华西医科大学组织学与胚胎学 1绪论1

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1、绪 论 Introduction,主要内容,发展史 组织学与胚胎学基本规律 研究方法 学习方法 同步练习,忠告:,你想学好这门科学吗?你先了解它的历史吧!Lvshaowen,你要研究生命吗?你首先研究细胞吧!MG.Schleiden,一、组织胚胎学发展史 上的重大事件,公元前,古希腊,亚里士多德(Aristotle)最 早对胚胎发育进行唯物的观察,改变 了神造万物的迷信观。 1590,荷兰,Hans父子发明了显微镜(10倍)。 1609,意大利,伽利略(Galileo)发明望远镜。 1651,英国,哈维(Harvey)及Redi观察到胚胎 发育源于卵,发表了论动物的生殖。 1661,意大利,马

2、尔裴基(Malpighi).用放大 镜观察了动、植的微细结构,发现了蛭 的毛细血管和血液循环。,1665,马尔裴基和英国的虎克(Hooker) 研制了新型显微镜,虎克观察软木 塞,发现了“Cell”。 1668,Hedi提出了“一切生命来自卵”。 1672,荷兰,格拉夫(Graaf)发现卵子。Bonnet,Malpighi等主张“卵源说”。 1677,荷兰,列文胡克(Leeuwenhoek)发 现精子。主张“精源说”。Spallanzani进行了人工受精实验, 揭示了胚胎始于受精卵之迷。,1745,Bonnet发现蚜虫的孤雌生殖,成为“先成论”的主流。 1768,德国,沃尔夫(Wollff)首

3、次提出“胚层”的概念,发表了“渐成论”。 1801,法国,比沙(Bichat)首用法文 Tissu编织物(21种)Tissue组织。 1819,德国,迈尔(Mayer)创用希腊文Histo(组织,8种)+logy组织学。 1828,德国(爱沙尼亚),贝尔(Baer)创立了 比较胚胎学,提出了胚层学说和贝尔法则。(各种动物胚胎演变、发育愈早愈相似)。,1831,布朗(Brown)发现了细胞核。 1838-1839,德国,施莱登(Schleiden) 和施万(Schwann,雪旺)创立了细 胞学说,被誉为十九世纪三大发现之一。(守恒定律,进化论) 1841,瑞士,柯立克(Kolliker)阐明精子

4、也是一种细胞。 1844,柯立克进一步认为卵也是细胞,通 过分裂发育成个体。 1855,德国,雷马克(Remark)提出三胚层学说。,1856,德国,魏尔啸(Virchow)提出细胞 是一切疾病的基础,建立了细胞病 理学。 1859,英国,达尔文(Darwin)发表物 种起源,称贝尔法则正是种与种 间亲缘关系和物种进化的路线特征。 1860,德国,穆勒(Mller)和海克尔 (Haeckel)提出“重演律”。 1870,德国,阿伯(Abbe)提出显微镜理论。,1873,意大利,Golgi法创立(镀银显示整个神经元)。 1892,德国,Nissl法创立。发现Nissl体。 1903,西班牙,Ca

5、jal法创立(镀染神经纤维, 胞体轴突和神经原纤维)。 1906,Golgi和 Cajal获诺贝尔奖。 1932,德国,科诺尔(Knols)和卢斯卡(Ruska)发明了电子显微镜。 1935,德国,斯佩曼(Spemann)提出诱导学说,发展了实验胚胎学,获诺贝尔奖。 1985,Knols和 Ruska因发明电镜获诺贝尔奖。,1986,Binnig和Rohrer因发明扫描隧道显 微镜,获诺贝尔奖。 1978,英国诞生了第一例“试管婴儿”,成为体外受精技术走向成熟的划时代 事件。鉴于我国学者张觉民对生殖生物学的杰出贡献,当选为美国科学院院士。 1997,用成体细胞核移植成功的克隆羊 “多莉”,在英

6、国爱丁堡诞生。轰动 世界。,组织结构 发生两性细胞形成 细胞 器官 功能 受精卵 系统 人体 分裂、分化组织学(Histology) 研究机体微细结构及其相关功能的科学。 胚胎学(Embryology) 研究个体发生和生长及其发育机理的科学。,二、组织学与胚胎学基本规律,1. 细胞 概念 细胞是机体形态结构、生理功能和生长 发育的基本单位。结构 细胞膜 细胞质 Ri、RERSER、Mi Go、Ly Mt、 Mf、Mb 细胞核,细胞超微结构模式图,核糖体(Ri.):合成蛋白质。 粗面内质网(RER):合成蛋白质。 高尔基复合体(Go.):浓缩、加工、包装。形成糖蛋白类分泌物及溶酶体。 滑面内质网

7、(SER):合成类固醇激素, 参与糖、脂代谢,灭活激素,解毒, 调节离子交流。线粒体(Mi.):产生ATP,供给能量。 溶酶体(Ly.):消化分解细胞内异物。 微管(Mt.):参与支架,运输,变形运动。,微丝(Mf.):参与支持,变形运动,胞 质流动。 微体(Mb.过氧化物体):氧化多种有毒 物质,解毒。 染色质(Chromatin):由DNA与蛋白质组 成。 染色体(Chromosome):细胞分裂时染色质的细丝螺旋盘曲。 常染色质:分裂后子细胞染色体部分解螺旋,电子密度高。 异染色质:未解螺旋的染色体。,2细胞外基质 概念 细胞产生的非细胞物质。 组成 纤维 基质 体液(血浆、淋巴、组织液

