《（全国通用）2018版高考生物一轮复习 生物技术实践 第39讲 微生物的培养及应用课件 新人教版选修1》由会员分享，可在线阅读，更多相关《（全国通用）2018版高考生物一轮复习 生物技术实践 第39讲 微生物的培养及应用课件 新人教版选修1（35页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第39讲 微生物的培养及应用,2017备考最新考纲,1.微生物的分离和培养。2.培养基对微生物的选择作用。,考点一 微生物的实验室培养,自主梳理,1.培养基,(1)概念：人们按照微生物对 的不同需求,配制出供其 的营养基质。 (2)营养组成：一般都含有 和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对 、氧气以及 的要求。,营养物质,生长繁殖,水、碳源、氮源,pH,特殊营养物质,固体,液体,2.无菌技术,(1)关键：防止 的入侵。 (2)不同对象的无菌操作方法连一连,外来杂菌,3.大肠杆菌的纯化培养,(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,(2)纯化大肠杆菌的方法 纯化培养原理：想方设法在培养基上得到 的肉眼
2、可见的 ，即可获得较纯的菌种。 纯化大肠杆菌的关键步骤： 。 常用的微生物接种方法有两种 a.平板划线法：是通过 在琼脂固体培养基表面 的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的 表面。,由一个细胞繁,殖而来,称量,灭菌,倒平板,菌落,接种,接种环,连续划线,b. 法：是将菌液进行一系列的 ，然后将 的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 (3)菌种的保存方法 对于频繁使用的菌种，可以采用 的方法。 对于需要长期保存的菌种，可以采用 的方法。,稀释涂布平板,梯度稀释,不同稀释度,临时保藏,甘油管藏,跟进题组,1.微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行
3、无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作中错误的是( ),煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 接种操作要在酒精灯火焰附近进行 无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒 家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 培养基要进行高压蒸汽灭菌 加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌 A. B. C. D.,解析 无菌操作包括消毒和灭菌。需进行消毒处理的有植物的外植体及操作人员的双手等，需进行灭菌的有器皿、培养基、添加剂(指示剂或染色剂)等。煮沸可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢，属于消毒；为防止空气中杂菌污染，接种时要在酒精灯火焰附近进行；家庭制作葡萄酒时所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌，故不能灭
4、菌；培养基常进行高压蒸汽灭菌。故操作错误。 答案 D,2.下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题。,(1)图甲是利用_法进行微生物接种，图乙是利用_法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是_和_；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是_和酒精消毒。 (2)接种操作为什么一定要在火焰附近进行？ _。,(3)下图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解，其接种方法是_(填“图甲”或“图乙”)。,答案 (1)平板划线 稀释涂布平板 接种环 涂布器 灼烧灭菌 (2)火焰附近存在着无菌区域 (3)图乙,1.实验室常用的消毒和灭菌的方法,2.两种纯化细菌的方法的比较,3.平板划线操
5、作3个易错点 (1)灼烧接种环之后，要冷却后再进行取种，以免温度太高杀死菌种 (2)划线时最后一区域不要与第一区域相连 (3)划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破,考点二 微生物的筛选和计数,自主梳理,1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数,脲酶,尿素,直接计数,稀释涂布平板法,系列稀释,计数,2.分解纤维素的微生物的分离,(1)纤维素酶 组成：纤维素酶是一种 ，一般认为它至少包括三种组分，即 。 作用,复合酶,C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶,纤维二糖,葡萄糖,(2)纤维素分解菌的筛选 原理,红色复合物,透明圈,筛选方法： 染色法，即通过是否产生 来筛选纤维素分解菌。 培养基：以 为唯一碳源
6、的选择培养基。 实验流程 土壤取样：富含 的环境 选择培养：用 培养，以增加纤维素分解菌的浓度 ：制备系列稀释液 涂布平板：将样品涂布到 的培养基上 挑选产生 的菌落,刚果红,透明圈,纤维素,纤维素,选择培养基,梯度稀释,鉴别纤维素分解菌,透明圈,3.判断正误,(1)选择培养基可以鉴定某种微生物的种类( ) (2)从物理性状的角度看，选择培养基多属于固体培养基( ) (3)对细菌进行计数只能采用稀释涂布平板法，而不能用平板划线法( ) (4)筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中，尿素是唯一的氮源( ) (5)分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使得培养基的酸碱度降低( ) (6)纤
