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2、。 Day 4: 离子交换层析；透析；凝胶过滤层析。 Day 5: SDS-PAGE；染色；脱色，观察结果。 记得带照相机 ！,鸣谢： 生命学院生物科学104班 邹兵 周嘉 赵琅 李运彰 汪源,无菌操作,原核：E.coli 真核：YeastInsectmammals,蛋白质表达,Vector: pET series, pGEX series, gateway series, pMAL, pTWIN I, pETDuet, et. al.,原核表达系统,BL21(DE3), BL21(DE3, pLysS), Origami, Rosetta, Rosetta-gami Top10, HB101, C41/C43,E.Coli host,能否用BL21(DE3)表达pGLO？ 能否用Top10表达pET32a？,思考：,OD600=0.6-0.8，加入诱导剂； OD600=1.2-1.4，收获菌体；诱导剂用量IPTG: 0.2mM; 0.5mM; 1mM 诱导温度20；25/28 ；37 ,Culture conditions,如何留样能在一张SDS-PAGE胶图中(10-12 wells)体现诱导的效果、(NH4)2SO4粗分离效果、疏水层析纯化效果、离子交换层析纯化效果、凝胶过滤层析纯化效果？,留样set control,HIC,IEC,GFC,样品体积对分辨率的影响,
