usp微生物检测精要课件

《usp微生物检测精要课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《usp微生物检测精要课件（93页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、USP微生物检测精要,主讲人：,USP概述,世界上唯一的非政府药典机构,独立、非盈利、自主（无外部资助）,收入来源于销售 -参考标准品 -USP出版物和相关产品,标准被多个国家认可,业界、学术界和政府的志愿者参与标准制定,标准设定参与者得广泛性,USP概述,使命,建立有助于提高药品和食品质量、安全性和效用的公共标准及相关方案，以改善全世界人民的公共健康。,USP概述,USP与法律,如果一个产品或器械声称或将其描述为官方药典中已认可的药物，但是其效力与药典标准不符，或其质量或纯度低于药典标准，将被认为是次级品。（联邦食品、药品、化妆品法案 第501（b）章节）,USP概述,USP微生物学内容,与

2、其总的使命一致，USP在微生物学方面的角色是，在微生物方面连同其他要求来发展公共标准，保证产品质量的一致性药品、辅料和原料药。,USP概述,无菌控制也适用于非无菌产品,控制贯穿于一个药物或生物制剂从研发到市场到成品控制的整个过程,整个过程中的各种微生物控制的整合将提高最终产品微生物质量的保证,USP提供了每个阶段微生物控制的程序和指导,微生物学是开发、生产及成品测试的一部分,USP概述,作为重要组成的微生物控制,原料和组分的微生物控制,环境的微生物控制,生产过程的微生物控制,成品的微生物控制,所有微生物控制的整合,人员的微生物控制,USP概述,原料和组分的微生物控制的USP观点及文件,非无菌产

3、品的微生物检查：微生物计数测试 非无菌产品的微生物检查：控制菌检查 非无菌药品的微生物评估,USP概述,环境微生物控制的USP观点及文件,洁净室和其他受控环境的微生物评估 消毒剂与杀菌剂 无菌测试隔离系统验证,USP概述,过程微生物控制的USP观点及文件,灭菌与无菌保证 生物指示剂 灭菌化学和物理化学指示剂，及综合指示剂 生物指示剂耐受力测试,USP概述,成品微生物控制的USP观点及文件,无菌测试 细菌内毒素测试 热原测试 抗菌有效性测试 最终灭菌药品参数放行 无菌产品包装完整性评估,微生物实验室规范,微生物实验室规范 重要的控制点 无菌技术 培养基控制 菌种控制 设备控制 实验室布局和运作

4、数据文件控制 员工培训,微生物实验室规范,无菌技术 防止和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作方法和管理方法 无菌环境 灭菌 消毒 卫生要求 无菌操作技术,微生物实验室规范,培养基 微生物实验室工作质量的核心是培养基，应根据既定的目的选用正确的培养基。 生产商应提供相关的CoA和说明书 配制 储存 菌种选用 水 纯化水，去离子水，蒸馏水 记录用量 成分的测量 校准过的天平，天平的量程应准确 清洁的容器和工具 记录称量,微生物实验室规范,培养基 不要过度加热 加热帮助溶解，通常培养基变深说明过度加热 添加剂加入后需充分混合 清洁的玻璃器皿 防止外来污染和抑菌剂 玻璃器皿清洁,微生物实验室规范,培

5、养基 灭菌条件 供应商提供参数，或自己验证 高压蒸汽灭菌，过滤除菌 验证应考虑无菌和培养基生长能力 湿热灭菌要考虑装载分布，通常121 15min,微生物实验室规范,培养基 灭菌条件 在无菌和过度加热之间平衡 消毒锅灭菌结束后，不建议在其中存储培养基 不正确的加热、灭菌条件会影响培养基的 颜色 澄清度 pH 凝固能力 促生长能力 选择性,微生物实验室规范,培养基储存 制备培养基的储存，注意 低于0，凝胶结构破坏 避光 避热 琼脂培养基密封 融化 重复融化应被限制（不超过一次），防止过度加热或潜在污染 融化时，使用 水浴或流通蒸汽 微波炉，热板要防止过度加热 融化的培养基储存 在4045水浴不应

