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1、1.红细胞形态检查： 方法、正常及常见异常红细胞形态。 2.血细胞比容测定： 概念、测定方法、参考值及临床意义。 3.网织红细胞计数： 概念、计数方法、参考值及临床意义。,红细胞形态检查方法,先低倍镜： 再用油镜：,制备血涂片,染色,镜检,检查区域：体尾交界处，细胞分布均匀， 红细胞紧密排列但不重叠。,估计细胞分布和染色情况，浏览全片是否存在异常细胞。,观察红细胞形态。,红细胞的形态检查,1. 正常形态,2. 大小异常,3. 染色异常,4. 形态异常,5. 结构异常,双凹圆盘形，细胞大小相似，平均直径7.2m(69.5m)，厚约2m；瑞氏染色后呈淡粉红色，中央1/3为生理性淡染区；无核，胞质内
2、无异常结构。,外周血正常红细胞形态,红细胞大小异常,红细胞大小不均(anisocytosis),小红细胞(microcyte)：,大红细胞(macrocyte)：,巨红细胞(megalocyte)：,直径小于6m,直径大于10m,直径大于15m,正常红细胞,巨红细胞,小红细胞,正色素性(normochromic),红细胞染色异常,低色素性 (hypochromic),高色素性 (hyperchromic),嗜多色性 (polychromatic),红细胞形态异常,球形红细胞,椭圆形红细胞,靶形红细胞,镰状红细胞,口形红细胞,棘状红细胞,半月形红细胞,泪滴形红细胞,染色质小体 (HowellJo
3、lly body),红细胞结构异常,卡波环 (Cabot ring),嗜碱性点彩红细胞 (basophilic stippling cell),有核红细胞 (nucleated erythrocyte),红细胞在全血标本中所占体积的比值。,一.概念,二.常规测定方法,Wintrobe法,微量离心法,红细胞间残留血浆较多， 故结果偏高。,快速,用血少,残留血浆较少。,(首选常规方法),血细胞比容测定,hematocrit,Hct,Ht,HCT(血液分析仪法) packed cell volume , PCV(离心法),（一）原理,（二）试剂,（三）器材,干燥EDTA-K2 或 肝素钠,Wintr
4、obe管（温氏管） 离心机,Wintrobe法,(温氏法),血细胞比容测定,温氏管,1.静脉血2ml加入抗凝瓶中，充分混匀。,（四）方法,2.吸取抗凝血插入温氏管底部，将血注入 至刻度“10”处，塞紧瓶口。,3.相对离心力2264g，离心30 min，读数， 再以同样速度离心10 min，至红细胞层 高度不再下降为止。,4.读出红细胞层柱高的毫米数，乘以0.01， 即为血细胞比容测定值。,Wintrobe法,(温氏法),血细胞比容测定,离心后血液被分为5层： 血浆层 血小板层 白细胞和有核RBC层 还原红细胞层 带氧红细胞层,读数层,Wintrobe法,(温氏法),血细胞比容测定,1.所用器材
5、必须清洁干燥。(防溶血),（五）注意事项,2.不能使用改变RBC体积的抗凝剂。,3.抗凝血应塞瓶口，防血浆蒸发。,4.离心的条件必须恒定。,Wintrobe法,(温氏法),血细胞比容测定,5.标本溶血或红细胞形态异常需注明。,三.参考值,Wintrobe法：男 0.400.54 女 0.370.47 微量法：男 0.470.04 女 0.420.05,血细胞比容测定,四.临床意义,1.与RBC测定的临床意义相似。,2.全血粘度的主要因素之一。 Hct增高可致全血粘度增加。,3.用于红细胞平均值的计算。,血细胞比容测定,Ret是晚幼红脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞，因其胞浆内残存嗜碱性物质，
6、经煌焦油蓝或新亚甲蓝等活体染色，呈蓝色的网状或颗粒状结构。,网织红细胞,概 念,(reticulocyte,Ret,RET),型：丝球型 外周血中无,型：网型 外周血少见,型：破网型 外周血可见,型：点粒型 外周血多见,网织红细胞,形态与分型,一.试剂,5g/L新亚甲蓝N溶液,10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液(试管法),10g/L煌焦油蓝乙醇溶液（玻片法）,二.方法,玻片法,试管法,网织红细胞,手工法网织红细胞计数,玻片法,1.染液1滴置玻片一端，自然干燥备用。,2.取血1滴至干燥的染料上，用推片角混 匀，将两玻片粘合。,3. 510 min后，推血片。,方法评价：水分易蒸发，故不易涂片； 染色
7、时间短，结果偏低。,网织红细胞,手工法网织红细胞计数,4.油镜下计数至少1000个RBC中的Ret数。,试管法,1.染液2滴加入小试管，加血2滴，混匀。,2.室温下染色1520 min。,3.混匀，取1小滴制薄血片，干后计数。,方法评价：水分不易蒸发；染色时间长； 可重复推片复查。,(手工法的推荐方法),网织红细胞,手工法网织红细胞计数,三.注意事项,1.玻片法中，应待玻片上煌焦油蓝乙 醇液中乙醇完全挥发后才能加血。,2.染色时间必须充分。,3.计数区域一般选择红细胞分布均匀 的部位，兼顾边缘和尾部。,4.试管法染液与血液以1：1为宜。,网织红细胞,手工法网织红细胞计数,Miller窥盘 (置
8、于目镜中),计数小正方形中的红细胞数，计 数大正方形中的网织红细胞数。,前提：红细胞散在且均匀分布,作用：提高计数的速度和精度,相对值：成人：0.0050.015 新生儿：0.020.06 绝对值：成人：(2484)109/L,网织红细胞,参考值,1.判断骨髓红细胞造血情况,2.作为贫血疗效观察的指标,减低: 表明骨髓造血功能减低。 常见于再生障碍性贫血。,增高: 表明骨髓红细胞生成旺盛。 常见于溶贫和急性大失血后。,网织红细胞计数,临床意义,网织红细胞相对值能准确客观地反映网织红细胞的生成速度吗？,网织红细胞绝对值,网织红细胞百分率红细胞数/L,网织红细胞生成指数 (reticulocyte
9、 production index, RPI),（代表Ret生成的相对速度）,1.红细胞的形态异常包括哪些方面？ 2.什么是网织红细胞？它有些什么形态？ 3.选择题： （1）以下哪项不属于微量高速离心法测 定血细胞比容的优点 A、用血量少 B、测定时间短 C、效率高 D、无血浆残留 E、准确度较高,复习思考题,（2）下列网织红细胞的概念，哪项是错误的 A、是介于晚幼红与成熟红细胞之间的尚未 完全成熟的红细胞 B、其胞浆经瑞氏染色后可见蓝色网状结构 C、通常比红细胞稍大 D、在骨髓中的数量比外周血高 E、通常以网织红细胞的百分率表示 （3）不属于红细胞异常结构的是 A、染色质小体 B、杜勒体 C、卡波环 D、嗜碱性点彩红细胞 E、有核红细胞,
