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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划生物社团调查报告微生物微生物综合实验报告姓名：杨延景班级：食品1101学号：XX指导老师：郭永目录项目一食品中菌落总数的测定前言3实验目的.3实验原理.3实验器材3实验步骤4实验结果以及分析7国标中微生物菌落总数标注.7项目二大肠菌群的测定实验目的9实验原理9实验器材9实验步骤10实验结果以及分析15项目三革兰氏染色实验器材18实验步骤18实验结果18四实验感想项目一食品中菌落总数的测定前言随着生活人们生活水平的提高，和社会的发展与进步食品安全问题越来越受到人们的关注，然而食品方面的
2、问题这几年也越来越突出，食品安全问题屡见不鲜。由前几年的“苏丹红红心鸭蛋”再到这几年的“三聚氰胺奶粉事件”和“瘦肉精事件”还有“地沟油”等等一系列的事件都不得不让人们对食品安全问题高度关注。然而食品中微生物的菌落总数是用来判定食品被细菌污染的程度即清洁状态及其安全质量，它反映食品在生产过程中是否符合国家食品安全标准要求，以便对被检样品做出适当的食品安全评价。然而微生物的检测主要依靠菌落总数(colonycount)的测定，菌落总数的测定是指食品检样经过处理，在一定的条件下(样品处理、培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧条件)培养后，所得到的每单位食品(1g、1mL或1cm2)中所含细菌菌落的
3、总数。所以说通过这些实验让我们更好的掌握菌落总数的测定一方面要求和配置；.掌握我国食品安全标准中微生物检验指标及意义；.掌握常见各类食品微生物检验采样方法；.掌握食品微生物检验各项指标检验方法和技能；在我们以后的日常工作和学习中更好的为人们服务。实训一食品中菌落总数的测定一、实验目的1.学习并掌握食品中菌落总数的原理和基本方法，以判别食品的质量；2.体会食品菌落总数检验的目的和意义。二、实验说明菌落总数是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1mL检样中所含细菌菌落总数。菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行食品安
4、全与质量评价时提供依据。三、实验器材1培养基：平板计数琼脂培养基，磷酸盐缓冲液，无菌生理盐水。2仪器用具：恒温培养箱、恒温水浴锅、酒精灯、试管架、无菌培养皿、无菌移液管、无菌不锈钢勺、酒精灯。四、操作步骤图9-1食品中菌落总数的测定1取样、稀释以无菌操作，取检样25g剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液的灭菌玻璃瓶内或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨制成1:10的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌均质器中以800010000r/min的速度处理1min，制成1:10的均匀稀释液。用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液的试
5、管内，振摇试管混合均匀，制成1:100的稀释液。另取1mL灭菌吸管，按上项操作顺序，制10倍递增稀释液，如此再递增稀释一次。根据对样品污染情况的估计选择23个适宜稀释度，分别在制作10倍递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个微生物大实验土壤中芽孢杆菌的分离及鉴定实验报告学院：生命科学学院专业：生物技术班级：组数:学号:姓名:前言芽孢杆菌是能形成芽孢(内生孢子)的杆菌。芽孢是休眠体，不是繁殖体。绝大多数是一个菌体仅形成一个芽孢芽孢位于菌体内,由核心、皮层、芽孢壳和外壁组成。核心是芽孢的原生质体，内含DNA、RNA、可能与DNA相联系的特异芽孢蛋白质以及合成蛋白质和
