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1、生物安全实验室 操作技术规范,曾爱平,目录,基本原则 日常管理规范 实验室安全管理规范 实验操作技术规程 生物安全实验室运行的基本规范 感染性物质的操作与防护规范 生物安全柜,不安全因素,安全意识不强 人为操作错误 实验技术欠佳 仪器的错误使用 良好的操作技术规范对实验室生物安全至关重要,实验室SARS病毒感染事件,新加坡的实验室sars感染事件2003年9月新加坡一研究生在环境卫生研究院实验室感染SARS病毒，是P3实验室，病毒样本储存系统、消毒措施、进出实验室的保安系统等，都存在缺陷， 台湾地区的实验室感染事件 2003年12月，台湾的SARS研究人员在实验室感染SARS病毒。是台湾唯一的
2、“BSL-4” 实验室，因未能遵守规章，操作疏忽而感染SARS。 CDC实验室受到SARS感染的两名工作人员腹泻病毒室跨专业从事非典病毒研究，采用未经论证和效果验证的非典病毒灭活方法，在不符合防护要求的普通实验室内操作非典感染材料，发现人员健康异常情况未及时上报。,重点：,仅有先进的设施、设备和装备还不足以保证实验室的生物安全，作为实验室活动主体的操作者必须履行良好的行为规范才能最大限度保证实验室的生物安全。 良好的生物安全实验室技术规范要满足保护操作者和实验环境的要求，必要时还要考虑对操作对象的保护。,对于良好的实验室操作技术规范每个操作者都必须时刻铭记在心。 对于每一个新进入实验室的工作人
3、员都应该给予严格的训练，以使其掌握正确的要领，避免养成不良的习惯，从而保证以正确的意识、操作技术和工作习惯展开工作。 养成正确的生物安全意识非常重要，它可以使操作者最大限度的保护自己，避免失误和事故的发生，哪怕即使发生意外，也会进行妥善的处理。,基本原则：,不管是谁，从事实验活动都应遵循基本原则： 所有操作人员必须经过培训，通过考核，获得上岗证书； 在开始相关工作之前，应对所从事的病原微生物和其他危险物质以及相关操作进行危险评估，根据国家对于各种微生物操作的危险等级划分和防护要求以及危险评估的结果，制定全面、细致的标准操作规程和程序文件。对于关键的危险步骤设计出可行的防护措施并对这些细节了然于
4、胸。,熟悉各级生物安全实验室运行的一般规则，掌握各种仪器、设备、装备的操作步骤和要点，进行正确的操作和使用，对于各种可能的危害应非常熟悉； 应掌握各种感染性物质和其他危险物质操作的一般准则和技术要点。,基本原则：,实验室的生物安全技术规范，包括但不仅限于实验室运行的基本规范、仪器设备的使用规范、针对感染性材料、危险化学品、放射性核素等的操作规范以及个人防护用品的使用规范等。,一、日常管理规范,人员控制 仪器设备搬入和移出 防虫及防节肢动物措施 清洁与消毒 水电安全管理,一）人员控制规范,、人员专业和安全培训、持证上岗 、禁止独自进入实验室工作 、有禁忌症的人员不得进入实验室工作 、孕妇暂时离开
5、实验岗 、实习进修人员不得独自开展实验活动 、参观、检查人员须经管理部门审批、持证进入 、后勤保障人员应经过相关培训、持证进入 、厂商维修人员须持管理部门准入证进入。 、严禁在实验室会客。,二）设备,、实验室应为大型设备应进出留出通道（设备门） 、实验室应有足够的电力供应设施 、考虑设备的摆放空间 、实验室考虑足够的承重水平 、先前考虑设备的维修通道和位置 、移出实验室的设备应经过前面的消毒，消毒方法可采用擦洗表面和整体熏蒸的措施，消毒方法不应损害设备的安全和使用性能。 、摆放的位置应符合要求,三）防虫及防节肢动物措施规范,、有自动闭门系统 、有放昆虫和节肢动物的设施，如纱窗、挡板等 、实验室
6、门窗的密闭性能应符合要求 、实验室送、排风管道有安全措施，防止小型动物或昆虫从管道进入实验室。,四）清洁与消毒规范,1、实验室应保持整洁，定期进行消毒。 2、实验活动结束后及时清理实验台面，清理实验器具，并进行前面消毒。 3、实验室消毒方法与消毒程序应符合规定要求。 4、消毒剂应采用符合国家标准、质量合格的产品，不得使用未经验证和过期的消毒剂。 5、消毒时间应严格按照规定要求，不得随意缩短或改变。 6、消毒剂应现配现用，并在规定的时间内使用。 7、消毒和灭菌方法应根据消毒对象的具体情况进行选择。,五）水、电安全管理规范,1、实验室应加强对水、电的管理 2、避免常明灯、长流水等现象 3、禁止超负
7、荷用电 4、设备使用后及时切断电源 5、对需要连续通电的设备，要定期进行巡视，特别是节假日期间更应注意巡查。 6、使用电炉、灭菌器等设备时应做到全程有人监管。 7、实验室发生断电、停电、停水时应及时检查，切断电源或关闭水龙头，防止发生以外。 8、生物安全实验室应有可靠的电力供应，最好有双路供电或有备用电源，保证重要设备的正常运行和实验室的安全。,二、实验室安全管理规范,一）完善管理体系文件,1、相应的安全管理制度和规定 2、实验设备的管理制度和操作程序 3、实验检测规程和标准操作程序 4、实验室人员准入和项目准入制度 5、实验室进、出程序 6、实验废弃物消毒、处理规程 7、实验室意外事件处置预
8、案和处置规程,8、实验人员健康监测与个人健康档案制度 9、个人安全防护制度 10、实验室事故报告制度和报告程序 11、人员培训制度 12、菌毒种安全管理和运输、保存制度 13、样本收样、保存制度和操作程序 14、,二）人员管理规范,专业素质和专业技能要求与培训 1）具备相关专业知识（操作技术、规程等） 2）具备必要专业技能（操作技能掌握） 3）检测技术培训、特别是新技术、新方法的培训 安全知识和防护技能要求 1）经过系统的生物安全培训 2）熟悉和掌握必要的安全防护知识和个人防护技能 3）了解从事岗位工作的风险和防护要求,仪器设备操作与维护培训要求 1）熟悉掌握相关设备的性能和操作要求 2）掌握
