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虾肌肉蛋白的提取,小飞守角制作,主要内容,凡纳滨对虾肌肉蛋白的提取方案,对虾前处理,取对虾肌肉组织500mg,剪碎、液氮研磨至粉末状,添加裂解液,离心,凡纳滨对虾弃头剥壳、去肠、去血，用蒸馏水洗净沥干水分，于-18贮藏备用,500L，4孵育1-2h,分装于离心管中（50mg/管）,13000 r/min低温（4）离心2h抽提，即为蛋白样品，于-18保存备用,定量检测蛋白质浓度,考马斯亮蓝法,分组,讨论,从对虾内部选取肌肉组织。 对虾全身覆盖着一层几丁质壳，去壳时不能保证完全去除这层薄膜，而且肌肉中必定存在着肉眼无法辨别的结缔组织。,肌肉组织的选取,-18保存。 对虾在-20、-30、-40蛋白变性差异不显著（陶欢，2010）。,对虾保存,讨论,液氮研磨,低温,蛋白结构,讨论,浓度8mol /L尿素、浓度2 mol /L 硫脲、浓度2% CHAPS、浓度10l /mL PMSF、 浓度18 mmol /L DTT、浓度0 .5% IPG缓冲液。,8 M尿素9.6g，4% CHAPS 0.8g，40 mM Tris 0.0484g，用前每1mL裂解液中添加5L Carrier Ampholyte（载体两性电解质）, 200 mM TBP（三正丁基磷） 10L。,裂解液,裂解液,讨论,Thank You！,
