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1、机能学实验,实验目录,实验目录,机能学实验目的,使学生正确使用生理学的基本实验仪器，初步掌握基本操作技术； 使学生了解获得知识的基本方法和初步分析整理实验结果的能力，并借以验证和巩固理论课的某些基本理论。 在实验过程中培养学生对科学工作的严肃的态度，严格的要求，严密的工作方法和实事求是的工作作风。 通过实验逐步培养学生具有敏锐的观察力，比较、分析和综合的能力以及独立思考的能力，以便循序渐进地完成医学院校学生基本技能的训练任务。,实验报告的书写,自行操作的实验，每人均须做实验报告，学期终了将全部报告交给指导老师考核。 实验报告应在下一次实验前交给指导教师，无特殊原因不得延误。 题头部分：班级、姓
2、名、学号、组别、实验时间、实验题目实验室号、指导教师 正文：目的 实验器材 方法步骤 结果 结果分析及讨论 结论,实验室规则,遵守纪律，因故外出或早退应向老师请假。进实验室必须穿隔离衣。实验时应严肃认真，不进行与实验无关的活动。 实验者必须先熟悉仪器使用要点，仪器损坏或失灵，应请老师修理或调换。违章操作致使仪器损坏者，应按章赔偿。 实验器械，用后洗净擦干，如数归还。若有损坏或遗失，应及时报告，酌情赔偿。 爱护公物，节约器材、药品和动物。实验物品不得擅自带离实验室。 实验结束，将本组实验器材和桌凳收拾干净，将动物尸体及污物投放指定处。实验室由各组轮流打扫，保持整洁。,实验一 坐骨神经腓肠肌标本的
3、制备刺激强度和频率与骨骼肌收缩的关系,目的要求,1、学习坐骨神经腓肠肌标本制备方法。 2、观察不同的刺激强度和频率与骨骼肌收缩形 式之间的关系。,实验器材,1.药品与器材 任氏液。蛙板，玻璃板，蛙类手术器械1套(粗剪刀、组织剪、眼科剪各1把，大、小镊子各1把，探针1根，玻璃分针2根)，培养皿，锌铜弓，丝线，图钉，肌动器，张力换能器；BL-410生物机能实验系统。 2.实验对象 蟾蜍。,方法步骤 1.制备坐骨神经腓肠肌标本破坏脑和脊髓-图A 剪去躯干上部及内脏-图B 剥皮 、洗手及器械、分离两腿 制作坐骨神经腓肠肌标本-图C.D用锌铜弓检查标本兴奋性,A,B,C,D,2.将标本固定在肌动器内，连
4、接张力换能器。 3.打开电脑，进入BL-410生物机能实验系统。实验项目神经肌肉实验刺激强度与反应的关系刺激频率与反应的关系,结果 1. 阈刺激、阈上刺激、最大刺激,2.单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩,注意事项1. 实验过程中经常用任氏液湿润标本，以防干燥。 2. 股骨不可保留过短，否则标本不好固定。 3. 分离神经须用玻璃分针，不能用金属器械。 4. 避免过长时间地连续刺激标本，以防标本疲劳。,思考题,1为什么要用任氏液湿润标本？ 2锌铜弓为什么能够检验神经肌肉的兴奋性？,实验二 神经干动作电位的引导、传导速度和不应期的测定,目的要求,学习神经干标本的制备。 观察坐骨神经干的单相、双相
5、动作电位、双向性传导并测定其传导速度。 观察机械损伤对神经兴奋和传导的影响. 学习绝对不应期和相对不应期的测定方法. 了解蛙类坐骨神经干产生动作电位后其兴奋性的规律性变化.,实验器材,1.仪器与材料：生物信号处理系统、解剖针、手术剪、眼科剪、圆头手术镊、尖头手术镊、玻璃勾针、神经屏蔽盒及连接导线，棉花、蛙板、烧杯。 2.药品：任氏液 3.动物：蟾蜍或蛙,方法步骤,1.坐骨神经干标本的制备 毁脑脊髓 剪除躯干上部及内脏 剥皮（之后洗净双手和用过的全部手术器械） 完成坐骨神经标本 分离两腿 游离坐骨神经 完成坐骨神经标本,剪除躯干上部及内脏 图4-1-4 剥去皮肤,标本的制备,2.连接实验装置 3