8、) 功能;参与构成细胞生存的微环境,对细胞起 支持、联系、营养、保护作用对细胞的分化、运动、信息沟通有重要影响。 3组织 概念 细胞群和细胞外基质组成。 基本组织 上皮组织 结缔组织 肌组织 神经组织,1. 光学显微镜和电子显微镜技术 (1)标本制备LM TEM 取材 (3-5)mm3 1mm3 固定 甲醛、酒精、 戊二醛、四氧化鋨、 苦味酸 多聚甲醛 包埋 石蜡、火棉胶 树脂 切片 石蜡、 超薄切片50-80nm冰冻切片5-10m 染色 HE 重金属电子染色 结果 嗜碱性物质-蓝色 电子密度高-黑色嗜酸性物质-红色 电子密度低-色浅,三、 研究方法,(2)分辨率 LM: 0.2m EM: 0

9、.2 nm (3)计量单位 1m =1/1000mm 1 nm =1/1000m (4)HE染色 概念:H(Hematoxylin,苏木精)碱性染料 E(Eosin,伊红)酸性染料 原理:电耦合现象H+X-盐蓝色 (胞核)=嗜碱性E-Y+盐红色 (胞质)=嗜酸性与两者亲和力都不强 =中 性组织或细胞内的成分被某些碱性染料染色后呈紫红色,称异染性。,(5)重金属电子染色 概念 利用重金属(醋酸铀,柠檬酸铅)浸染 超薄切片的染色方法。 正染色 当电子束密度大,吸附重金属多的结构电子散射多射落到荧光屏的电子少成暗像(黑色)称电子密度高。反之,浅染的部分称电子密度低。 负染色 若被染结构着色浅淡,而其

10、周围部分染成黑色,则为负染色。,2组织化学和细胞化学术 (1)概念 通过化学或物理反应原理显示组织或细胞内某种(糖、脂、酶、核酸)化学成分,进行定位、定量及其与功能相关的研究。 (2)PAS反应 显示多糖和蛋白多糖的一种组织化学方法。多糖+HIO4多醛+schiff剂紫红色,3. 其它研究方法 (1)免疫组织化学术 应用抗原抗体特异性结合的原理, 检测组织、细胞内肽类、蛋白质及膜 表面抗原和受体的技术。 (2)原位杂交 是一种核酸分子杂交技术,根据碱基配对的原则,利用已知碱基序列的核酸探针,与待测的核酸进行特异性原位结合。对核酸进行定位定量检测。,(3)放射自显影通过活细胞对放射性物质的特异性

11、摄入,以显示该细胞的功能状态,或该物质在组织和细胞内的代谢过程。 (4)图像分析术可定义为:从一幅图像中提取特定数据的定量处理技术。是在计算机技术、体视学理论等基础上发展起来的。形态计量学是定量分析生物组织宏观或微观水平的二维或三维结构的科学,包括平面测量学和体视学。平面测量学是反映二维图像特征的理论和方法,是体视学推论的基础。体视学是研究二维与三维相互转换的理论与技术的科学。,(5)细胞培养术模拟体内条件,对细胞、组织、器官进行体外培养。研究其代谢、增殖、分化、形态和功能,以及各种理化因子对活细胞的直接影响。(6)组织工程利用细胞培养术,在体外模拟构建组织或器官的技术。(皮肤、软骨、骨肌腱、

12、骨骼肌、血管和角膜等),四、学习方法,1结构与功能 2局部与整体3理论与实践 4静态与动态5平面与立体6. 组织学研究的四个水平组 织 细胞细胞外基质 细 胞 分布形态亚细胞 结构 (细胞生物学)分 子 功能 (分子生物学),同 步 练 习,一、填空 1.组织是由_和_构成。2组织切片的常用染色方法为染色,其中代表_,代表_。可将细胞核染成_色,可将细胞质染成_色。,细 胞,细胞外基质,苏木精,伊红,紫 蓝,红,同 步 练 习,二、单项选择 1. 用光镜观察的组织切片厚度一般为( ) A.50-80nm B.50-80m C.5-10m D.5-10nm E.5-10mm 2. 用电镜观察的组织切片厚度一般为( ) A.50-80nm B.50-80m C.5-10m D.5-10nm E.5-10mm,C,A,同 步 练 习,二、单项选择 3. 光镜的分辨率可达( )A.0.2nm B.0.2m B.2nm D.2m E.2mm 4. 电镜的分辨率可达( ) A.0.2nm B.0.2m C.2nm D.2m E.2mm,B,A,同 步 练 习,答案: HE染色是采用苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)对组织切片进行染色的最常用的染色方法。苏木精是一种碱性染液, 将细胞核染成蓝色;配制后的伊红是一种酸性染液, 将细胞质染成红色。,三、名词解释: HE染色,

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