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1、宜顺论文网 www.13LW.com摘 要奥 氮 平 主 要 适 用 于 各 种 精 神 分 裂 症 及 其 相 关 障 碍 的 急 性 期 治 疗 和 巩 固治 疗 ， 对 阳 性 症 状 （ 妄 想 、 幻 觉 、 思 维 障 碍 、 敌 意 和 猜 疑 等 )和 阴 性 症 状（ 情 感 淡 漠 、 情 感 和 社 会 退 缩 、 言 语 贫 乏 )均 有 肯 定 的 疗 效 5。 奥 氮 平 亦可 缓 解 精 神 分 裂 症 所 继 发 的 情 感 症 状 6。 对 于 治 疗 有 效 的 病 人 ， 奥 氮 平 可 用于 巩 固 治 疗 ， 保 持 其 临 床 缓 解 状 态 7。
2、奥 氮 平 杂 质 方 法 被 USP36 版 所 收载 ， 使 用 HPLC 方 法 检 测 药 物 的 有 关 杂 质 1。 药 品 作 为 一 种 特 殊 的 商 品 ，药 品 质 量 的 优 劣 性 直 接 关 系 到 用 药 者 的 健 康 与 生 命 安 全 2。 因 此 ， 必 须 对药 品 质 量 实 行 全 面 的 控 制 ， 以 确 保 人 们 用 药 的 安 全 、 合 理 和 有 效 4。 药 品确 认 的 项 目 一 般 包 括 专 属 性 ， 系 统 适 用 性 ， 重 复 性 （ 包 括 精 密 度 和 中 间 精 密度 ） ， 定 量 限 ， 检 测 限 ， 溶
3、 液 稳 定 性 ， 耐 用 性 等 。 根 据 日 常 使 用 的 要 求 ，需 要 对 实 验 中 使 用 到 的 一 些 溶 液 的 稳 定 性 进 行 考 察 3。 当 所 有 的 确 认 都 符合 接 受 标 准 的 情 况 下 ， 我 们 认 为 该 药 典 方 法 适 用 于 应 用 实 验 室 的 检 测 ， 并 用于 控 制 产 品 质 量 12。关 键 词 ： 奥 氮 平 方 法 确 认宜顺论文网 www.13LW.com目 录 一 、 所 用 试 剂 及 样 品 4二 、 方 法 描 述 4（ 一 ） 色谱条件 4（ 二 ） 溶液配制 5（ 三 ） 系统适应性及操作步骤
4、5（ 四 ） 计 算 公 式 6三 、 验 证 内 容 6（ 一 ） 专属性 6（ 二 ） 系统适应性 7（ 三 ） 精密度 71、重复性（精密度实验 1） 72、中间精密度（精密度实验 2） 83、中间精密度（精密度实验 3 ） 9（ 四 ） 定量限/检测限（LOQ/LOD） 10（ 五 ） 溶液稳定性研究 13（ 六 ） 耐用性 15四 、 结 论 17五 、 参 考 文 献 18宜顺论文网 www.13LW.com一 、 所 用 试 剂 及 样 品名 称 级 别 批 号 /含 量 （ 若 适 用 ） 来 源磷 酸 分 析 级 20121212/T20100318 国 药 集 团 化 学
5、试 剂 有 限公 司氢 氧 化 钠 分 析 级 20091110/20130111 青 山 化 工 试 剂 有 限 公 司乙 腈 色 谱 级 I669430303/IB0IF60082 MERCK分 析 级 20121030 国 药 集 团 化 学 试 剂 有 限公 司EDTA 二 钠色 谱 级 K36473818646 MERCK十 二 烷 基 硫 酸钠 色 谱 级 026FC26F0512 GFCO Chemical水 纯 化 水 每 日 新 鲜 海 正 药 业 制 备奥 氮 平 氯 甲 基氯 化 物 标 准 品 13-BHW-118-6/98% TRC奥 氮 平 有 关 物质 A 标 准
6、 品 F0H156/GOK232 USP奥 氮 平 有 关 物质 B 标 准 品 F0H160/GOK318 USP标 准 品 1301/99.2% 海 正 药 业 标 定标 准 品 1001/99.8% 海 正 药 业 标 定奥 氮 平样 品100801-B、 100802-B、 100803-B、 090921海 正 药 业 生 产METTLER XP205 已 校 正电 子 分 析 天 平METTLER XP6 已 校 正Agilent 1260/1100 已 校 正Shimadzu LC-20A/LC-2010C 已 校 正高 效 液 相 色 谱仪Waters 2695 已 校 正pH
7、 计 METTLER S20 已 校 正色 谱 柱 信 息 Agilent ZORBAX SB-C8 4.6250mm 5mPN： 880975-906 二 、 方 法 描 述 1（ 一 ） 色谱条件宜顺论文网 www.13LW.com缓冲液：取 13g 十二烷基硫酸钠溶于 1500ml 水中，加入 5ml 磷酸，用氢氧化钠调节 pH 至 2.5。溶剂：取约 55mgEDTA 二钠溶于 1500ml 缓冲液中，该溶液与乙腈为 3：2。流动相 A：缓冲液：乙腈=52：48，过滤脱气。流动相 B：乙腈：缓冲液=70：30，过滤脱气。流动相：梯度洗脱。时间（min） 流动相 A (%，V/V) 流动
