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1、血细胞镜检规则的制定和应用,北京和睦家医院 孙芾,制定规则的目的,保证血细胞检查结果准确性 提供正确的细胞形态学信息 提高工作效率 为临床诊断提供依据 为临床治疗方案提供依据,血细胞显微镜检查的重要性,目前普遍采用自动血细胞分析仪进行白细胞、红细胞和血小板分析，仪器不仅提供细胞的常规计数和计算结果，同时还可得到白细胞三项或五项分类结果，大大提高了工作效率。 由于人体细胞的多样性和复杂性，仪器仅依靠分析细胞体积、电导性、光闪射等物理特性很难提供准确的分类结果。因此血细胞显微镜检查仍然是必不可少的分析手段。,影响细胞计数准确性的因素 电阻抗细胞计数原理,白细胞分类计数计算方法示意图,有核红细胞或疟
2、原虫干扰,血小板聚集干扰 不完全溶解的红细胞干扰,血小板聚集,影响分类准确性的因素,Injector Tip,VCS,Focused laser,beam,Sheath fluid,Purdue University Cytometry Laboratories,血细胞显微镜检查标准制定方法,根据自己实验室所用的血细胞计数仪测定出的结果制定出显微镜检查的标准，以保证每个结果的准确性。,制定规则需考虑的因素和指标,1有无白细胞自动分类结果 无结果必须进行显微镜检查且要给出白细胞形态和分类计数结果 2白细胞总数上限和下限 WBC 25.0x109/L,制定规则需考虑的因素和指标,3白细胞自动分类各
3、种白细胞百分比的上限与下限 五分类：Mono15%,Eos15%,Baso3%,Lym60%(成 人）或 Lym80（儿童），Neu85% 三分类：Mono10%, Lym60%(成人）或 Lym80（儿童），Neu85% 4. 仪器分析结果是否有如下提示 ： 大血小板、血小板聚集、小红细胞/红细胞碎片、有核红细胞、异形淋巴、未成熟粒细胞/杆状核粒细胞和幼稚细胞等。 计数结果后有星号提示（查看是否有有核红细胞） 血小板后有星号提示（查看是否有凝块）,制定规则需考虑的因素和指标,5血红蛋白、MCV、RDW Hb5.0x109/L,制定规则需考虑的因素和指标,8同一病人上一次分类计数的时间 24小
4、时内不必再次计数 8医生申请或特殊病人群体（新生儿） 9各种病人的特点 化疗 放疗 孕妇,Atypical Lymphocyte,血细胞显微镜检查包括：,白细胞分析和分类计数 包括：分类计数的白细胞数量、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸细胞、嗜碱细胞、分叶核粒细胞、杆状核粒细胞、晚幼粒细胞、中幼粒细胞、早幼粒细胞、原幼细胞、异形淋巴细胞、中毒颗粒和空泡变性等。 红细胞形态 大红细胞、有核红细胞、靶形红细胞、椭圆形红细胞、小红细胞、镰状红细胞、球形红细胞、裂红细胞、泪滴形红细胞、低色素、高色素、红细胞大小不等、嗜碱性点彩、多色素、豪-周氏小体、异形红细胞等。 血小板形态和数量估计 小血小板、大血小板、血
5、小板聚集、血小板数量评估等 其它异常：寄生虫等。,显微镜复检方法和注意事项：,1良好的涂片和染色 2合适的读片位置：红细胞相接排列但很少重叠 3红细胞形态分析,油镜读片位置,红细胞形态,显微镜复检方法和注意事项：,4白细胞分析 白细胞数量评估 WBC 4.0 -7.0x109/L: 2-4白细胞/hpf (x40) WBC 7.0 -10.0x109/L: 4-6白细胞/hpf (x40) WBC 10.0 -13.0x109/L: 6-10白细胞/hpf (x40) WBC 13.0 -18.0x109/L: 10-12白细胞/hpf (x40) 分类计数的白细胞数量 WBC 1.0x109
