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1、2019年高考考纲解读1.近五年的考题中，对微生物的分离和培养的考查尤为突出，侧重考查微生物的分离纯化技术，对传统发酵技术的发酵原理、制作流程等的考查频度也在不断提高。对植物组织培养、胡萝卜素的提取仅进行了两次考查，前者侧重考查营养条件及有关植物激素的作用等；后者侧重考查胡萝卜素的萃取剂的选择等。2常借助某一特定的微生物的分离和培养考查微生物的营养、接种方法等；对于生物技术在食品加工中的应用，常借助发酵实例考查，填充内容多为教材中一些结论性语句等。植物组织培养技术、植物有效成分的提取的考查也多以教材基础知识为主。3备考时，从以下5个方面来把握：(1)掌握大肠杆菌的纯化原理、主要方法及菌种的保存
2、方法。(2)认真分析教材中两个微生物分离与计数的实例，并掌握微生物的筛选及技术方法。(3)利用比较法归纳总结并掌握常见传统发酵技术的原理、流程及影响因素等。(4)列表比较玫瑰精油、橘皮精油及胡萝卜素的提取方法、原理、实验步骤等异同。【网络构建】【重点、难点剖析】一、微生物的培养与应用1汇总微生物的基本技术(1)制备培养基：计算称量溶化灭菌倒平板。(2)无菌技术：主要指消毒和灭菌。(3)倒平板操作：待培养基冷却至50_左右时，在酒精灯火焰旁倒平板。(4)平板划线操作：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。(5)稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列梯度
3、稀释后涂布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散到培养基的表面，从而在培养基表面形成单个菌落。如图：2完善下面某种微生物的分离与计数(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。测定微生物数量的常用方法：活菌计数法和显微镜直接计数。过程：土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察。(2)分解纤维素的微生物的分离实验原理即：可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。流程：土壤取样选择培养梯度稀释涂布平板挑选菌落。(3)鉴定方法鉴定分解尿素的细菌含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基细菌指示剂变红，则该菌能分解尿素鉴定纤维素分解菌【误区归纳】1自养微生物与异养微生
4、物所需的营养物质不同自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物，而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物，因此可根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。含氮无机物不但能给自养微生物提供氮源，也能作为能源物质，提供能量，如NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源。2平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。3选择培养基的选择方法在培养基中加入某种化学物质。例如，加入青霉素可以分离出
5、酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在主要营养成分完整的基础上加入。改变培养基中的营养成分。例如缺乏氮源时可以分离出固氮微生物；石油作为唯一碳源时，可以分离出消除石油污染的微生物。改变微生物的培养条件。例如，将培养基放在高温环境下培养，可以得到耐高温的微生物。二、应用生物技术进行食品加工1腐乳制作注意事项(1)影响腐乳品质的条件：水、盐、酒、温度、发酵时间等。水的控制：含水量约70%，用含水量过高的豆腐制腐乳，不易成形。盐的控制：盐浓度过高，会影响腐乳的口味；浓度过低，豆腐易腐败变质。酒的控制：酒精含量应控制在12%左右。酒精含量过高，使腐乳成熟期延长；酒精含量过
6、低，杂菌繁殖快，豆腐易腐败。温度的控制：温度1518 适合毛霉生长。发酵时间宜控制在6个月左右。(2)防止杂菌污染用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。装瓶时，操作要迅速小心。加入卤汤后，要用胶条将瓶口密封。封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。2果酒和果醋制作的注意事项(1)材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先冲洗后去枝梗，以防葡萄汁流失及污染。(2)防止发酵液被污染榨汁机要清洗干净并晾干。发酵瓶要洗净并用70%酒精消毒。装入葡萄汁后要封闭充气口。(3)果酒发酵条件的控制：葡萄汁装入发酵瓶时，要留约空间，目的是先让酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖，耗尽O2后再进行酒精发
7、酵；防止发酵过程中产生的CO2造成发酵液的溢出。严格控制温度：1825 利于酒精发酵；3035 利于醋酸发酵。充气：酒精发酵为无氧发酵，需封闭充气口；醋酸发酵为有氧发酵，需适时通过充气口充气。3判断发酵与无氧呼吸的方法(1)从概念上判断：发酵是利用微生物在有氧或无氧条件下的生命活动来制备微生物菌体及各种不同代谢产物的过程。无氧呼吸是生物在无氧条件下的一种呼吸方式。(2)从分类上判断：发酵据产物不同可分为：酒精发酵(无氧呼吸)、乳酸发酵(无氧呼吸)和抗生素发酵等；据对氧的需求不同可分为：厌氧发酵(无氧呼吸)和需氧发酵；据培养基的物理状态不同可分为：固体发酵和液体发酵。 三、植物有效成分的提取1比