6、.实验观察 双相动作电位的观察： 单项动作电位的观察：在两记录电极之间滴上KCl溶液，观察动作电位的变化。观察到变化后，用任氏液洗掉KCl溶液，直至动作电位恢复。 刺激强度与复合动作电位幅值的关系 测定神经干动作电位的传导速度。 不应期的测定：,动作电位传导速度的测定 Measurement of Conduction Velocity of AP,+,S,t,刺激器,输入通道,R1- Rr1+ R2- R2+,双相动作电位 Biphasic Action Potential,注意事项,标本剥制过程，尽量减少神经的损伤； 刺激参数设置要合理，过大会损毁神经。 双刺激的参数要一致。,结果,观察和
7、记录神经干动作电位并对其特性进行分析； 测出动作电位的各个时期； 测出绝对不应期和相对不应期。,解释在一定范围内神经干动作电位的振幅随刺激强度而改变，是否与单个神经纤维动作电位的“全”或“无”定律相矛盾？ 改变神经干的方向后，动作电位的波形发生了什么变化，为什么？ 分析KCl溶液对动作电位影响的机理。 利用现有仪器和记录动作电位的方法，设计一个测定坐骨神经不应期的实验，讲清楚实验原理？,思考题,实验三 呼吸运动的调节及影响因素（综合实验）,目的要求 1、学习用BL-420E生物机能实验系统描记呼吸运动的方法。 2、观察某些神经体液因素对呼吸的影响。 3、观察药物对呼吸运动的影响。 4、掌握实验
8、动物呼吸运动的描记方法。,实验器材 1、仪器与材料BL-420E生物机能实验系统，哺乳类动物手术器械、气管插管、50CM的橡皮管、缝合针、呼吸换能器 2、药品25氨基甲酸乙酯、3%乳酸、CO2气体2%盐酸吗啡，10%尼可刹米 3、动物健康家兔，体重2-3Kg,方法步骤 （一）手术操作1.称重、麻醉、固定2.颈部手术，气管插管，分离双侧迷走神经，3.剑突部位剪毛，将连接换能器的缝合针，固定于剑突处。 （二）仪器连接,（三）实验观察项目1、描记正常呼吸曲线（频率，幅度）2、增大解剖无效腔3、增加吸入气中CO24、耳缘静脉注射3乳酸0.5ml5、观察药物对呼吸的影响腹部皮下注射2盐酸吗啡，呼吸抑制。
9、立即耳缘静脉注射10尼可刹米100mg,观察呼吸变化。,6、先剪断一侧迷走神经，观察呼吸变化，再剪断对侧迷走神经观察呼吸变化。 7、电刺激迷走神经中枢端，观察呼吸的变化。,注意事项 1、气管插管时，注意防止切口出血过多，避免吸入肺影响肺通气。 2、每项实验均要有正常呼吸曲线作为前后对照 思考题 1、缺O2、CO2和H+对呼吸运动的影响机制有何不同？ 2、分析迷走神经在节律呼吸运动中起何作用? 3、吗啡、尼可刹米对呼吸运动有何影响？作用机制是什么？,实验四 蛙心起搏点的观察、期前 收缩与代偿间歇、蟾蜍心脏灌流，胃肠运动观察（录像）,目的要求1.学习暴露蛙类心脏的方法，熟悉心脏的结构。2.观察心脏
10、起搏点以及各部分的自律性高低和心脏的兴奋性传导顺序。 实验原理1. 两栖类动物的心脏解剖2. stannius结扎 实验器材 动物：蟾蜍 仪器及药品：蛙类手术器械，丝线，任式液。,一、蛙心起搏点的观察,方法步骤1.破坏脑脊髓 。2. 仰卧位固定于蛙板上。3.打开胸腔暴露心脏 ，观察心脏的结构 。4. 斯氏结扎，记录结果。,实验结果及理论分析,斯氏结扎记录表（次/分钟）,两栖类动物的心脏为两心房、一心室，心脏的起搏点是静脉窦。静脉窦的自动节律最高，心房次之，心室最低。正常情况下，心脏的活动节律服从静脉窦的节律，其活动顺序为：静脉窦、心房、心室。,实验目的1学习在体蟾蜍心跳曲线的记录方法。2观察心
11、脏在兴奋过程中兴奋性的变化。 实验原理心肌的有效不应期（收缩期，舒张早期） 实验器材动物：蟾蜍仪器及药品：BL-420生物实验系统，刺激电极，蛙心夹，张力换能器，蛙类手术器械，任式液。,二、蟾蜍心室的期前收缩与代偿间歇,方法步骤1. 破坏脑脊髓 2.仰卧位固定于蛙板上。3. 打开胸腔暴露心脏4. 蛙心夹于心脏舒张期夹住心尖 5. 连接张力换能器和刺激器6. 选择合适的刺激强度 ；分别在心室舒张的早期、中期和晚期给予单个刺激，观察心跳曲线的变化。,实验结果,讨论,结论,1. 蟾蜍毁髓时要彻底。 2. 实验过程中，应经常用任氏液湿润心脏。 3. 刺激电极要与心室肌接触良好，应避免短路。 4. 心跳
