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1、实验一母种培养基配制及棉塞制作,一.实验目的 1、 掌握食用菌固化培养基的配制。 2、学会棉塞 的制作方法。 二、基本原理食用菌母种分离、移接和斜面保存菌种都必须要制作相应的培养基，以备食用菌的培养、分离和保存之用。培养基是根据各种食用菌在生长繁殖过程中对营养物质需求制成的，它可供给食用菌的C源、N源、水分、各种无机盐及生长物质等。培养基的种类很多，本实验学习斜面培养基（PDA）制作。,三.实验准备 1.器具： 天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、漏斗架、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、棉花、线绳、牛皮纸、皮筋、纱布、电炉、菜刀、菜板、小铝锅等。2材料
2、： 马铃薯、葡萄糖或蔗糖、琼脂、水。 四、实验内容过程：制马铃薯滤液融化琼脂培养基的分装 棉塞的制作方法步骤：,1配方（PDA）：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂1520g，自来水1000ml，pH自然。2制作方法 （1）制滤液： 马铃薯刮去粗皮，去芽眼，切成碎块，称量后放锅中，加水12001300ml，将其煮沸20min。用双层纱布过滤，取1000ml滤液。,（2）化琼脂： 将滤液加热至将沸腾时加入琼脂，不断搅拌，注意控制火力不要使培养基溢出或烧焦。待琼脂完全融化后加入剩余原料，并使其溶解（用热水补足水量）.,（3分装 :通过漏斗装置，趁热将培养基分装于试管中，装量约占试管高度的1/4（分
3、装三角瓶，其,装量以不超过其容积的一半为宜）。注意管口或瓶口不要沾染培养基。 （4）制棉塞 棉花以白色长绒脱脂棉为宜。根据试管口大小取棉，将其卷成棉塞，最好 外包一层纱布。将棉塞塞入试管口。棉塞塞入试管2/3。制做棉塞要求外表光滑，外包的纱不能折、松紧适宜等。,A.正确; B.不正确,（5） 包扎： 管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。 （6）、灭菌 （7）、摆斜面 （8）、存放冰箱（4-6C）六、作业 1、简述高压灭菌锅的使用。 2、何谓灭菌？简述热力灭菌的类型和原理。 3.何时加入琼脂？融化时注意什么问题？分装的技术要求有哪些？4. 棉塞的作用有哪些和技术要求？菌种培养时管口堵胶塞或软木塞行吗？为什么？,