9、设备操作程序 3）熟悉设备故障的保修和维护程序及要求,实验室消毒与废弃物处置培训等 1）经过培训实验人员掌握实验室消毒方法、消毒程序及消毒剂的性能和特点 2）掌握各种实验废弃物的消毒灭菌要求和处理程序,实验室意外事件的处置培训 、实验操作意外1）感染物质外溢（污染台面、地面等）2）感染物质的暴露（躯体或面部暴露） 、意外损伤1）刺伤2）割伤 、吸入感染物质,、实验设施发生的意外 、停电 、火灾 、水灾 、地震等,三、实验操作技术规程,实验人员应熟悉掌握实验室进出程序、各种检测技术、设备操作、消毒灭菌等操作规程和要求。 、实验室出、入操作规程1）进入准备2）个人防护用品使用及检查程序3）实验室进
10、入、腿退出的规定程序4）实验室设施的开启程序,、实验室检测项目操作规程病原学检测血清学检测分子生物学检测病毒培养样本离心、干燥、纯化等操作程序,、设备使用和操作规程使用程序维护程序检定程序校准程序报废程序,、实验室消毒灭菌规程）实验室消毒器具消毒台面消毒地面消毒实验室空间消毒送排风管道消毒消毒剂的配制等,2）实验室废弃物消毒灭菌操作程序固体废弃物消毒程序废液消毒程序包装材料消毒程序 3）重点掌握消毒灭菌方法和时间及消毒剂种类与浓度浸泡、高压、焚烧、煮沸消毒等消毒剂种类、使用浓度、消毒时间等,、实验室意外事故处置预案及处置程序、事故报告程序,、实验数据记录和传输规程1）实验检测的原始记录2）实验
11、检测数据传输程序3）实验数据安全保密程序等,四、生物安全实验室运行的基本规范,一）BSL-2实验室人员控制规范,实验室的人员进入实验室负责人应根据要求对进入实验室的人员加以控制。未经批准或允许，任何人不得擅自进入实验室。严禁儿童进入实验室工作区域。不允许可能增加获得性感染的危险性或 感染后可能引起严重后果的人员进入实验室 或感染动物房。,BSL-2实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志，包括通用的生物危险性标志，标明传染因子、实验室负责人或其他人员姓名、电话以及进入实验室的特殊要求。 实验室的门应保持关闭状态。 与实验工作无关的动物不得带入实验室。,二）工作人员的防护规范,在实验室工作时，
12、必须穿戴合适的工作服或防护服。 工作人员可能接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物以及其他有害物质的操作时，应戴上合适的手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手。,在处理完感染性实验材料和动物以及其他有害物质后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手。 为了防止眼睛或面部受到喷溅物的污染、碰撞或人工紫外线辐射的伤害，必须戴合适的安全眼镜、面罩或其他防护设备。,严禁穿着实验防护服离开实验室工作区域。 不得在实验室内穿露脚趾的鞋。 禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理角膜接触镜。 禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。 在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一
13、柜子内。,三）有关操作的指导原则,严禁用口吸移液管，严禁将实验室材料置于口内。严禁舔标签。 所有的实验操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的方式来进行。 应限制使用注射针头和注射器。除了进行肠道外注射或抽取实验动物体液外，注射针头和注射器不能用于移液或用作其他用途。,实验室应制定并执行处理溢出物的标准操作程序。出现溢出、事故以及明显或可能暴露于感染性物质时，必须向实验室负责人报告。实验室应如实记录有关暴露和处理的情况，保存相关记录。,污染的液体在排放到生活污水管道以前必须清除污染（采用化学或物理学方法）。根据所处理的微生物因子的危险评估结果准备专门的污水处理系统。 只有保证在实验室内没有受到污
14、染的文件纸张才能带出实验室。,四）实验室工作区的管理原则,实验室应保持清洁整齐，严禁摆放和实验无关的物品。 每天工作结束后应清除工作台面的污染。若发生具有潜在危险性的材料溢出应立即清除污染。 所有受到污染的材料、标本和培养物在废弃或清洁再利用之前，必须先清除污染。,感染性材料的包装和运输应遵循国家和/或国际的相关规定。 如果窗户可以打开，则应安装防止节肢动物进入的纱窗。,五）生物安全管理的指导原则,实验室负责人负责制订和采用生物安全管理计划以及实验室安全或/和操作手册。 实验室应当能提供常规的实验室安全培训，并建立培训制度。,实验室负责人（或生物安全负责人）要将生物安全实验室的特殊危害告知实验室人员，同时要求他们阅读生物安全或/和操作手册。所有实验室人员必须经过培训，了解所从事工作的危险、掌握有关的管理规定和操作手程序，通过考核后方可从事相关实验室工作。,应当制订节肢动物和啮齿动物的控制方案。 如有必要，应为所有实验室人员提供适宜的医学评估、健康监测和治疗，并建立健康档案。 实验室人员应接受与所操作生物因子或实验室内潜在的生物因子相关的免疫接种或检测。,谢谢！,
