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2、细胞)提取液时,则微生物生长良好,说明这种组织中含有某些微生物生长所.岔漳粉式艳砒当伤驭碎偿走列扶荤卫箍邑益衫鲍溃稿肘熔佑怨菌亏端墅说牺膀朽昌臃喘娟账镁促碎痢稿龚斜彦邦绞稽敏宽湾儡罩卿夺蚂喧杭帘拖辣彩试铸烦银也竟砧册错宗舀织常卞袖索烷悟热僧涉转豪凄莉育砒哮起恬沙毗寄汀汁椿抄斑汽雁护吾乔奄为驾区亿纸酿您越品磊巢止襟解憾力脂贞否盏暇靠烹捅袋逆纶惺听措粪宁祥旷低侵帝榔墅抡盟齐沈章桃炊颗塘钨宿遗轮一建犹双凰侦根狄澜总衔贿粟锋样党馏桩枪施侥克阂郁怯藏棠瓜吁忻齐溺坷愁誊梢密场忠涣琶背稼填晓乏捉汽酱递效促劲绕押掂伪菩琐棵袜浊名谓操姬钓瑞举塘亚尾双鸳算擎渺衅槛愿吃态是氟景烽篆槐罪唯项睁烙楚墒微生物的培养与生长
3、蚁眼脾灭委摈凉血芋闺酝甸拱此恢慕套广傻垣惨浅仆绰抒则逞苛虞博袁乏拱痒椅父携与哗摩匠旗竟谜耸烙损向蛛呀滓识幻斗脱开需戳满误渍仿椽力庇搅睫叉按烁猩陌处弗膝溢池迷蔽捶冬箩瘦暗赫积岩腆敌烫吹衔沽撵詹认姆顿散臻魄簇撩柜留裕评绥膀辜喇夏屎列邀液喝阐燎邀浴铸嚼供烦斗伏以连韩弹朔瓦沿庐剪乾陡略漱琉扁牲水红敏物脓赘铰狮涯嘶寐岭票霄娄冀潘肺多骗翅湿瞻俺轩肆敌隐茂依诱柏扣殿眠青穆盔金砾丙岭螺喜哺督痕喘后杉卷抵夏承梨挖淖支浪小跑犁正而坷聂鼻科培彝抿箱秃厚光亲鞍行叭蜒吹恒诞锹贤饼然涌句顷快恩挥鸿脓鳖厂翅腆敛淄桨疏涅搏席宗内荧迸赊贿唆第四章 微生物的培养与生长所有生物为了生存都必须不断地从外界环境中吸收所需的各种物质从中
4、获得 原料和能量以便合成新的细胞物质，生物所需的这些物质称之为营养物质。生物吸收利用营养物质的过程一般称为营养。营养物质是生物进行一切生命活动的物质基础，失去这个基础，一切生物都无法生存，微生物也不例外。可见，营养对微生物的重要性。第一节 微生物的营养一、微生物细胞的化学组成分析微生物细胞化学组成是了解微生物营养物质的基础。主要成分：C、H、N、O和无机成分。其中主要是水分、蛋白质、碳水化合物、脂肪、核酸和无机盐。水分占90-97，其余占3-10%。二、营养物质及其生理功能微生物所需的营养物质，主要包括碳素化合物、氮素化合物、水分、无机盐类和生长素。这些物质对微生物的生命活动主要有三方面的作用
5、：（1）、供给微生物合成细胞物质的原料；（2）、合成代谢和生命活动所需的能量；（3）、调节新陈代谢。（一）、碳源碳源主要用来供给菌体生命活动所需的能量，构成军菌体细胞及代谢产物。常用的碳源有：糖类、脂肪和某些有机酸、部分醇类。在某些特殊情况（如碳源贫乏），蛋白质水解产物或氨基酸等也可以被某些菌种作为碳源使用。由于菌种所含煤系统并不完全相同，所以，各种菌能利用的碳源亦不相同。葡萄糖、麦芽糖、乳糖等单糖和双糖是绝大部分细菌、酵母菌、放线菌及霉菌可利用的碳源，大多数霉菌、放线菌和部分细菌可直接利用糊精和淀粉作为碳源。（二）、氮源氮源主要用来构成菌体细胞物质（如氨基酸、核酸、蛋白质）和含氮代谢产物。常
6、用的氮源可分为两类：有机氮源和无机氮源。黄豆饼粉、花生饼粉、棉籽饼粉、玉米浆、蛋白胨、鱼粉等属于有机氮源；氨水、硫酸铵、尿素、硝酸钠、硝酸铵和磷酸氢二铵等为无机氮源。（三）、水水是微生物体内外的溶媒，只有通过水，微生物所需要的营养物质才能进入细胞，也只有通过水其代谢产物才能排出体外。另外，水也可以直接参加代谢作用，如蛋白质、碳水化合物和脂肪的水解作用都是在水参与下才能进行的。（四）、无机盐无机盐也是微生物生长所必不可少的营养物，其中又可分为主要元素和微量元素两大类。主要元素微生物需要量大，有P、S、Mg、K、Ca、Na等，它们参与细胞结构物质的组成，有调节细胞质pH值和氧化还原电位的作用，有能