6、超过8小时 浇制平皿前擦干,微生物实验室规范,培养基储存 培养基应标示 批号，制备批号 制备日期，有效期 培养基名称 有效期确定 根据成分，配方，容器，储存条件等确定 生长能力试验数据支持,微生物实验室规范,培养基储存 培养基应根据生产商的说明书，并在验证过的条件下储存 培养基储存不得超过有效期 重要区域环控用培养基必须 双层包装 最终灭菌，否则进行全数预培养及用前检查,微生物实验室规范,培养基质控测试 所有待用的培养基应检查： 生长能力 每批制备的培养基均需进行 测试菌种根据药典，供应商说明及环境中分离得到的菌株 生长能力测试不合格 调查 不得使用该批号 无菌 pH，0.2 容器/平皿的完整

7、性 抑制或指示能力 定期稳定性检查以确认储存效期,微生物实验室规范,微生物菌种保藏 建立标准程序处理、保存菌种。防止污染和特性变化 必须小心地处理 使用前确认菌种的身份，纯度 根据生产商说明书复苏菌种，使用接种技术 -70以下或冷冻干燥保存储备菌种，可延长保存周期 开启后不要重新冷冻菌种 追溯传代次数，不超过五代,微生物实验室规范,实验室设备维护 绝大部分实验室设备需要进行标准的验证（IQ、OQ、PQ） 定期校准、保养 定期进行性能检查 根据设备的特性和使用状况确定频率 定期清洁、消毒,微生物实验室规范,实验室布局和运作 实验室布局应该有利于实验室运作 防止交叉污染 活动分区 无菌、环控样品的

8、处理和培养应在无菌环境中进行 注意安全 实验室应通过不同的进入通路和隔断来区分“洁净”区和“阳性”区，包括更衣，清洁，消毒，洁净区的生物安全柜仅用于无菌和洁净的操作 当样品发现微生物生长，后续的工作应转移至“阳性”区,微生物实验室规范,实验室布局和运作 在无菌条件下小心地对物料进行取样 环控培养基应在待取样区域环境中放入环控设备并小心的操作 无菌隔离装置技术的使用可能是有效的,微生物实验室规范,样品处理 大部分样品，水或环控样品中的微生物对操作、储存环境敏感。 产品处方、容器材质、储存时间/温度 减少样品，取样与测试间的间隔时间，并控制储存条件。 远距离的转移需确认转移条件对测试及样品的影响。

9、 可能的话，在无菌条件下，使用无菌技术取样，即使是非无菌样品。 取样记录 样品信息、取样日期、送样日期、人员/部门，实验室样品，接受及确认,微生物实验室规范,培养基培养时间 培养时间短于3天，用小时表示 3035培养1872小时 培养指定的最短时间，当超过培养时间时，进行良好的微生物结果判断 培养时间长于3天，用天表示 3035培养35天 从上午或下午，培养至结束当天的相同时间段，进行结果判断,微生物实验室规范,人员培训 制药企业微生物实验室人员 应该接受过微生物学或相关健康科学的正规学习（在校学习） 相关SOP的培训 被赋予保持其技术和经验的职责 程序 SOP应易于理解并作为培训计划的基础

10、SOP的编号或标题提供了一个便利的将培训文件化方法 每个岗位应有相应培训要求，进行上岗前资质确认,微生物实验室规范,人员培训 绩效评估 应定期进行 应证明人员在实验室核心活动中的能力 微生物实验室管理人员应经过适当的教育和培训 管理、计划、预算、安全、调查技巧、技术报告编写、 相关SOP等 微生物技术水平应不低于其管理的技术人员 了解微生物学原则、能科学地解释法规及指南 有足够的微生物知识与经验提供技术指导,微生物实验室规范,实验室资源 管理层保证实验室有足够的资源完成要求的测试 熟悉预算管理 制定实验室绩效考核指标,微生物实验室规范,文件 实验室文件至少包括： 微生物人员培训和能力确认（上岗

11、资质） 设备验证、校准和维护 测试中的设备性能（如温度记录） 培养基制备、无菌检查、生长能力测试、选择性能力 培养基清单与控制 根据程序进行测试的重要参数 数据和计算的确认 经QA人员或相应领导审核过的报告 超标调查结果,微生物实验室规范,实验室结果的维护 记录重要的测试步骤及参数，用以确认结果的完整性，并为能重复测试提供信息 至少应包括 日期 测试样品 微生物检验人员名字 程序编号 测试结果 偏差（如有） 测试参数(设备，菌种，培养基) 管理人员审核签名,微生物实验室规范,实验室结果的维护 设备 重要设备记录在测试记录上 校准计划 适用的话，有使用记录 重要的温度记录（水浴，培养箱，灭菌锅）

