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1、生理学实验 血型鉴定与血红蛋白含量测定,重庆师范大学生命科学学院,掌握凝集反应的原理; 熟悉凝集反应的实验步骤和应用; 掌握比色法测定血红蛋白含量的方法。,实验目的,实验原理,凝集反应： 一定浓度的电解质环境中， 抗原抗体凝集成为大小不等肉眼可见的凝集块。,颗粒性抗原,抗体,凝集反应,ABO血型-以原定型,实验材料,分型血清：抗A血清、抗B血清 采血针、酒精、棉签、牙签 生理盐水 载玻片,结果判断,记录并判断结果:,三、Rh血型系统,人类红细胞含有一种与恒河猴 Rhesus macacus的红细胞相同的凝集原称为Rh 因子 含Rh因子(8种，主要是D抗原)Rh阳性 不含Rh因子Rh阴性,Rh血
2、型的临床意义,输血溶血 新生儿溶血,分娩后72h内进行Rh抗体被动免疫,胎儿红细胞进入母体即被破坏 （不能诱导母亲抗Rh免疫反应）,Rh+,Rh,初孕,健康新生儿,健康新生儿,新生儿溶血的预防,血红蛋白含量测定的基本原理,血红蛋白是红细胞的主要成分，包括珠蛋白和亚铁血红素。血红蛋白除能与氧结合形成氧合血红蛋白外，尚能与某些物质作用形成多种血红蛋白衍生物。它们具有特定的色泽和吸光谱，在临床上，可用以诊断某些变性血红蛋白血症和血红蛋白的定量测定。 测定血红蛋白含量的方法很多，实验常用比色法。其原理是在一定量的血液中，血红蛋白经少量盐酸的作用，使亚铁血红素变成高铁血红素，呈现较稳定的棕色。用水稀释后
3、与标准色比较，求出每100ml血液中所含的血红蛋白克数。正常成年男子每100ml血液平均含14.4g，女子为13.1g。,实验器材,血红蛋白计、0.1 mol/L HCl、刺血针、滤纸片、酒精棉球、干棉球、蒸馏水。,方法与步骤,血红蛋白计包括 标准比色架，架的两侧镶有两个棕色标准玻璃色柱。 血红蛋白稀释管，有方形也有圆形的。两侧有刻度，一侧以g为计数单位，对侧以百分率计，按我国情况，是以每100ml血液内含血红蛋白14.5g为100%。20mm3血红蛋白吸管，还有玻璃棒、滴管。 用滴管加0.1mol/LHCl于血红蛋白稀释管内，到刻度百分比刻度20处。 用刺血针刺破指尖采血，血滴宜大些。用血红
4、蛋白吸管的尖端接触血滴，吸血至刻度20 mm3处（0.02ml）。,方法与步骤,用滤纸片或棉球擦净吸管口周围的血液，将吸管插入血红蛋白稀释管的盐酸内，轻轻吹出血液至管底部，反复吸入并吹出稀释管内上层的盐酸，洗涤吸管多次，使吸管内的血液完全洗入稀释管内。摇匀或用小玻璃棒搅匀后，放置10 min，使盐酸与血红蛋白充分作用。 把稀释管插入标准比色架两色柱中央的空格中，使无刻度的两侧面位于空格的前后方，便于透光和比色。 用滴管向稀释管内逐滴加入蒸馏水（每加一滴要搅拌），边滴边观察颜色，直至颜色与标准玻璃色柱相同为止。稀释管上液面的刻度读数即为每100 ml血液血红蛋白的克数。,注意事项,吹血液入稀释管及洗净吸管时，不宜用力过猛。 蒸馏水需逐滴加入，多做几次比色，以免稀释过量。每次比色时，充分摇均，以免影响比色。,