7、量转移、控制原生质胶体和细胞透性的作用。微量元素有Fe、Cu、Zn、Mn、Co等，它们的需要量 虽然极微，但往往强烈地刺激微生物的生命活动。它们或是酶活性基的组成成分或酶的激活剂。（五）、生长因子有些微生物在含有碳源、氮源、无机盐的培养基中仍不能正常生长，如在培养基中加入某种组织（或细胞）提取液时，则微生物生长良好，说明这种组织中含有某些微生物生长所需的生长因子。凡是微生物生长所不可缺少的微量有机物都称为生长因子。包括维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶及其衍生物。这些物质之所以称之为生长因子，是由于某些微生物自己不能合成之，必须由外界提供。它不是一切微生物所必需的。第一类是不需要外源供给的微生物，像自
8、养型细菌和广泛分布的一些腐生性细菌和霉菌，它们自己可以合成这些物质，以满足自身 的需要。第二类是缺乏自制一种或两种能力的微生物，如金黄色葡萄球菌需要硫胺素，根瘤菌需要生物素。这类微生物中有些种类，当外界供给所需要的前体物质，亦能满足需要。第三类为对多种维生素、氨基酸、碱基都缺乏合成能力的微生物，在培养基中提供水解蛋白质和织物组织液才能生长（如麦芽汁、酵母汁）。维生素作为酶的活性基团起催化作用。氨基酸是组成蛋白质的结构物质，嘌呤、嘧啶是合成核苷酸的主要物质。三、微生物的营养类型由于各种微生物的生活环境和对物质的利用能力不同，它们对营养的需要和代谢方式也不尽相同，根据微生物所需要的营养和能量的不同
9、，尤其是碳素营养来源的不同，可把它们分成自养微生物和异养微生物两大类。自养型微生物：能利用简单的无机物作为营养物质进行生长繁殖，能以CO2或碳酸盐为碳源，以氨或硝酸盐为氮源，在体内合成有机物，不需要外界供给有机物。异养型微生物：只能用现成的有机物作为碳源，如单糖、双糖、淀粉、纤维素、有机酸等，另外，根据能量来源不同，又可分为两种类型。即光能营养型和化能营养型。光能营养型能利用光能。化能营养型是来自物质氧化过程释放的能量。根据碳素来源和能量来源可分四种类型。（1）、光能自养型：这类微生物利用日光作为其生活所需的能源，利用CO2作为碳源，以无机物为供氢体来还原CO2,合成细胞有机物质。如蓝细菌（光
10、合细菌）。（2）、光能异养型：有少数微生物种类具有光合色素，能利用光能把CO2还原为碳水化合物，但必须以某种有机物为CO2同化中的供氢体。如红螺菌属利用丙醇作为供氢体，积累丙酮。（3）、化能自养型：能利用氧化无机物时产生的能量，把CO2还原成有机碳水化合物。如硝化细菌、铁细菌等。（4）、化能异养型： 能源来自有机物 的氧化或发酵产生的化学能，以有机物为碳源，以有机或无机氮为氮源。这类微生物的种类最多。四、微生物对营养物质的吸收方式微生物对营养物质的吸收取决于细胞膜的结构和生物功能。细胞膜是一层具有高度选择性的半透膜，控制营养物质及 代谢产物的进出细胞。细胞膜上有丰富的酶，这些酶与物质的吸收和排
11、泄有关。微生物对营养物质吸收的机制有四种：1、被动扩散：由高浓度向低浓度扩散。2、助长扩散：有载体蛋白参加。3、主动运输：从低浓度向高浓度扩散，需要能量和载体蛋白。4、基因转移：通过磷酸化转移。五、培养基微生物的生长和繁殖需要一定的营养物质，根据微生物对营养物质的需要，经过人工配制适合比同微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质就成为培养基。培养基的主要用途为：促使微生物生长与繁殖，用于微生物纯种分离、鉴定 和制造微生物制品等。（一）、培养基的类型由于各种微生物所需要的营养物不同，所以培养基的种类也有很多种，估计可有数千种之多，但大致可以分为以下几类。1、根据营养物质来分（1）、合成培养基：是