8、较并填充下表中植物芳香油的三种提取方法提取方法实验原理方法步骤适用范围水蒸气蒸馏利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来水蒸气蒸馏分离油层除水过滤适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油压榨法通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油石灰水浸泡、漂洗压榨、过滤、静置再次过滤适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料中芳香油的提取有机溶剂萃取使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后就可获得芳香油粉碎、干燥萃取、过滤浓缩适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分溶解在有机溶剂中【特别提醒】(1)三种提取方法的选用是由植物原料的特点决定的，三种方法的原理和操作过程不同，但都需过滤。(2)植物精油的提取实验为粗提取，可
9、进一步提纯。2写出下列实验流程(1)玫瑰精油的提取实验流程鲜玫瑰花瓣清水(14)水蒸气蒸馏油水混合物分离油层除水玫瑰精油。(2)橘皮精油的提取实验流程石灰水浸泡橘皮漂洗压榨过滤静置再次过滤橘皮精油。(3)胡萝卜素的提取实验流程胡萝卜粉碎干燥萃取过滤浓缩胡萝卜素。四、植物组织培养技术1用流程图的形式写出植物组织培养的过程离体的植物组织或细胞愈伤组织根、芽等(试管苗)完整植物体。2植物组织培养与花药培养技术的比较植物组织培养花药培养技术理论依据细胞的全能性细胞的全能性基本过程脱分化再分化脱分化再分化外植体细胞类型体细胞生殖细胞操作流程制备MS固体培养基外植体消毒接种培养移栽栽培选材消毒接种、培养筛
10、选和诱导移栽栽培选育培养结果正常植株单倍体植株可育性可育高度不育，秋水仙素处理，染色体加倍后可育五、酶的研究和应用1探寻在酶的实验探究中应注意的问题(1)实验设计时要遵循单一变量和对照两大原则，严格控制无关变量。(2)探究不同温度(或pH)对酶活性的影响时，温度(或pH)作为自变量，通常通过设置合理的梯度来确定最适值。最适值是通过比较相同时间内获得的产量或效果来确定的。(3)探究最适温度时，pH为无关变量；探究最适pH时，温度最好为最适温度。(4)探究果胶酶的最适用量时，所测出的最适用量是指在本实验的温度、pH等条件下测出的，因而果胶酶的最适用量应标明温度和pH。(5)探讨加酶洗衣粉的最适温度
11、要根据生活中的实际情况，合理设置温度梯度。(6)在使用加酶洗衣粉时不但要考虑最佳洗涤效果条件，还要考虑到酶的专一性和洗涤成本的问题。2比较下表中直接使用酶、固定化酶和固定化细胞的差异直接使用酶固定化酶固定化细胞酶的种类一种或几种一种一系列酶常用载体氧化铝、高岭土、硅胶、二氧化钛、硅藻土等明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等常用方法包埋法、化学结合法、物理吸附法包埋法营养物质基础不需要不需要需要化学反应一种或几种一种一系列底物各种物质各种物质能进入载体的小分子物质优点效率高、耗能低、无污染可回收，反复使用成本低、易操作，可催化一系列化学反应缺点环境因素影响大，酶难以回收利用不利于催化
12、一系列化学反应反应物与细胞内的酶不容易接触，催化效率下降3.固定化技术的比较方法定义适用范围模型包埋法将酶包裹在多孔的载体中。常见的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等多用于细胞的固定化学结合法将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上多用于 酶的固定 物理 吸附法将酶吸附到固体吸附剂的表面。固体吸附剂多为活性炭、多孔玻璃等 六、DNA和蛋白质技术1DNA的粗提取和鉴定方法(1)材料的选取：选用DNA含量相对较高的生物组织。(2)破碎细胞动物的红细胞，吸水破裂。植物细胞：加入洗涤剂、食盐后研磨。(3)除去杂质的方法方法一：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同，通过
13、调节NaCl溶液的浓度除去溶于和不溶于NaCl溶液中的杂质。方法二：利用DNA对酶的耐受性，直接在滤液中加入嫩肉粉，反应1015 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质，而不会破坏DNA。方法三：利用DNA对高温的耐受性，将滤液放在6075 的恒温水浴箱中保温1015 min，使蛋白质变性沉淀而DNA分子还未变性。(4)DNA的析出：向处理后的滤液中加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液(体积分数为95%)，静置23 min，溶液中会出现白色丝状物，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物。(5)DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。2比较下表中细胞内DNA复制与PCR技术的
14、不同项目DNA复制PCR技术场所细胞内细胞外能量ATP提供能量不需ATP提供能量酶解旋酶、DNA聚合酶耐高温的TaqDNA聚合酶是否有转录伴有转录，产生引物无转录，需加入两种引物引物RNADNA或RNA温度体内温和条件高温特点边解旋边复制，半保留复制体外迅速扩增循环次数受生物体自身控制30多次3.蛋白质的提取和分离步骤操作样品处理通过红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液等操作收集到血红蛋白溶液粗分离通过透析法去除血红蛋白溶液中相对分子质量较小的杂质纯化通过凝胶色谱法分离相对分子质量不同的蛋白质纯度鉴定SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳判断纯化的蛋白质是否达到要求【特别提醒】(1)凝胶色谱柱的直径大小不影响分离效果，但直径过大造成洗脱液体积大，样品稀释度大；凝胶色谱柱的高度与分离度有关。(2)红细胞洗涤过程中，洗涤三次后，上清液仍有黄色，可增加洗涤次数，否则无法除去血浆蛋白；离心时转速要低，时间要短，否则白细胞等会一同沉淀，达不到分离效果。(3)血红蛋白释放过程中，蒸馏水的作用是涨破红细胞，甲苯
