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1、微生物标本的采集与运送,检验科 2017.9.5,在临床微生物检验工作中，标本的正确选择、采集和运送是保证检验质量的重要环节，是实验室工作准确和有效的基本前提。,早期、无菌、合格,标本,规范化采集,不符合要求,污染的标本,提供重要临床感染信息,结果无意义,误导临床,常见标本的分类,一、血液标本的采集,1、不明原因的发热（大于38或低于36） 2、寒战、休克、僵直 3、严重的局部感染（脑膜炎、心内膜炎、肺炎、肾盂肾炎、腹部术后感染等） 4、白细胞增多（特别是核左移，未成熟或杆状核） 5、粒细胞减少、血小板减少 6、皮肤粘膜出血、多器官衰竭等 7、CRP、PCT升高,（一）采集指征,1、抗生素治疗
2、之前 若已使用抗生素者，应在下次用药前或血药浓度最低时采集标本。 2、患者寒战时 3、发热初期或高峰时 超过发热峰值后，病原菌会逐渐被机体免疫系统清除，从而减低检出率。,（二）采集时间：,发热要做血培养， 双侧双瓶少漏网； 何时采血要记清， 寒战前后菌量深；,采集前非常关键的一步： 皮肤和瓶子的消毒,特别提示：,1、需氧瓶+厌氧瓶 为 一套 注意：每一套血培养应当从身体的不同部位采集 2、成人： 810ml/瓶 儿童： 35ml/瓶 婴幼儿： 12ml/瓶 注意：采集静脉血,（三）采集血量：,1、急性感染：分别从两臂采血，每臂采1套。 2、急性心内膜炎：在抗生素治疗前1-2h内，于3个不同部位
3、采集3套 3、亚急性心内膜炎，第1天24h内，相隔1h分3个不同部位，连续采集3套血培养标本，若24-48h全部阴性，再采集2-3套血培养标本,（四）采集频率,通常情况,4、对于已进行抗生素治疗的心内膜炎患者，每日采集2套血液标本，连续3天 5、不明原因发热，于发热期内多次采血，如果24h培养为阴性结果，应继续采集2-3套或更多套血培养标本。,血循环中的细菌有“暂时性”、“持续性” 一过性的菌血症，细菌仅在外周血中持续数秒 共生菌、复数菌 提高检出率、减少漏检、判断病原,为何要多次采血,？,？,？,采血套数与检出率 J C lin Microbiol.2007;45:3546-3548,标本不
4、够时，先满足需氧瓶,（五）采集顺序：,需氧瓶,厌氧瓶,采血试管,1、 已采集的血培养标本必须立即送检， 2、 如不能立即送检，可室温放置，但不超过2小时，不可放冰箱。,（六）运送要求：,取后不能及时送， 常温放置忌冰冻。,二、尿液标本的采集,1、中段尿 2、导管尿（不能取尿袋内的尿液） 3、膀胱穿刺尿 常用：中段尿（晨尿或在膀胱内停留4h以上的尿液）,（一）尿标本种类：,1、采集：采样前，应先清洁外阴及尿道口周围，自然排尿，不间停，截留中段尿，置于无菌尿杯中，一般留取10ml左右 2、运送：常温下2小时内送达微生物室，4保存不超过24h,（二）中段尿的留取：,尿液培养要计算， 清洗外阴留中段；
5、 培养长出多种菌， 辨清污染重新送。,三、粪便标本的采集,1、腹泄、大便3次，粪便性状异常，如稀便、水样便、脓血便、血便，可伴恶心、呕吐、食欲不振、发热、腹痛及全身不适等。尽量在用药前采集 2、伤寒患者于发病2周后采集粪便 3、怀疑霍乱时立即采集粪便送检。 4、粪便涂片镜检WBC 5个/HP,（一）采集指征,1、自然排便法：自然排便后，挑取脓血、黏液 便2-3g作常规性病原菌培养；液状粪便取絮状物2- 3ml，直接放入无菌杯内送检。 2、直肠拭子法 难以获得粪便、排便困难者及幼儿用此法,（二）采集方法与送检：,直肠拭子法：将无菌拭子用无菌生理盐水湿润后插入肛门2-4cm，柔和地旋转拭子采集粪便
