《增溶瑞香素的稳定囊泡作为药物载体的研究_1》由会员分享，可在线阅读，更多相关《增溶瑞香素的稳定囊泡作为药物载体的研究_1（17页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果增溶瑞香素的稳定囊泡作为药物载体的研究 作者：胡长刚 王仲妮 李干佐 谢辉 安娅 张笑一 廖莉玲 【摘要】 目的 探讨增溶瑞香素的稳定囊泡作为药物载体的优越性。 方法 选择生理上能接受的2种表面活性剂，即仿生磷酯阳离子表面活性剂PTA与阴离子表面活性剂SDS，按一定比例复配能自发形成稳定性囊泡，用负染色透射电镜和动态光散射对其进行表征，并以其作为药物瑞香素的载体开展其组成、温度对包封率的 影响 ，以及在模拟胃液及模拟肠液中的释放情况的 研究 。 结果 在表面活性
2、剂总浓度为10-3mol/L，PTA/SDS=37时，囊泡粒径最大为，包封率最高为%。它们在模拟胃液和模拟肠液中释放75%的时间分别为240min和340min。 结论 本研究对于阴阳离子表面活性剂复配自发形成囊泡作为药物载体进行了探索性工作，并对实验现象和结果从 理论 上进行讨论，为今后的研究指出方向。 【关键词】 囊泡 瑞香素 粒径 包封率 释放分数 药物载体 【Abstract】 Objective To study drug delivery of the stable vesicles with daphnetin solubilization. Methods Stable ves
3、icles were formed from mixed solution of cation surfactant PTA and anion surfactant SDS at proper proportions. The formation and characters of the vesicles were demonstrated by negative-staining TEM and dynamic light scattering. Using the vesicles as the delivery of daphnetin， we carried out the res
4、earch on the effect of formation and temperature upon entrapment efficiency. Research had also been carried out upon the release circumstance of daphnetin contained in the vesicles in simulated gastric and intestinal fluid. Results The results showed that entrapment efficiency of the vesicles reache
5、d a max %， and the diameter reached a max of when the total concentration of surfactants 10-3mol/L，PTA/SDS=37. In simulated gastric and intestinal fluid ，the time for the release rate of daphnetin containing vesicles reaching5% were respectively40 minutes and40 minutes. Conclusion This study has mad
6、e an exploration research on utilizing vesicles spontaneously-formed from mixed solution of cation surfactant and anion surfactant as drug delivery， and a theoretical exploration is also presented in this paper about the phenomena and results of experiment. 【Key words】 vesicle daphnetin diameter ent
7、rapment efficiency release percent drug delivery 由于阴阳离子表面活性剂复配必然产生强烈的电性作用，因而使表面活性大大提高，显示出极大的增效作用，因此渐渐地 应用 于实际1。囊泡作为分子有序组合体的一个重要分支，被广泛地应用于模拟生物膜2，合成纳米材料3、作为微反应器4和药物载体5等 科技 领域。囊泡作为药物载体具有防止药物降解失活，延长药物的作用时间以及降低毒副作用等特点，因而囊泡包封技术已经成为化学、药学和生命 科学 研究领域中的热点课题之一。但通常制备囊泡的方法需要外界提供额外的能量，如超声波法6、手摇法等，其中手摇法的包封率约为10%，超