12、应该具溯源性 数据纠错 错误的地方划一横线，签名和日期,微生物实验室规范,实验室结果的维护 测试结果 应包含平皿计数结果（如有） 数据分析的方法应罗列在相关的SOP中 对粘贴的图表、数据，骑缝签名 存档 记录应存档并防止丢失 应有记录保存计划,微生物实验室规范,测试结果解释 微生物数据有时不容易解释 与人类相关的微生物群落被广泛的用于许多测试 人员污染是始终被关心的问题 样品或环境中的微生物并非均匀分布 微生物检测可变范围大：可能在+/-0.5log10单位左右 因此，得到的结果与期望的结果略有差异并不是重大问题。,微生物实验室规范,测试结果解释 避免污染非常重要 结果必须从广泛的微生物角度去

13、解释： 可能的污染物的情况 产品中微生物存活的可能 微生物生长特性（尤其是真菌孢子的散布，生长）,微生物实验室规范,测试结果解释 对不合格结果进行调查通常会发现，不合格由以下2个原因中的一个造成。 实验室错误 产品不合格 无论哪种情况，管理层必须立即被通知,微生物实验室规范,测试结果解释 纠偏计划 如果发现实验室错误，需要 纠偏措施的有效性需要跟踪和记录 无效测试 由于错误将试验结果视作无效必须记录 确认测试（复试） 应有SOP描述何时进行确认测试,药物制剂和药用物质的接受标准,介绍 非无菌制剂中存在的微生物可能降低产品的治疗作用，甚至使之失活，并可能对病人健康产生不良影响。 生产商必须按GM

14、P的指导进行制剂产品的生产储存和分发，以保证最终制剂仅带有低水平的微生物。,药物制剂和药用物质的接受标准,介绍 非无菌产品的微生物检查根据非无菌产品的微生物检查：微生物计数和非无菌产品的微生物检查：控制微生物测试正文中的方法进行。,药物制剂和药用物质的接受标准,非无菌制剂的微生物质量标准,药物制剂和药用物质的接受标准,非无菌原料的微生物质量标准,药物制剂和药用物质的接受标准,除了表中的微生物，其他需检查的微生物的重要性应根据下述评估： 产品用途（眼，鼻，等） 产品特点：支持生长吗？或有防腐性 应用的方法 药物接受者：对婴儿、幼儿及衰弱患者的风险是不同的 存在疾病、伤口、器官损伤 相应因素的风险

15、评估由经授权的有资质的人员进行。,药物制剂和药用物质的接受标准,适当的书面程序必须建立并遵循以防止非无菌药品中的有害微生物。 不仅仅是不存在USP规定的微生物,药物制剂和药用物质的接受标准,有害微生物 有害微生物的概念不适用于无菌产品。 将用于非无菌产品的微生物测试，及非无菌生产环境中分离到的微生物评估及清洁验证。,药物制剂和药用物质的接受标准,有害微生物可以被定义为： 1.能在产品中增殖的微生物，对药品的物理特性及治疗作用有负面影响 2.由于产品中微生物的数量及致病性能导致使用该药品的患者受到感染,药物制剂和药用物质的接受标准,有害微生物： 洋葱伯克氏菌 需氧的非芽孢杆菌。存在于水中，土壤及植物中，如水果和蔬菜。伯克氏菌属中有两种常见人体致病菌，洋葱伯克氏菌及类鼻疽伯克氏菌。洋葱伯克氏菌是患有囊肿性纤维化和慢性肉芽肿疾病的患者体内重要的呼吸道致病菌。以前属于假单胞菌菌属。,药物制剂和药用物质的接受标准,有害微生物： 铜绿假单胞菌 考虑到其感染数量和感染类型，及有关的发病率和死亡率，它是假单胞菌属中最重要的人体致病菌。这些细菌引起的疾病范围从表皮感染到爆发性坏血症。铜绿假单胞菌是医院感染主因。它是医院呼吸道感染的首要原因，对于加护病房插管治疗的病人危害极大，死亡率达40%到50%。几年前，铜绿假单胞菌被认为是小儿及成人艾滋病患者发病和死亡的重要原因。,药物制剂和药用物质的接受标准