6、标本。一般不推荐使用拭子做腹泻病菌的培养。 3、送检：1小时内送达，志贺菌30分钟内送达 怀疑弧菌，立即送检。,大便要取脓血处， 志贺沙门需关注。,四、呼吸道标本的采集,1、咽拭子采样：患者先用清水漱口，将患者 的舌头向外轻拉，用无菌拭子越过舌根到咽后壁或悬 雍垂的后侧（肉眼可见的红肿或白膜部位）反复涂抹 数次，拭子要避免接触到口腔和舌黏膜。 2、鼻拭子采样：用无菌拭子伸入鼻腔至少深1cm在鼻内病灶边缘部分，先用力旋转拭子，停留10-15s后取出，插入无菌管中。 3、口腔溃疡：先用一个拭子拭去溃疡或创面浅表分泌物，再用第二个拭子采集溃疡边缘或底部的标本。,（一）上呼吸道标本：,咳出痰、诱导痰、
7、吸出痰、支气管肺泡灌洗液、支气管保护性毛刷、 肺穿刺组织 下面仅介绍：咳出痰 1、抗生素使用前，一般以晨痰为好。,（二）下呼吸道标本,2、告知患者在留痰前，先用冷开水或无菌生理盐水反复漱口，然后再用力咳出深处痰液（可轻拍背部），吐入无菌痰杯中送检。 3、常规细菌培养标本两小时内送检，疑为流感嗜血杆菌、肺炎链球菌时立即送检 注意：标本内切勿混入唾液及鼻咽分泌物,4、合格的痰液标本： 平均每低倍视野鳞状上皮细胞数 10个 对于不合格痰标本，检验科应在拒收系统中注明原因，并且打电话临床科室，重新采样,痰液培养杂菌多， 清晨漱口要深咯， 涂片合格继续做， 正常致病必掌握。,（一）体液标本包括：心包液、
8、关节液、胸水、腹水、羊膜液、后穹隆等穿刺液 （二）容器：可直接注入血培养瓶，以提高阳性率，可同时用需氧和厌氧瓶。 （三）标本量： 1ml，尽量不使用引流液 （四）运送：室温，15分钟内运送至实验室,五、体液标本的采集,（一）采集时间：使用抗生素前 （二）采集方法：采用腰椎穿刺术无菌采集 （三）采集量与容器：12ml，直接注入血培养 （四）运送：常温下立即送检，一般是15min内送至实验室。若培养脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等苛养菌时，应35保温送检或床旁接种。,六、脑脊液标本的采集,胸水腹水脑脊液， 放入血瓶阳性多， 条件限制无血瓶， 接种平皿亦认可。,（一）常用女性生殖道标本： 阴道后穹隆、盆
9、腔穿刺液、阴道拭子、子宫颈拭子、前庭大腺吸出液 （二）常用男性生殖道标本： 阴囊穿刺液、前列腺按摩液、水疱液、尿道分泌物 以上标本均由专科医师采集，2小时内送检,七、生殖道标本,1、结膜标本：湿拭子，滚动采集 2、眼角膜标本：在麻醉下，刮取 3、耳部拭子：外耳炎 4、穿刺液：鼓膜穿孔，穿刺抽取深部分泌物 以上标本由专科医师采集，2小时内送检，室温保存不超过24小时。,八、眼耳标本,（一）标本采集 1、开放性伤口：先以无菌生理盐水或75%乙醇冲洗擦去表面渗出物，用拭子采集深部伤口或溃疡基底部分泌物，或剪取深部病损边缘组织。 烧伤创面，多部位取样。,九、伤口、脓液及组织标本,2、封闭性脓肿：消毒脓
10、肿局部皮肤或黏膜表面后，用注射器穿刺抽取脓液3-10ml注入无菌试管内送检。 3、组织：经穿刺或手术活检获得标本，穿刺组织可放入1.5ml无菌离心管中；,4、体表伤口可接收细菌培养的条件： 鳞状上皮细胞数10个/低倍视野，并有多形核白细胞存在 （二）送检：立即送检，建议不超过1小时送达,（一）导管头： 采用无菌性技术，获取插入患者体内最远端的导管段约5cm，置于无菌容器送检；不能置于生理盐水或转运培养基中运送。 但，单独导管头培养意义不大，通常送检导管头应同时送外周血培养。,十、导管标本,（二）血液标本 对怀疑导管相关血流感染，又需保留导管的患者： 1份通过外周静脉采集 采集2份血液标本 1份通过导管采集。,早期采集、无菌观念 正确足量、 及时送检,小 结,细菌培养鉴定难， 标本留取是关键， 医护人员齐挑担， 合理用药百姓赞。,谢谢您的聆听！,
