生物药物分析所有课件便于打印

《生物药物分析所有课件便于打印》由会员分享，可在线阅读，更多相关《生物药物分析所有课件便于打印（608页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、生物药物分析,生物工程教研室 曾叶霖 E-Mail : ,课程主要内容,主要参考书目 生物药物分析 白秀峰 中国医药科技出版社生物药物分析 何华 化学工业出版社药物分析 孙莹 吕洁 人民卫生出版社,生物药物分析学概述,药物分析的性质 药学的分支学科，是药学和分析学的交叉学科 包括药物的检验、药物稳定性、生物利用度、药物临床监测和生物药物检定等多方面的定性定量分析 目的是确保药物的质量及病人的用药安全有效,生物药物分析学概述,药物分析的任务 对药物生产过程的控制 对药物贮运进行检测 对临床用药进行监护 配合药物研究部门进行新药与新剂型的研制 提高药物工作者的素质,生物药物分析学概述,强生儿童退烧

2、药召回事件,维C银翘片含毒,拜耳避孕药停售,生物药物分析学概述,药物质量标准 药典是国家对药物质量标准及其检验方法所做的技术规定，是药物生产、监控、供应、使用及管理部门共同遵循的法令。 药典一般包括凡例、正文、附录、索引四部分,生物药物分析学概述,药典（药物质量标准、分析方法） 药典是国家对药物质量标准及其检验方法所做的技术规定，是药物生产、监控、供应、使用及管理部门共同遵循的法令。 药典与分析方法,生物药物分析学概述,药典（药物质量标准、分析方法） 药典一般包括凡例、正文、附录、索引四部分 “凡例”是解释和使用药典进行质量检定的基本原则与一致规定。,生物药物分析学概述,药典（药物质量标准、分

3、析方法）,生物药物分析学概述,药典（药物质量标准、分析方法） 药典一般包括凡例、正文、附录、索引四部分 正文部分为所收载的每种原料药和制剂的质量标准，包括名称、分子结构式、分子式、分子量、含量限度、性状、鉴别、检查、含量测定、类别、规格、贮藏条件等。,生物药物分析学概述,药典（药物质量标准、分析方法）,生物药物分析学概述,药典（药物质量标准、分析方法） 药典一般包括凡例、正文、附录、索引四部分 附录主要收载制剂通则、通用检测方法和指导原则。包括制剂通则，生物制品通则，光学、色谱学检查方法，一般杂质检查方法，特殊杂质检查方法，微生物限度检查法，抗生素微生物检定法等。,生物药物分析学概述,药典（药

4、物质量标准、分析方法） 药典是国家对药物质量标准及其检验方法所做的技术规定，是药物生产、监控、供应、使用及管理部门共同遵循的法令。 药典与分析方法,生物药物分析学概述,生物药物概述 包括生化药物、生物技术药物和生物制品。 特点： 相对分子质量的测定 生物活性检查 安全性检查 效价测定 生化法确证结构,生物药物分析学概述,生物药物的科学管理 GLP良好药物实验研究规范 GMP良好药品生产规范 GSP良好药品供应规范 GCP良好药品临床试验规范,生物药物分析学概述,生物药物的分析检验 药物的取样 药物的鉴别 药物的杂质检查 药物的安全性检查 药物的含量（效价）测定 检查报告的书写,药物的鉴别,药物

5、鉴别目的 判断药物的真伪 药物鉴别的特点 药物分析的首要任务 为已知药物的确证试验 个别分析 化学鉴别试验要有明确的现象 鉴别试验条件要准确,性状,一般鉴别试验,专属鉴别试验,药物的鉴别,药物鉴别的内容,外观 溶解度 物理常数,某一类药物的依据：苯甲酸盐钠盐硫酸盐氯化物等,某一种药物的依据,生物药物的杂质检查,杂质及其来源 药物中无治疗作用，或影响药物的稳定型和疗效，甚至对人体健康有害的物质 药物纯度和一般化学品及试剂的要求不同 生产过程引入杂质 贮存过程引入杂质,生物药物的杂质检查,杂质的种类 按性质分为影响药物稳定性的杂质、毒性杂质和信号杂质 按来源分为一般杂质和特殊杂质,生物药物的杂质检

