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1、第二章 牙体牙髓病微生物学 肖丽英,一龋病微生物学,1.细菌与龋病发生的关系 2.主要致龋菌及生物学特性,龋病是发生在牙齿硬组织上的慢性细菌性渐进性疾病，造成牙齿硬组织的颜色、形态、质地的改变。,龋病的定义,龋病的病因学因素,1.细菌在龋病发生中作用的证据的两个经典实验,一、细菌与龋病的关系,无菌鼠+细菌 龋病无菌鼠+高糖饮食 无龋,（1）Orland的无菌鼠实验（1955）,（2） Miller的体外实验（1890）,细菌酵解碳水化合物是龋病产生的根本原因。,（1）牙齿在萌出前不发生龋。 （2）抗生素可降低龋病的发生并减轻其严重程度。 （3）龋损牙本质和釉质中可找到细菌。 （4）体外的人工龋
2、实验。,无菌即无龋,2. 其它实验,3. Ecological plaque hypothesis（90年代）,与龋病发生有关的细菌都是口腔正常微生物群，由于局部的、全身的、食物的因素改变，造成口腔生态环境的变化，正常细菌与宿主之间的生理性组合改变为病理性组合，口腔生态平衡转化为生态失调，正常细菌成为条件致病菌，引起龋病。,（一）产酸和耐酸性(二）合成细胞内外多糖的能力（三）对牙面的粘附能力,二、致龋菌的生物学特性,部分细菌对不同口腔部位的粘附力粘附部位细菌 牙面 舌面 颊粘膜变异链球菌 + + +血链球菌 + + +唾液链球菌 + + +缓症链球菌 + + +放线菌 + + +韦荣球菌 +
3、+ +奈瑟菌 + + +,判断标准 1.符合致龋菌应具备的生物学特性。 2.在龋损的各个时期都可分离并可纯培养。 3.细菌量与龋病的发生密切相关。 4.能引起实验动物的传染性龋损。 5.选择性限制该菌可以减少龋病的发生。,三、致龋菌,（一）口腔链球菌群链球菌属(Streptococcus),口腔常驻菌，在口腔天然菌群中比例最大。血链球菌(S.sanguis) 缓症链球菌(S.mitis)唾液链球菌(S.salivarius)变异链球菌(S.mutans),（二）变异链球菌与龋病1.表型特征G+染色，菌体呈球形，直径0.5-0.75um。肉汤培养基：菌细胞呈短杆状或球状，成队或链状排列，链长中等
4、，或短，不活动。轻唾琼脂平板(MS)：高凸，粗糙，不透明，毛玻璃状，嵌于琼脂内的菌落。血琼脂平板：圆形，表面光滑，直径 0.5-1mm的菌落。周围有(绿色)或(无色)溶血环，有时为(透明)溶血环。,变形链球菌细胞,2.细胞壁组成 （1）多糖 菌株抗原性 血清型 （2）肽聚糖：N-乙酰葡萄糖胺、N-乙酰胞壁酸、短肽 （3）甘油磷壁酸：壁磷壁酸、膜磷壁酸 （4）表面蛋白：GTF、FTF、P1决定变链菌的抗原性和在牙面的粘附,3. 致龋性（1）产酸性和耐酸性（2）合成细胞内外多糖（3）对牙面的粘附性,4. 变异链球菌与龋病的关系 （1）横向的流行病学调查表明：变链球菌的检出率同龋病的发生呈正相关。
5、（2）纵向的追踪调查表明：唾液或菌斑中变链球菌的检出率与随后龋病的发生呈正相关。 结论：变链是主要的致龋菌，但不是唯一的致龋菌。,问题：其他细菌仍可诱发动物龋，变链和龋活跃性的关系不是恒定的。,1.形态学革兰阳性杆菌，属兼性厌氧或专性厌氧菌，菌体细长，直径0.6-0.9m，不分支，无芽胞，不活动。菌落呈圆丘形，表面光滑或粗糙，不透明，干酪样白色或淡褐色。,（三）口腔乳杆菌,2. 致龋性 1.早期研究认为乳杆菌是主要的致龋菌。 2.目前的研究表明乳杆菌不是龋病发生的初始致病菌,但参与了龋病的发展,主要涉及牙本质龋。 3.乳杆菌是导致根面龋的致龋菌之一。,1. 形态及培养口腔中最常见的革兰阳性丝状
6、菌，兼性厌氧，主要定居在牙面。无鞭毛和芽胞，菌细胞末端较膨大，形态不规则，为丝状或杆状，长短不一。 BHI培养基上，形成蛛网状和光滑型菌落。,（四）放线菌,2.致龋性 透射电镜下观察，放线菌有菌毛(pilli或fimbria)，各放线菌的菌毛成分不一样，粘性放线菌有I型和II型两种类型的菌毛，而内氏放线菌只有II型菌毛。菌毛与放线菌的粘附性能密切相关。,二 牙髓和根尖周病的微生物学,牙髓和根尖周细菌感染的主要途径 牙髓及根尖周感染的细菌学特点 牙髓及根尖周感染的常见病原菌 牙髓及根尖周感染病原菌种类与临床症状的关系,基本概念,牙髓和根尖周病是发生在牙髓组织和根尖周膜及牙槽骨的疾病的总称，牙髓和