7、维素是构成植物细胞壁的主要成分在纤维素酶的作用下，纤维素可以水解成葡萄糖( ) 答案 (1) (2) (3) (4) (5) (6),跟进题组,1.苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，为土壤样品。请回答下列问题：,(1)中培养目的菌株的选择培养基中应加入_作为碳源，中不同浓度碳源的培养基_(A.影响；B.不影响)细菌的数量，如果要测定中活细菌数量，常采用_法。 (2)为对照，微生物在中不生长，在中生长，与培养基的主要区别在于_； 使用_法
8、可以在上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的原因是_ _。 (3)实验过程中如何防止其他微生物的污染？ _。,答案 (1)苯酚 A 稀释涂布平板 (2)的培养基没有加入苯酚作为碳源，的培养基加入苯酚作为碳源 稀释涂布平板法或平板划线 防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基 (3)培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程无菌操作,2.(2014新课标全国卷)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题。,(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将_分解成_。 (2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成
9、_色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的_。,(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表)：,注：“”表示有，“”表示无。 据表判断，培养基甲_(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_；培养基乙_(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_。,答案 (1)纤维二糖 葡萄糖 (2)红 透明圈 (3)不能 液体培养基不能用于分离单菌落 不能 培养基中没有纤维素，不会形成CR纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌,1.选择培养基与鉴别培养基的比较
10、,2.选择培养基四种常见制备方法或实例,3.分离纤维素分解菌所用的两种培养基比较 分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基，再用鉴别培养基。 (1)选择培养基为液体培养基，以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长，而其他绝大多数微生物不能正常生长；因培养基中无凝固剂，为液体培养基，利用液体培养基能使营养成分被充分消耗，以增加纤维素分解菌的浓度。 (2)鉴别培养基含琼脂，为固体培养基，细菌可在培养基上形成肉眼可见的菌落。刚果红染色法应用的就是鉴别培养基。,易错易混 防范清零,易错清零,易错点1 误认为所有微生物培养基中均需加入“生长因子”,点拨 碳源、氮源、水分、无机盐、生长因子是微生物生长必需
11、的五大营养成分，但大多数培养基中都含碳源、氮源水分、无机盐四类物质，可能不需额外添加“生长因子(如维生素)”，这是因为许多微生物可自行合成这些生长因子，而对那些合成能力有限或不能合成生长因子的微生物(如乳酸菌)，则需在培养基中添加诸如维生素等生长因子,易错点2 混淆两种“对照组”与“重复组”,点拨 (1)两种对照组作用比较 判断培养基中“是否有杂菌污染”，需将未接种的培养基同时进行培养。 判断选择培养基“是否具有筛选作用”，需设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。 (2)重复组的设置及作用 为排除偶然因素对实验结果的干扰，在每一稀释度下宜设置3个平板
12、作重复组，选择菌落数均在30300且数目相差不大的三个平板，用“平均值”代入计数公式予以计算菌落数,易错点3 不明确每次划线操作中“灼烧接种环”的目的或误认为划线结束后“不必灼烧接种环”,点拨 平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同 第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。 每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。 划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。,易错点4 不知道菌落计数比实际值“偏高”还是“偏低”,点拨 稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目“低”。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，
13、平板上观察到的只是一个菌落。而显微计数法中由于不能区分死菌与活菌，故所得数值可能“偏高”。,规范答题,多环芳烃是具有致癌、致畸、致突变作用的全球性污染物，是煤、石油、有机高分子化合物等有机物不完全燃烧时产生的挥发性碳氢化合物，包括萘、蒽、菲、芘等150余种化合物。某研究小组从一污水处理厂的污泥中筛选到一株可降解萘、蒽的细菌，命名为BDP01。,(3)下面的图1和图2为该研究小组进行的其中两个实验的实验结果图，菌株的生长量以分光光度计于600 nm处测定的光吸收值(OD600)表示。,1.找错纠错,错答序号：_ 正答： 错答序号：_ 正答： 错答序号：_ 正答：_ 错答序号：_ 正答： 错答序号：_ 正答：_,选择培养基,上次划线末端,需要,增加溶液中的溶氧量,小,2.错因分析,序号错将按“功能”划分视作按“物理性质”划分 序号误认为每次划线均需从第一次末端，实际应为从每次末端划线，以起到“稀释”作用 序号误认为最后划线结束不必灭菌，为防止污染，划线结束，仍需灭菌 序号考虑不周全，未想到振荡可增加溶氧量 序号未理解OD600值与生长量关系,