6、查,杂质检查的原理 利用生物药物和杂质在物理性质上的差异 利用生物药物和杂质在化学性质上的差异,药物的杂质检查方法 对照法 限量检查法 （Limit Test） 特点：不需知道杂质的准确含量,生物药物的杂质检查,药物的杂质检查方法 灵敏度法 系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现 特点：不需对照品,生物药物的杂质检查,药物的杂质检查方法 比较法 含量测定法：测定杂质的绝对含量，如测定吸收度、pH值等。 特点：准确测定杂质的量，不需对照品,生物药物的杂质检查,生物药物的杂质检查,一般杂质检查 指在自然界中分布比较广泛，在多种药物的生产和贮存过程中容易引入的杂质 检查项目有

7、氯化物、硫酸盐、水分、酸、碱、硫化物、硒、氟、氰化物、铁盐、重金属、砷盐、铵盐、易炭化物、干燥失重、炽灼残渣、溶液颜色与澄清度等,仪器的配对性 如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过2mm，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致 对照品与供试品的同步操作,生物药物的杂质检查,一般杂质检查规则,药品检验操作标准规定：遵循平行操作原则,正确的取样及供试品的称量范围 1g不超过2%，1g不超过1%,正确的比色、比浊方法,检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份,生物药物的杂质检查,氯化物检查法,（一）原理 对照法,（二）测定条件,1. 标准NaCl溶液 10gCl/ml，50ml

8、溶液中含5080g的Cl所显浑浊梯度明显，相当于标准NaCl溶液58ml。,2. 反应需在硝酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜。,（1）加速AgCl浑浊的形成；,（2）产生较好的乳浊；,（3）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成。,3. 试剂：硝酸银,5. 避光、暗处放置5分钟后比浊，因氯化银见光易分解。,4. 供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀,6. 比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。,7. 平行操作原则,（四）干扰及排除,1. 若供试品有色，需经处理后方可检查。,（1）内消色法：倍量法，如枸橼酸铁铵中氯化物的检查

9、。,（2）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。,2. 当有其它干扰物质存在时，必需在检查前除去（1）碘中氯化物的检查（2）碘化物中氯化物的检查（3）溴化物中氯化物的检查,3. 不溶于水的有机药物,（1）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。,（2）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。,（3）溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查。,澄清度检查法,检查药物中的微量不溶性杂质，用作注射剂的原料药一般应作此项检查。,1. 检查方法 对照法,2. 浊度标准液的配制,中国药典规定用浊度标准液作为澄清度检查的标准。,反应原理：乌洛托品在偏酸性条件下水解

10、产生甲醛，甲醛与肼缩合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色浑浊。,1.00硫酸肼溶液与10乌洛托品溶液等量混合配制浊度标准贮备液 浊度标准原液 浊度标准液（5个级号）,3. 判断 药典中规定的“澄清”，系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂，或未超过0.5号浊度标准液。,4. 溶剂：水、酸、碱、有机溶剂 有机酸的碱金属盐类药物强调用“新沸过的冷水”,有机溶剂残留量测定法,1. 有机溶剂残留量测定法是用以检查药物在生产过程中引入的有害有机溶剂，包括苯、氯仿、二氧六环、二氯甲烷、吡啶、甲苯及环氧乙烷。,2. 检查方法 中国药典采用气相色谱法检查残留有机溶剂,色谱条件： 固定相：直径为0.250.18mm的

11、二乙烯苯乙基乙烯苯型高分子多孔小球,载气：氮气 检测器：氢火焰离子化检测器检测 柱温：80170,色谱系统适用性试验：中国药典规定，在残留溶剂测定前应作色谱系统适用性试验。,生物药物的杂质检查,特殊杂质检查 指药物在生产和贮存过程中，有可能引入的中间体、分解产物以及副产物杂质 安全性检查 生物药物还有一类特殊杂质需要检查，对生物体产生特殊生理作用。,生物药物的杂质检查,异常毒性检查法 热原检查法 升压物质检查法 降压物质检查法 致敏物质检查法,,Thank You !,,微 生 物 限 度 检 查 法,1微生物限度检查法概述 2我国药品微生物限度标准的发展情况 3我国药品微生物限度检验方法的发