8、相 B (%，V/V)0 100 010 100 020 0 10025 0 10027 100 035 100 0色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C8,4.6250mm,5m流速：1.5ml/min检测波长：220nm进样量：20l柱温：35进样室温度：5（ 二 ） 溶液配制 2分离度溶液：取适量的奥氮平标准品，奥氮平 USP 相关物质 A 标准品、奥氮平USP 相关物质 B 标准品溶于稀释液，得到奥氮平的浓度约为 20g/ml，相关物质 A 与相关物质 B 的浓度分别为 2g/ml。标准溶液：准确称取适量的奥氮平标准品，溶于稀释液，配成的浓度约为0.002mg/ml（例如 20
9、mg100ml，移取 1ml100ml） 。样品溶液：准确称取 20mg 的奥氮品样品于 50ml 的容量瓶中，用稀释剂溶解并稀释到刻度，摇匀。（ 三 ） 系统适应性及操作步骤进样溶剂，记录色谱图，应无干扰峰，取分离度溶液进样，记录峰响应，根据其RRT（见下表 1）鉴别各峰，奥氮平有关物质 A 与奥氮平的分离度应不小于 3.0，拖尾因子（以奥氮平峰计）应不大于 1.5，连续进样标准溶液 6 针，奥氮平峰面积的 RSD 应不大于 2.0%。系统符合后进样品溶液。表 1峰鉴别 相对保留时间 (RRT) 相对响应因子 (RRF) 限度(%)奥氮平有关物质 B 0.3 2.3 0.10宜顺论文网 ww
10、w.13LW.com奥氮平有关物质 A 0.8 2.3 0.10奥氮平 1.0 / /奥氮平氯甲基氯化物 1.1 1.0 0.15单个非特定杂质 / / 0.10总杂质 / / 0.4（ 四 ） 按下式计算奥氮平有关物质 B、奥氮平有关物质 A、奥氮平氯甲基氯化物、单个非特定杂质、总杂质的含量：（PC s/Cu） （r i/rs ） （1/F）F 为各杂质的相对响应因子（RRF） ，见上表 1；Cu，C s分别为样品溶液与对照溶液中的配制浓度（mg/ml） ；rs为对照溶液所对应的主峰响应值；ri为样品溶液所对应的各杂质响应值；P 为对照品的含量，%。三 、 验 证 内 容（ 一 ） 专属性
11、专属性是指在其他组分（杂质、降解产物、辅料等）可能存在下，采用的分析方法能准确地测出被测组分的特性。现通过对奥氮平及各个已知杂质进行色谱定位分析来进行专属性研究 10 11。分离度溶液：准确称取奥氮平标准品 20.007mg，有关物质 A 标准品 2.011mg，有关物质 B 标准品 2.025mg，置于同一 10ml 容量瓶中，加溶剂稀释至刻度，准确移取 1.0ml 至 100ml 容量瓶中，用溶剂稀释至刻度。奥氮平氯甲基氯化物储备液：准确称取奥氮平氯甲基氯化物 2.16mg 至 20ml 容量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度，混匀。奥氮平氯甲基氯化物溶液：准确移取奥氮平氯甲基氯化物储备液 1.
12、0ml 至 100ml容量瓶中，用溶剂稀释至刻度。进样溶剂、分离度溶液、奥氮平氯甲基氯化物溶液，记录峰响应值。实验结果见表 2。表 2.专属性结果各峰分离情况峰名称 RT（min） RRT USP 参考 RRT奥氮平有关物质 B 3.821 0.2 0.3奥氮平有关物质 A 11.035 0.6 0.8奥氮平 18.573 1.0 1.0奥氮平氯甲基氯化物 19.471 1.1 1.1由上表数据可知，各已知杂质的 RRT 与 USP 中参考值基本一致，各杂质均能够分宜顺论文网 www.13LW.com离开，溶剂峰（2013050900.lcd）无干扰，说明此有关物质方法专属性良好。（ 二 ）
13、系统适应性 对仪器分析方法在进行验证时，将分析设备、电子仪器、实验操作、测试样品等一系列作为完整系统进行评估，需要进行系统适应性考察 10 11。分离度溶液配制同 4.1“专属性“项下标准溶液：精密称取奥氮平标准品 20.31mg 分别至 50ml 容量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度，精密移取上述溶液 1.0ml 至 200ml 容量瓶中，用溶剂稀释至刻度。进样溶剂（流动相） 、系统适应性溶液、5 针标准溶液，记录峰响应值。实验结果见表 3。表 3 系统适应性结果序号 峰面积 图谱编号1st 69.58971 10052603.D2nd 69.58934 10052604.D3rd 69.738
14、78 10052605.D4th 69.60703 10052606.D5th 69.61736 10052607.D6th 69.74336 10052608.D平均值 69.64759667 /RSD(%) 0.11 /分离度（R） 4.2拖尾因子（T） 1.1 10052601.D接受标准 R2.0 T2 RSD2.0%由上表数据可知，各系统适应性参数均满足要求，系统适应性良好。（ 三 ） 精密度精密度是指对均一样品重复取样检测每个检测结果间的接近程度，通过变异系数（相对标准偏差）来考察 10。1、重复性（精密度实验 1）重复性指短时间内同一分析人员使用同一仪器进行重复检测同一个样品。由实验员 I 在 Agilent 上检测六份样品标准溶液，分离度溶液，同 4.2“系统适应性”项下溶液。样品原样溶液：精密称取奥氮平样品（090921）20.71mg、20.33mg、20.62mg、20.25mg、20.37mg、20.09mg 分别至 50ml 容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度。待系
