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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果正交实验提取两栖蓼中生物碱的研究 【摘要】 目的研究利用有机溶剂提取两栖蓼中生物碱的最优条件。方法以乙醇的水溶液为提取剂，利用正交实验的方法设计实验条件。结果溶剂提取法提取两栖蓼中生物碱的最佳条件为：乙醇浓度75%，提取时间h，固液比112。结论利用正交实验确定了两栖蓼中生物碱提取的最佳条件：乙醇浓度75%，提取时间h，固液比112。 【关键词】 两栖蓼乙醇提取 生物碱正交实验 两栖蓼Polygonum amphibium L.，生于湖泊、河流浅水中和水边湿地，
2、分布于吉林、辽宁、河北、山西、山东、陕西、湖北、云南、贵州等地。两栖蓼为蓼科蓼属植物，蓼科植物药用 历史 悠久，历代本草均有收载，大多具有清热解毒、理气止滞、除湿化滞、活血化瘀、固脱等功效，用于痈疖疮毒、痢疾肠炎、赤白带下、跌打损伤、月经不调等症14。 1 仪器与材料 仪器水蒸气蒸馏装置；脂肪抽出器；HH-S恒温水浴锅。 材料两栖蓼，XX-05采自淮南师范学院泉山校区，经安徽淮南师范学院生物系谢影老师鉴定为两栖蓼；化学试剂均为分析纯。 方法 .1 材料预处理新鲜的两栖蓼全草用去离子水洗净切成块盛在托盘中，放入105的电热鼓风干燥箱中杀青10 min，然后在温度为80的电热鼓风干燥箱中烘干约2h
3、。将烘干的两栖蓼在粉碎机中粉碎，过60目筛备用。 .2 实验设计乙醇浓度、提取时间、固液比是影响生物碱提取的主要因素，选用以上3个考察因素，每个因素设立3个水平(表1) 57。按照正交实验表以乙醇为浸提液提取干粉中的生物碱，提取完成后过滤，弃去残渣。对提取液进行蒸馏回收得到乙醇和提取物。向提取物中加入适量1 mol/ L 的硫酸，形成酸水液和沉淀，滤去酸水液中的沉淀，加入适量的浓氨水调至pH值910。然后加氯仿萃取，生物碱溶在下层的氯仿层中，用分液漏斗分离。对萃取液进行蒸馏回收氯仿和提取物，蒸去氯仿后称量 计算 提取率8，9。表1 因素水平 .3 实验步骤取10 g两栖蓼干粉，用滤纸包好放在洁
4、净干燥的脂肪抽出器中，再向脂肪抽出器中按比例加入的不同浓度的乙醇和几粒沸石，用水浴锅加热，不断回流，按照实验设计回流一定时间后再将回流后的液体进行恒温蒸馏回收乙醇，直到没有液体蒸出为止，此时剩下的即为粗产物，含有一定的杂质，下一步将进行提纯。向提取物中加入适量1 mol/L的硫酸，形成酸水液和沉淀，滤去酸水液中的沉淀，加入适量的浓氨水调至pH值910。将酸水液倒入分液漏斗中加入30 ml的氯仿萃取3次，合并3次的氯仿层于已加沸石称重的锥形瓶中，再将锥形瓶放入恒温水浴锅蒸馏回收氯仿。锥形瓶中剩余物即为纯净的生物碱。 3 结果 .1 提取率测定将提取的氯仿层放入已称重质量为m1的锥形瓶中，蒸去氯仿
5、即得纯净的生物碱，再次称重得锥形瓶质量m2。 生物碱提取率=(m2-m1)/两栖蓼干粉质量。结果见表2。表2 正交实验结果 .2 极差分析法对总生物碱提取工艺的影响经对比实验最后确定出最优工艺条件通过表3正交实验结果方差分析表明，3个因素均显著影响两栖蓼生物碱的提取率。由极差分析可知影响因素:乙醇浓度固液比提取时间，两栖蓼生物碱提取的最佳条件为固液比112，提取时间h，乙醇浓度75%。表3 L9(33)的正交实验结果 .3 最佳工艺条件确定优选出最佳工艺后，进行验证实验，以确保重复性和正确性。按A3B2C1即用两栖蓼干粉10 g，112的固液比，75%的乙醇浓度，每次提取h的条件下进行3次平行
6、实验。结果见表4。表4 A3B2C1下总碱的提取量 由表4可知，在A3B2C1条件下两栖蓼总生物碱提取率高于表3中的实验结果，总生物碱得率为%，在本实验的范围内，A3B2C1为最佳的工艺选择。通过重复验证得知，该条件确实为最佳条件。 讨论 该实验就是研究利用有机溶剂提取两栖蓼中活性成分生物碱10，11。正交实验结果表明，在以乙醇为浸提液提取两栖蓼内生物碱的过程中各因素对提取率的影响程度为：乙醇浓度固液比提取时间，最佳的提取条件为乙醇浓度7%，固液比112，提取时间h ，并且估算出两栖蓼中生物碱的含量为%。 【 参考 文献 】 1肖崇厚. 中药化学M. 上海:上海 科学 技术出版社,1997.
7、2匡海学. 中药化学M. 北京: 中国 中医药出版社,XX.3丁景和. 药用植物学M. 上海:上海科学技术出版社,1990 .4孙文基,张登科,党治稳. 天然药物成分提取分离与制备M. 北京:中国医药科技出版社,199:253.5杨基森,刘 文,覃 燕,等. 用正交试验法考察苦参的提取工艺J. 中国中药杂志, 199,20 (6) :346.6张保献,逵应坤,冯青然,等. 不同精制方法对苦参水提取液中苦参总生物碱含量的影响J. 中国中药杂志,XX ,25(10) :607.7刘勇,熊阳,黄绳武. 不同提取方法对苦参生物总碱的影响J. 河南中医学院学报,200,1(6) :38.8张玉芬,纪明山,张 良,等. 苦参总碱不同提取方法比较J. 农药,200,4(11) :501.9孔令明,章臣贵,金兆祥,等. 苦参总碱提取条件的优化研究J. 新疆农业大学报,200,2(3) :37.10陈孝泉. 植物化学分类学M. 北京: 高等 教育 出版社, 1990:305.11中国医学科学院药物研究所. 中草药有效成分的研究M. 北京: 人民卫生出版社, 1972：12. 课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。
