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1、选修一教材基础知识梳理：专题3 植物的组织培养技术课题1 菊花的组织培养一、基础知识1、植物组织培养的理论基础 植物细胞的全能性 ： 细胞具有全能性的原因：细胞内含有本物种个体发育所需的全部基因。移栽再分化脱分化(去分化)2、植物组织培养的基本过程： 脱分化 、 再分化 。 外植体 愈伤组织 试管苗 完整植株3、基本概念：（1）愈伤组织：细胞排列 疏松 而无规则，是一种高度 液泡化 的呈 无定形状态 的薄壁细胞。（2）脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生 愈伤组织 的过程，又叫做 去分化 。（3）再分化：由愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官（试管苗）的过程。二、影响植物组织培
2、养的条件1、材料因素： 植物的种类 、 材料的年龄 和 保存时间的长短 等都会影响实验结果。 如：菊花组织培养一般选择 未开花 植物的茎上部 新萌生的侧枝 作材料。 一般容易进行 无性繁殖 的植物，也容易进行组织培养，如：芦荟、秋海棠、月季等。2、常用的培养基是 MS培养基 ：含大量元素、微量元素、有机物（如 蔗糖 等）3、植物激素的影响： 生长素 和 细胞分裂素 是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。使用顺序不同使用顺序实验结果用量比例不同生长素细胞分裂素比值发育方向先生长素，后细胞分裂素有利于分裂但不分化比值高时利于根分化，抑制芽形成先细胞分裂素，后生长素细胞既分裂也分化比值低时利于
3、芽分化，抑制根形成同时使用分化频率提高比值适中促进愈伤组织生长4、其它条件：菊花组织培养，将pH在 5.8 左右，温度 1822 ，并且每日用日光灯照射 12h 。 三、实验操作1、制备MS固体培养基：（一般使用 4 保存配制好的培养基 母液 来制备）（1）配制各种母液：按配方比例配制成的 浓缩液 ，使用时根据母液的浓缩倍数 加蒸馏水稀释 。（2）配制培养基： （由于菊花茎段的组织培养比较容易，因此不必添加 植物激素 。）（3）灭菌方法：高压蒸汽灭菌 。2、外植体的消毒：进行表面消毒时，就要考虑药剂的 消毒效果 ，又要考虑植物的 耐受能力 。四、教材思考题及答案3、在选取菊花茎段时，为什么要选
4、取生长旺盛的嫩枝？答：因为生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。4、MS培养基中各营养物质的作用是什么？与微生物培养基相比，MS培养基有哪些特点？答：（1）大量元素和微量元素提供植物细胞所必需的无机盐；蔗糖提供 碳源 ，同时能够 维持细胞的渗透压 ；甘氨酸、维生素等物质是为了满足离体植物细胞正常代谢所需的特殊营养需求。 （2）微生物培养基以有机营养为主，MS培养基则需提供大量无机营养。课题2 月季的花药培养一、基础知识1、被子植物的花粉发育：花粉是由 花粉母细胞 经过 减数分裂 而形成的，其发育过程如下：有丝分裂单核居中期 花粉管细胞核营养细胞有丝分裂花粉母细胞4个小孢子单核期 花
5、粉粒（小孢子母细胞） （四分体时期） 单核靠边期 （双核期）生殖细胞核2个精子2、产生花粉植株的两种途径：注意：（1）两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中 激素的种类 及其 浓度配比 。（2）无论哪种产生方式，都要先诱导生芽，再诱导生根 。3、影响花药培养的因素： 材料的选择（选单核期的花粉）与 培养基的组成 是主要的影响因素。二、实验操作：1、材料的选取：通过 镜检 来确定花粉是否处于 单核期 ，此时需对 细胞核 进行染色。（1）醋酸洋红法：能将花粉细胞核染成 红色 ，为最常用的方法。（2）焙花青-铬矾法：能将花粉细胞核染成 蓝黑色 ，主要针对不易着色的细胞核。2、接种和培养：注意事项：（1）在剥离花药时，要 尽量不损伤花药 （否则接种后容易从受伤部位长生愈伤组织）。（2）还要 彻底去除花丝 （因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成）。（3）每瓶接种花药 710 个，培养温度 25 左右，幼小植株形成前 不需要光照 。