8、声波法对于水溶性药物的包封率约为20%7。然而这些方法得到的囊泡是热力学的不稳定体系，从而限制了其应用。为此自发形成囊泡就成为研究人员追求的目标。1989年，Kaler和Zasadzinski8从复配的阴阳离子表面活性剂体系得到了自发形成的囊泡。这种囊泡为上述应用创造了条件。笔者也用仿生磷酯类阳离子表面活性剂磷酸三酯与阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠复配首次获得自发形成的囊泡9。前期重点研究了囊泡大小，稳定性及形成机制，结果表明，这种囊泡稳定性好，其大小、电荷和渗透性等容易通过改变2种表面活性剂的比例来调节，制备速度快。由于PTA属于仿生类磷酯，对于胺类阳离子表面活性剂对眼和皮肤有刺激性，但是分
9、子接上乙氧基或羟丙基等基团，刺激性显著降低。即增加100倍的浓度才具有相当最初胺类%浓度时的刺激性，因此可用于药物中10。而SDS早以用于牙膏、搽剂，乳膏剂中，只有浓度高时对皮肤有刺激，刘程等学者11提到表面活性剂对药物影响中，谈到吐温80，SDS能影响含磺酰胺片剂的溶解性，使药片的粘结性降低，在胃酸中较快溶解，改善了药片的崩解、溶解和吸水性。因此本文通过改变2种表面活性剂的比例，把在磷酸二盐缓冲溶液中得到系列囊泡作为瑞香素药物载体，开展其性能、包封率、缓释率等研究，为自发囊泡作为药物载体进行应用性探索。 目前 国内在这一方面的研究尚未见报道。 瑞香素又称祖师麻甲素是一种微溶于水的香豆素类化合
10、物，其分子结构见图1。 图1 瑞香素的分子结构 瑞香素临床上主要用于 治疗 血栓栓塞性脉管炎、风湿性关节炎、冠心病以及中药麻醉剂12。本文研究了仿生磷酯类阳离子表面活性剂磷酸三酯与阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠以不同配比复配自发得到单室囊泡，采用透射电镜对囊泡形态进行了观测。并利用动态光散射测定了囊泡的粒径及多分散度，用不同配比下形成的囊泡对瑞香素的包封及其缓释作用进行了研究。 1 材料与方法 仪器和试剂 透射电镜；动态光散射；BI-9000AT数字相关器；UV-2100型紫外/可见分光光度计。透析袋；阳离子表面活性剂磷酸三酯，南京金陵石化研究院提供，纯度%；阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠，F
11、luka Co.， 纯度%；瑞香素粗品；水为3次蒸馏水；其余无机试剂均为分析纯试剂；模拟胃液、模拟肠液(pH=)、磷酸二氢盐与磷酸氢二盐缓冲溶液均按 文献 7配制。 1. 实验方法 囊泡的制备及囊泡形态的观测 配制PTA和SDS的母液，分别取适量的表面活性剂溶液混合至目标比例和浓度，轻微摇晃均匀，混合体系呈现淡蓝色，预示着囊泡的自发形成9，13。采用负染色法透射电镜对囊泡进行表征。 囊泡粒径及多分散度的测定 动态光散射的入射波长为488nm。在温度为25，散射角为90等条件下进行测定。 瑞香素的纯化 见文献12。 瑞香素及其空白囊泡溶液的紫外可见光谱扫描 精确配制含10-3mol/L的瑞香素溶
12、液及表面活性剂总浓度Ctotal=10-3mol/L空白囊泡溶液，分别用PBS缓冲溶液稀释5倍得到待测样品，在UV-2100型紫外/可见分光光度计上从220500nm间进行扫描，其目的是寻求瑞香素的最大吸收峰，并了解空白囊泡是否对药物分子测定有干扰。扫描结果表明瑞香素在325nm、263nm处有吸收峰，与文献报道相吻合12。由于瑞香素在325nm处吸收峰明显且峰形好，为此本文选用325nm作为用透析法来测定瑞香素缓释率的吸收波长。同时笔者在相同的波长范围内测定了瑞香素溶液和空白囊泡的一阶导数光谱，结果见图3。图3的a线是空白囊泡的一阶导数曲线，是数值基本为0的一条直线。b线为波形，是瑞香素的一
13、阶导数曲线，从1、2、3、4四个峰形来看，选择3处波长测定瑞香素的导数值，此时空白囊泡对药物分子吸收峰基本不产生干扰。故本文选用306nm作为用一阶导数法来测定瑞香素包封率的吸收波长。 a空白囊泡；b瑞香素 图2 瑞香素和空白囊泡紫外光谱图 a空白囊泡；b瑞香素 图3 瑞香素和空白囊泡的一阶导数紫外光谱图 瑞香素一阶导数标准曲线和零阶导数标准曲线的绘制 在上述配制的瑞香素母液(10-3mol/L)中，分别取出80、160、200、240、280、320l分别置于相应的10ml容量瓶中，再用PBS溶液稀释到刻度，在306nm处测定瑞香素的一阶导数值并绘制标准曲线，其线性回归方程为式。按同样方法取
14、瑞香素母液分别置于另一批容量瓶中，再用水稀释到刻度在325nm处分别测定系列浓度瑞香素溶液的吸光度，绘制标准曲线其线性回归方程为式。 C=+210-6 R2= C= R2= 样品的制备及包封率的测定 向试管中加入4ml /L的瑞香素溶液后，分别从事先配制好的PTA和SDS母液中按不同比例取量，但保持两者总浓度不变。轻微振荡试管后，即得淡蓝色的含药物瑞香素的囊泡溶液。 药物包封率的测定有多种方法，本实验选择一阶导数分光光度法。它具有快速、准确、方便等特点1417。准确量取2ml上述制备好的瑞香素包封溶液置于10ml容量瓶中，用PBS溶液稀释至刻度后迅速在306nm处测定上述溶液的一阶导数值。将该值代入方程中算出游离药物质量，则由式 计算 瑞香素囊泡溶液的总包封率。 总包封率=1游离药物质量稀释倍数投料的药物总量100% (3)127 囊泡中瑞香素的释放研究 囊泡包封药物缓释率的研究通常采用透析法7，18，取10ml包封药物的囊泡置于透析袋中，加入与袋外相同的模拟胃液或模拟肠液以维持透析袋内外的离子强度相等。将透析袋放入盛有100ml模拟胃液或模拟肠液的广口瓶中，将瓶置于37水浴中，袋外开始轻微搅拌。每隔一定时间，从袋外取2ml透析液在325nm处测量吸光度，然后放回瓶中，直至吸光度不