7、根尖周病与龋病一道被称为牙体牙髓病。 牙髓是牙组织唯一的软组织，由牙髓细胞、细胞间质和细胞间液组成，位于由牙本质围成的牙髓腔内，借狭窄的根尖孔与根尖周组织相连。 根尖周组织指根尖部的牙周组织，包括牙骨质、牙周膜和牙槽骨,牙髓根尖周病的细菌病因学证据,1890年 Milier等首次在人的坏死牙髓组织中发现细菌 1965年 Kakehashi等 经典的无菌鼠动物实验在无菌条件下钻开实验鼠牙髓腔暴露于口腔中普通鼠 无菌鼠 实验牙在8天内可见 实验牙在42天内未见发生严重的牙髓炎 牙髓有进行性炎症反应牙髓坏死、根尖周炎 手术伤口很快愈合 结论：细菌是牙髓根尖周组织感染的启动因子,牙髓根尖周病细菌感染的
8、途径,主要途径为：经牙体感染经牙周感染经血源感染,1 经牙体感染,诱因：龋病、外伤性牙折、牙隐裂、楔状缺损、磨损及发育畸形等途径：细菌或毒性产物侵入暴露的牙本质小管至管壁脱矿、管腔扩大引起牙髓的损伤、炎症反应和坏死; 通过根尖孔或侧支根管侵入根尖周组织，导致根尖周炎或根尖周脓肿。,2 经牙周感染(逆行性感染),深牙周袋的细菌经根尖孔或根尖区侧支根管进入牙髓，引发牙髓感染 由牙周途径导致的牙髓感染称为逆行性感染，所引起的牙髓炎称为逆行性牙髓炎（retrograde pulpitis）,3 经血源感染(引菌作用 ),引菌作用：暂时性的菌血症引起的细菌在代谢障碍或创伤的牙髓组织的定植。 诱因：因拔牙
9、、洁治、根管治疗等可引起暂时性菌血症，细菌通过血流进入创伤的牙髓或根尖周周围组织，继而引发牙髓感染。,牙髓及根尖周感染的病原菌,牙髓炎的病原菌 感染根管病原菌 根尖周炎病原菌,1 炎症牙髓的病原菌：,Streptococcus spp 链球菌菌种Actinomyces spp 放线菌菌种Lactobacillus spp 乳杆菌菌种Gn兼性厌氧和厌氧杆菌,牙髓炎的病原菌,与龋原性牙髓炎的牙髓组织炎症、坏死有重要关系的不可逆性牙髓炎的主要病原菌Peptostreptococcus micros Porphyromonas gingivalis 牙髓炎多继发于龋病，Streptococcus、Ac
10、tinomyces、Lactobacillus和Gn的厌氧杆菌 髓腔开放者细菌的种类和数量较末开放者多； 在炎症牙髓中检出真菌。,2 感染根管的病原菌,产黑色素的革兰阴性杆菌 porphyromonas gingivalis 牙龈卟啉单胞菌 Prevotella intermedius 中间普雷沃菌 不产黑色素普雷沃菌 Prevotella oralis 口腔普雷沃菌 Tannerella forsythensis 福赛斯坦纳菌 peptostreptococcus micros 微小消化链球菌 Fusobacterium nucleatum 具核梭杆菌 (Enterococcus faeca
11、lis 粪肠球菌),感染根管的病原菌,Gomes等： 60例感染根管专性厌氧菌是主要病原菌P. micros、P. gingivalis、P. endodpntalis、P. intermedia 和 F. nucleatum。Prevotella spp 和P. micros 常见于急性感染根管中。Sundqvist等：65颗感染根管的细菌以革兰阴性专性厌氧杆菌为主每个根管内细菌种类平均为5.3种,3根尖周组织感染的主要病原菌,产黑色素类的厌氧杆菌:Porphyromonas gingivalis 牙龈卟啉单胞菌Prevotella intermedius 中间普雷沃菌 Tannerella
12、 forsythus 福赛斯坦纳菌 Fusobacterium SPP 梭杆菌菌种 Peptostreptococcus micros 微小消化链球菌 Eubacterium SPP 优杆菌菌种 Actinomyces spp 放线菌菌种,病原菌种类与临床症状的相关性,厌氧菌与广泛性根尖周病变有关 产黑色素的革兰阴性厌氧杆菌如中间普雷沃菌，牙龈卟啉单胞菌，以及福赛斯坦纳菌、具核梭杆菌、微小消化链球菌、优杆菌在急性根尖周炎和非开放性牙髓多见,与根尖部黑色分泌物、疼痛、肿胀、恶臭和瘘管形成有关 粪肠球菌、放线菌、微小消化链球菌与难治性根尖周病变和瘘道不易愈合有关； 中间普雷沃菌、微小消化链球菌和放线菌的联合存在与根尖骨质破坏有关 细菌类型在个体之间存在差异,病原菌感染的细菌学特点,内源性感染为主,正常菌群的易位是重要启动因子 厌氧菌为优势病原菌。 混合菌感染 细菌类型与感染途径和病灶位有关 临床症状与细菌种类有密切相关。,