12、曲线的上升支应代表心室收缩，下降支代表心室舒张，如相反则应将换能器倒向。 5. 先用刺激电极刺激蟾蜍的腹壁肌肉，以检测强度是否适宜。 6. 每个组蛙心夹留在支架上，勿丢失。,注意事项,思考题,1.正常情况下，为什么静脉窦是蟾蜍心脏的起搏点？它对潜在起搏点如何控制？ 2.每次结扎后会出现什么现象，为什么？ 3.如何证实心肌有较长的不应期？心肌的较长不应期有何生理意义？ 4.期前收缩后一定出现代偿间歇吗？为什么？ 5.代偿间歇是怎样产生的？ 6.为何期前收缩幅度有时比正常心缩幅度高，有时比正常心缩幅度低？ 7.为何心肌有期前收缩而骨骼肌不会出现？,窦房沟,实验五 心血管活动的神经体液调节及影响因素
13、(综合实验),目的要求,学习哺乳类动物动脉血压的直接描记方法； 观察神经体液因素对心血管活动的影响； 掌握哺乳类动物手术常规； 熟悉BL-420生物机能实验系统； 复习相关理论课内容。,实验器材,1.仪器与材料：BL-420生物机能实验系统，压力传感器，塑料动脉插管 2.药品：25氨基甲酸乙酯（麻醉），1：10000去甲肾上腺素（升压）5%肝素（抗凝） 3.动物：家兔,arterial cannula,Urethane,方法步骤,1.称重、麻醉、固定： 25氨基甲酸乙酯4mL/kg(理论估计值)由耳缘静脉缓慢注入，观察麻醉指征。背交叉固定 2.颈部手术：a.剪毛，气管插管b.分离右侧颈部迷走神
14、经，减压神经c.分离双侧颈总动脉（carotid artery）d.左侧颈总动脉插管，先结扎远心端，在近心端夹动脉夹，向近心端插入动脉插管。,3.观察项目 a.正常血压曲线，向上为血压升高，向下为血压降低。 b.用动脉夹夹闭右侧颈总5-10s c.电刺激右侧减压神经，观察 d.结扎右侧迷走神经，并剪断，观察 e.电刺激右侧迷走神经外周端，观察 f.注射1：10000去甲肾上腺素0.10.5mL,注意事项,1一项实验后，须持血压基本恢复后再进行下一项实验。 2.随时注意动脉套管的位置，特别是动物挣扎时，避免扭转插管阻塞血流或裁穿血管。 3.随时注意动物麻醉的深度，如实验时间过长，动物经常挣扎，可
15、补注少量麻醉剂。 4.刺激神经之前，应先检查是否有刺激电流输出。 5.神经需刺激时才拉出，不要一直由保护电极勾住，防止神经干燥。,思考题 1.分析每一实验观察项目引起血压变化的机制。 2.通过本实验掌握了那些基本操作方法？,实验六 减压神经、膈神经放电,目的要求 1、学习哺乳类动物在体神经干（减压神经和膈神经）动作电位引导的方法。 2、观察减压神经放电特点以及血压升降时神经冲动的变化 3、观察膈神经放电的特点以及与呼吸的关系。 4、观察神经体液因素对减压神经和膈神经放电的影响。,实验器材 1、仪器与材料哺乳类动物手术器械、引导电极、电极固定架、BL410生物机能实验系统、监听器 。 2、药品2
16、5氨基甲酸乙酯、1:10000去甲肾上腺素、CO2 3、动物健康家兔，体重1.52.5Kg,方法与步骤 （一）手术操作1、称重、麻醉、固定2、颈部手术，气管插管3 、先分离一侧减压神经， 引导放电（滴加石蜡油）4、后分离膈神经，引导放电（滴加石蜡油）,（二）仪器连接把减压神经或膈神经搁置在悬空的引导电极上，注意勿使神经牵拉太紧；引导电极不可触及其它组织；在创口内滴入温液体石蜡，防止神经干燥。,放大器,监视器,监听器,引导电极,（三）实验观察项目 1、正常减压神经放电（监听到类似于火车开动声）观察显示器屏幕上减压神经群集放电的节律、波形和振幅，及其与血压的关系。其节律与心律同步，幅度约为30100V，大小随血压高低而变化。一簇群集放电的波形为先大后小的三角形。 2、耳缘静脉注射10-4去甲肾上腺素0.5ml观察膈神经放电,