6、/L-30.0x109/L: 计数100个白细胞 WBC 30.0x109/L: 计数200个白细胞 WBC 0.5x109/L -1.0x109/L: 每1.0x109/L计数10白细胞 WBC 0.5x109/L: 不进行显微镜计数,显微镜检查方法和注意事项：,5血小板形态分析和数量判断，有无凝聚 1个血小板/油镜读片视野 10x109/L 如果数量判断结果与仪器计数结果差距较大，需复检仪器结果或进行血小板人工显微镜计数 血小板计数减低，显微镜见聚集存在时，需要重新采集标本测定。标本持续凝集，要用枸橼酸钠抗凝重新测定。 6疑难血片和特殊病例应请上级主管复查,大血小板,血细胞显微镜检查报告方
7、式,白细胞形态分析和分类计数 形态和白细胞总数正常不报告分类计数结果，注明白细胞正常 形态或白细胞总数异常报告分类计数结果及形态 红细胞形态 未见异常 异常时注明何种异常如小细胞、低色素、大细胞、疟原虫等 血小板形态和数量 有无血小板聚集 大或小血小板增多 估计数量与实际数量相差较多时，报手工计数结果,量体裁衣,根据自己医院的特点制定了血细胞显微镜检查的规则，并应得到临床医生的认可。各医院检验科需根据自己的实际情况来制定自己的标准草案，与临床有关人员讨论后做出决定。,复检规则应用效果评价,和睦家医院对MAXM检测的9992份结果进行了统计分析： 仪器结果正常不需复检：7062份，阴性率70.7
8、% 复检标本2930份，占29.3% 其中镜检异常942份，占32.2% 总体真阳性率9.4% 总体假阳性率19.9%,复检原因分析,复检原因 数量 比率_ 仪器白细胞分类计数异常 1444 49 其它异常提示 527 18 医生要求分类计数 462 16 新生儿标本 289 9.9 血小板减低 92 3.1 白细胞计数异常 72 2.5 血红蛋白异常 24 0.8 无仪器分类计数结果 20 0.7 论文已发表:中华检验医学杂志2005，第二期155页,国际联合小组提出的复检规则,成员来自6个国家的17个实验室，仪器包括Beckman Coulter, Sysmex, Bayer, Advia
9、, Abbott生产的多种型号血细胞分析仪 论文已发表：The international Consensus Group for Hematology Review: Suggested Criteria for Action Following Automated CBC and WBC Differential Analysis. Laboratory Hematology, 2005, 11:83-90 规则有41条，在15个实验室进行了评估,国际联合小组复检筛查规则简介,指标 处理方法（基于初次或随诊检测） _ 新生儿 浏览血片 WBC: 30.0 浏览血片 PLT: 200g/L
10、浏览血片，注意细胞形态 MCV: 105fl 浏览血片，注意细胞形态 MCHC: 38 浏览血片，注意细胞形态 RDW: 22 浏览血片，注意细胞形态 无白细胞分类结果 浏览血片，手工分类 中性粒细胞值：20.0 浏览血片 淋病细胞值：5.0（成人） 浏览血片 单核细胞值：1.5（成人） 浏览血片 嗜酸细胞值：2.0 浏览血片 嗜碱细胞值：0.5 浏览血片 异常提示 浏览血片,注意提示内容,评价结果,共检测13298份病人标本 真阳性率11.2% 假阳性率18.6% 真阴性率67.3% 假阴性率2.9% 各实验室评价结果接近,讨论和建议,临床实验室忽视显微镜复检，将仪器结果直接发出，造成漏检。 检验科必须根据自己医院和所用仪器的特点制定出血细胞复检规则。 向临床医生宣传该规则，加强配合，提高工作效率 利用实验室信息系统、血细胞分析仪提示功能，保证复检规则正确应用。,谢谢大家,
