世纪70年代起，骨髓活组织工具改良以及新技术应用，特别是不脱钙组织块塑料包埋半薄切片技术的应用，使骨髓病理组织学检查快速发展,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,5 细胞化学染色检验时期（20世纪初起,5070年代为鼎盛时期）,1867年，铁的普鲁士蓝染色

14、法，后被应用于骨髓铁染色 1909年，过氧化物酶染色,瑞士吉姆萨染色 铁染色 POX染色,绪 论,概论,发展史,与临床关系,发展史,5 细胞化学染色检验时期（20世纪初起,5070年代为鼎盛时期）,1939年，苏丹黑B染色 1939年，1955年，中性粒细胞碱性磷酸酶染色 1960年，过碘酸雪夫反应 1953年1977年，各种酯酶染色,急性粒细胞白血病（M2a）氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色,中性粒细胞碱性磷酸酶染色,正常血细胞PAS染色,1.原始粒细胞，呈弱阳性；2.幼稚粒细胞，呈强阳性；3.中性杆状核粒细胞，呈强阳性,绪 论,概论,发展史,与临床关系,发展史,四 血液学检验的发展史,6 细胞

15、免疫学检验时期（20世纪50年代起，80年代进入快速发展时期）,20世纪40-70年代，免疫荧光标记技术,免疫酶标技术,ELISA技术,20世纪80年代，统一命名白细胞分化抗原（CD）、白血病免疫表型分析,7 细胞遗传学检验时期（20世纪50年代起,80年代进入快速发展时期）,20世纪40年代，肿瘤细胞的染色体理论 20世纪50年代，确认人类染色体46条，标志着人类细胞遗传学开始 20世纪60年代，慢粒患者的白血病细胞中发现Ph染色体，第一次将染色体异常与特定肿瘤类型联系在一起，是肿瘤细胞遗传学史上里程碑 20世纪7080年代，白血病细胞遗传学表型与形态学类型与临床治疗和预后，肿瘤的生物学有关,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,四 血液学检验的发展史,8 分子生物学及基因检验时期（20世纪80年代起，90年代进入快速发展期）,1983年，BCR-ABL融合基因 20世纪90年代，分子血液学时代，应用分子生物学的思维，评估患者预后，个体化治疗等,绪 论,概论,发展史,与检验关系,发展史,1930年，卡尔兰德斯坦纳(KarlLandsteiner) （美籍奥地利人），发现ABO血型 为输血、器官移植、胎母不相容和亲子鉴定的理论基础。 兰德斯坦纳生日6月14日定 为