6、产生能量的系统。芽孢杆菌属是大的(410um),革兰氏阳性，严格需氧或兼性厌氧的有荚膜的杆菌。该属细菌的重要特性是能够产生对不利条件具有特殊抵抗力的芽孢。芽孢杆菌属可分为以下亚群：多粘芽孢杆菌、枯草杆菌、短芽孢杆菌和炭疽芽孢杆菌。芽孢杆菌是一种耐高温、高压及低PH值的有益微生物，本实验从土壤中分离出15株芽孢杆菌，从中挑选出一株芽孢杆菌进行生理生化鉴定，以及分子鉴定。通过进一步的实验，了解到其生理生化特点。一、实验目的：掌握芽孢杆菌属常见种的分离、鉴定方法和技术。将土壤样品中分离的芽孢杆菌属未知种鉴定到属。二、实验原理：芽孢杆菌能产生芽孢，在沸(来自:写论文网:生物社团调查报告微生物)水中加热
7、不会失去生理活性，但是不能产生芽孢的细菌会失去活性。，因而得到芽孢菌属，经过进一步分离及生理生化鉴定得到枯草芽孢杆菌。三、实验仪器材料：1、仪器：显微镜、培养皿、试管、三角瓶、烧杯、移液管、涂布棒、载玻片、接种环、接种针、试管架、灭菌锅、培养箱、电泳仪、PCR仪、提取DNA试剂盒2、材料：培养基：LB培养基、淀粉培养基、孔雀绿溶液、番红复染液、NaOH溶液、草酸铵溶液、碘液、乙醇、硝酸盐、葡萄糖、甘露醇、阿拉伯糖、木糖四、实验步骤：、菌种的分离和纯化1、取样2、LB培养基的配制：1L水、10g蛋白胨、5g牛肉膏、10gNacl、15g琼脂、120灭菌30分钟待用3、平板及斜面的制备4、制备土壤
8、菌悬液：称取土样约1g土壤放入盛有9ml无菌水并带有玻璃珠的三角瓶中，置于摇床上150r/min,振荡10min。使土样与水充分混合，使细胞分散。用一支1ml无菌吸光吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀，此为10-1稀释液，以此类推制成10-2，10-3.10-6等几种稀释度的土壤溶液。5、涂布：用无菌吸管分别吸取每个梯度的土壤溶液，准确放入PDA平板中，用无菌玻璃涂棒在培养及表面轻轻地涂布，使溶液分布均匀。室温下静置5-10min。6、培养：将平板置于28温箱培养1-2天。选择单个菌落挑取少量的菌苔，接种于斜面上。7、纯化：挑取单菌落溶于无菌水中，充分震荡摇匀，接种于已灭
9、菌的LB培养基的平板上。8、初染：将纯化后得到的菌株进行革兰氏染色，并从中挑选出呈紫色的菌株，纯化保种并进行形态学、生理生化及分子鉴定形态观察：1、个体形态特征观察2、群体形态特征观察芽孢杆菌鉴定的生理生化试验1、好氧性试验细菌对氧气的需求是细菌鉴定的重要指标之一。若在培养基中加入还原剂，如巯基醋酸钠和甲醛次硫酸钠，可除去培养基中的氧气或氧化型的物质，使厌氧菌能在有氧条件下生长。培养基a、胰胨20gNaCl巯基醋酸钠美蓝L-胱氨酸蒸馏水1000mL琼脂，分装试管，、121灭菌15min。b、酪素水解物20gNaCl5g巯基醋酸钠2g甲醛次硫酸钠1g琼脂15g蒸馏水1000mL，分装试管，、12
10、1灭菌20min，培养基不搁斜面。试验方法取一环肉汤培养液，穿刺接种到上述培养基底部，30培养3d至7d观察结果。好氧菌在培养基上部生长，厌氧菌则在培养基底部生长。2、糖发酵试验糖类发酵产酸是细菌分类鉴定的一项重要依据。培养基(NH4)2HPO41gMgSO4酵母膏糖或醇类10g水洗琼脂56g蒸馏水1000mL%溴甲酚紫酒精液20mL，分装10100mm小试管，培养基高度34cm，110灭菌20min。试验方法取培养1824h的菌种，直针穿刺接种到培养基中，适温培养1、2、4、7、14d后观察结果。指示剂由紫色变黄，表示发酵糖类产酸，琼脂柱中出现气泡，则表示产气。3、试验试验和试验分别测试细菌
11、产酸和产生中性物质的能力。有的利用葡萄糖产酸，使PH值低于，并可维持4d以上。甲基红阴性的细菌可将产生的酸进一步代谢，在4d内生成中性化合物。因此，观察时间对于该项试验非常重要，一般细菌以4d观察为宜。如果细菌在4d期间和反应均为阳性，则应该培养较长的时间，以确定生成的酸是否已完全转变。培养基蛋白胨5g葡萄糖5gNaCl5g蒸馏水1000mL调节pH至,分装试管，每管45mL，110灭菌20min。试剂甲基红%酒精300mL蒸馏水200mL方法将菌种接种到上述培养基中，适温培养4、6d。在培养基中加入几滴甲基红试剂，若培养基显红色，则为甲基红阳性，黄色，则为阴性。如为阴性，可适当目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。