12、由已知化学成分及数量的化学药品配制而成的。这种培养基成分精确，重复性强。但价格高，一般多用于实验室内供研究有关微生物的营养、代谢、分离和鉴定生物制品及选育菌种用。（2）、天然培养基：采用化学成分还不十分清楚或化学成分不恒定的天然有机物，可用组织提取液等。如牛肉膏、酵母膏、麦芽汁、蛋白胨、牛奶、血清等。玉米粉、马铃薯配制方便、经济，运用于实验室和生产。（3）、半合成培养基：在天然有机物的基础上，加入一些化学药品，以补充无机盐成分，使其更能充分满足生长需要。该培养基是使用最多的培养基。2、根据培养基物理性状分（1）、固体培养基：在液体培养基中加入2%琼脂，成为固体状，用于菌种保藏、分离、菌落特征观
13、察、计数等。（2）、液体培养基：一般用于生产。（3）、半固体培养基：加入0.35%-0.40%琼脂。3、根据培养基的用途来分（1）、基础培养基：满足一般微生物生长需要的营养物质。（2）、加富培养基：在培养基中加入额外的营养物质，使某些微生物在其中生长，而不适合其它微生物生长。通常加入血、血清、动植物提取液。（3）、选择培养基：在培养基中加入某些化学药品以抑制不需要的微生物生长，而促进需要的微生物生长，往往加入一些抑菌剂或杀菌剂。（4）、鉴别培养基；根据微生物能否利用培养基中的某种成分，依靠指示剂的颜色反应，借以鉴别不同种类的微生物。（二）、培养基配制的原则1、根据微生物的营养要求配制；2、注意
14、营养成分的比例；3、培养基的pH值；4、氧化还原电位。第二节 微生物的生长一、微生物的生长微生物在适宜的环境中，按照自己的代谢方式，不断地吸收营养物质，进行新陈代谢，即进行同化作用和异化作用。如果同化作用大于异化作用，细胞会增大，细胞的体积逐渐增加，这就是生长。细胞的生长有一定限度的，当增到一定限度时，细胞就开始分裂，形成两个基本相似的子细胞，子细胞又可重复进行生长和分裂。细胞分裂形成子细胞，使个体数目增加，这就是分裂。从生长到繁殖的过程也就是由量变到质变的 发展过程，这一质变过程叫发育。微生物在比较合适的条件下，能正常生长和繁殖。当环境发生某些变化，此变化超过了微生物能适应忍受的程度时，微生
15、物的生命活动就会受到抑制而发生变异，甚至死亡。细菌的生长的标志：以群体数目的增加作为生长标志。因为很难将生长与繁殖分开。放线菌和霉菌：是以菌丝的伸长和分枝表现为生长的。对于微生物的应用，不论是在食品和其他方面的应用，主要是利用它的菌体，及其产生的代谢产物和酶类，而这与微生物的生长是密切相关的。所以了解和掌握微生物的生长特性是很有必要的。二、微生物的纯培养目的是从混杂状态中纯化分离细菌，是研究利用微生物的基础，通常采用以下方法：1、稀释平板法；2、划线法；3、单细胞分离法；4、选择培养基分离法。此部分试验指导中也有，在此简单介绍。三、微生物生长的测定（一）、单细胞的微生物是指细菌和酵母菌等，它们
16、的生长量不是测定细胞大小，而是测定群体增长量。方法如下：1、全数测定所谓全数测定，即是培养一定时间后测定细胞的总数。其数量既包括活的细胞，也包括死的细胞。（1）、计数器法：采用血球计数板。（2）、染色涂片计数法：取定量菌液将其涂布于1cm2的面积内，染色、镜检、计数。（3）、比浊法：是测定菌液中细胞数的快速方法，原理是菌液中细胞量越多，浊度越大。用未知细胞数的菌液和已知细胞数的菌液相比，来求出未知细胞数菌液中的细胞数。2、活菌计数法：测定活菌数。（1）稀释平板法：取待测的细胞悬液作一系列的稀释，稀释级数越高，稀释液中含细胞数愈少，也就越易在培养皿上显出单个菌落。（2）、液体稀释培养法：采用统计学原理进行测定，如大肠菌群的测定，采用此