12、展情况 4微生物限度检查法所需的材料 5微生物限度检查试验用物品的准备 6无菌室技术要求 7细菌、霉菌与酵母菌的检查方法 供试品的抽样、保存及检验量 试验操作前的准备 供试液的制备 对照用菌液的制备,菌数测定阴性对照试验 细菌、霉菌（酵母菌）检验程序 供试液的稀释（10倍递增稀释法） 注平皿 倾注培养基 培养 菌落计数 菌数报告规则 注意事项 8.细菌、霉菌（酵母菌）的其他检查方法 管稀释法（试管法、MPN法） 滤膜法 计数板法 仪器法 平板涂布法,表面涂抹平板法 滤膜培养法 酵母菌镜检计数法 9. 大肠杆菌检查法 概述、原理 检验程序 增菌培养 分离培养 纯培养、革兰染色、镜检 生化试验（I

13、MViC） 实验中的注意事项 10沙门菌检查法 11铜绿假单胞菌检查法 12金黄色葡萄球菌检查法 13破伤风梭菌检查法 14活螨检查法 15结果判断,1微生物限度检查法的意义 药品是防病治病、关系用药者生命健康的特殊商品，必须保证其质量，用药的安全与有效。微生物污染药品引起的药源性疾病屡见不鲜，在国内外均有报道。为保证药品质量，必须对微生物污染进行必要的控制和检验。其意义在于： 已有许多实例表明，药品污染微生物不仅危及病人用药安全，而且也直接影响药品的有效性，所以药品卫生质量是药品质量不可分割的部分。 反映药品生产工艺的科学性、合理性及质量管理水平。通过检验，凡工艺条件、生产管理水平、生产人员

14、的素质差，不注意文明生产的单位和企业，其生产的药品，染菌必然严重，不合格率无疑就高。微生物限度的检验是提供药品卫生质量状况的重要依据，因而保证销售与使用过程中药品的有效性与安全性，是促进与提高生产单位全面质量管理水平与提高药品质量的重要依据。,微生物限度检查法概述,2微生物限度检查的范围 根据药品使用的要求，可划分为两大类： 规定灭菌的药品：包括注射剂和输液剂，及用于体腔、严重烧伤、溃疡、出血及眼科用药等制剂。 非规定灭菌药品：包括常用的口服制剂与一般外用制剂。对这一部分制剂一般不要求绝对无菌，允许一定限量的微生物存在，但同时规定不得有可疑致病的细菌存在。由于致病菌的范围很广，各国药典都规定了

15、几个常见的致病菌或指标菌作为控制菌。 在非规定灭菌的制剂中，对每克或每毫升的药品按剂型或品种不同规定： 染菌量检查：包括细菌数、霉菌数及酵母菌数测定，以检查这几类微生物对药品的污染程度。 控制菌检查：包括大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌的检查等。,3药品微生物限度检查抽样量与检验量 药品微生物限度检验中的困难，最根本的原因在于检验对象本身的特殊性。 药品微生物限度检验对象的特性： 不确定性：药品受外来微生物的污染，这种污染是可无可有；在有中又可多可少；其种类可以多样。污染的情况可依生产、设备、原材料、管理、剂型等条件而定，非药品本身所固有。所以微生物限度检查的对象是不确定的。药

16、品所规定的检查项目，除无菌检查、热原检查具有上述性质，其他项均无此特征。这一点往往被忽视。污染对药品而言是一个意外事件。污染批号中的不合格品是一个随机变量。 分布的不均匀性：不均匀性是不确定性的另一种表现形式，在一个批号内产品有的被污染，有的不被污染，分布不匀；在被污染的部分中有的数量极多，有的较少，种类上可以复杂或较单一。这种不均匀性源于污染源的复杂性；原辅料 污染、工艺污染、空间污染,和操作人员污染等等构成污染量的多少差异，形成不均态。再者，微生物具有簇团性；簇团大小、紧密程度是可遗传的，簇团的分散性差异极大，该特点无疑强化了不均匀性。 活体特征：药典中以活的微生物作为检验对象也是独特特性。 由于以上特殊性，抽样对微生物限度检测值将产生很大的影响。当药品无污染时，抽样将不影响检验，当批产品存在污染品时，抽样的样本是随机变量，抽样的影响如下： 抽样方法：不同的抽样方法对批产品总体的代表性是不同的，测定值也是有差异的。如抽取可疑样品与随机抽样，其检出率与数字显然前者大于后者。 抽样量：抽样量的多少，对样本的代表性极为重要，如含10不合格率的批产品，从中抽取2件数为样本进行控制菌检验时，有81机率判定为合格品，而抽取30件数时，会有96机率判定为不合格品。,