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1、第第 8 课时课时 专题复习专题复习一、核心概念整理训练 1 下表表示在不同培养基中细菌的生长繁殖情况。 (A、B、C、H、I、J、K、M 为培养基的成分， “”表示生长， “”表示不生长)，请分 析下列哪种物质细菌不能合成( ) 培养基 成分A、B、CA、B、C、I、MA、B、C、H、KA、B、C、M、J生长状态 培养基 成分A、B、C、I、KA、B、C、H、JA、B、C、K、M生长状态A.H BI CK DM 训练 2 实验测定链霉素对 3 种细菌的抗生素效应，用 3 种细菌在事先准备好的琼脂 平板上画 3 条等长的平行线(3 条平行线与含链霉素的带接触)，将平板置于 37条件下恒 温培养
2、 3 天，结果如下图所示，从实验结果看，以下关于链霉素的叙述不正确的是( )A它能阻止结核杆菌生长 B它对结核杆菌比对霍乱菌更有效 C它对结核杆菌比对伤寒菌更有效 D它可以用于治病伤寒病人 二、微生物技术 1培养基的制备：(以牛肉膏蛋白胨固体培养基为例)计算称量溶化灭菌倒平 板。 2无菌技术 (1)实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等，常用的消毒方法 有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法等，对不同的对象需采用不同的消毒或灭菌 方法。 (2)微生物培养时获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术围绕着如何 避免杂菌的污染展开，主要包括以下内容： 对实验操作的空间、
3、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 为避免周围环境中微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 3倒平板操作：待培养基冷却至 50左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，严格遵循 教材上的操作步骤。 4平板划线操作：平板划线法通过接种环在琼脂固体培养表面连续划线的操作，将 聚集的菌种逐步稀释分解到培养基的表面。 5稀释涂布平板法：先将菌液进行系列稀释，然后涂布平板，在稀释度足够高的菌液 里，聚集在一起的微生物将被分解成单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落。 训练 3 在微生物培养过程中，
4、需要对培养基等进行灭菌，其标准是( ) A杀死所有的病原微生物 B杀死所有的微生物 C杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子 D使病原菌不生长 训练 4 请根据所学知识回答以下问题。 (1)有 2 位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品的细菌数。在对应稀释倍数为 106 的培养基中，得到以下两种统计结果：甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数 为 230；乙同学在该浓度下涂布了 3 个平板，统计的菌落数分别为 21、212、256，并且取 平均值 163 作为统计结果。请评价这两位同学的实验结果的合理性。 甲同学_，原因是 _。 乙同学_，原因是 _。 正确做法是_ _ _。稀释涂布平板法所用
5、培养基按物理性质划分属于_培养基； 倒平板前保证培养基无菌的常用方法是_。 (2)生物工程常需分离酵母菌和 Taq 耐热菌，分离方法常用选择培养基。如用加高浓度 食盐的适宜培养基，分离金黄色葡萄球菌。请提出从含细菌、酵母菌和 Taq 耐热菌的培养 液中分离酵母菌和 Taq 耐热菌的方案。 分离酵母菌：_。 分离 Taq 耐热菌： _。 三、微生物的代谢类型及选择培养基在微生物培养中的应用 1微生物的代谢类型 (1)根据能否将 CO2合成有机物可分为：自养型生物与异养型生物。 营养类型碳源氮源生长因子自养型微生物CO2、NaHCO3 等含碳无机物NH3、铵盐、 硝酸盐等一般不需 要异养型微生物糖
6、类、脂肪酸等铵盐、硝酸盐、 蛋白质等有些微生 物需要 (2)划分依据：自养微生物与异养微生物类型划分的主要依据是能否以无机碳作为生长 的主要或唯一碳源，而与氮源无关。自养微生物 以 CO2或碳酸盐为主要或唯一碳源进行代 谢生长；异养微生物必须以有机物作为碳源进行代谢生长。 2选择培养基在微生物培养中的应用 (1)在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生 长的培养基，称为选择培养基。在配制选择培养基时，往往要在培养基中加入某种化学物 质。例如，当需要酵母菌和霉菌时，可以在培养基中加入青霉素，以抑制细菌和放线菌的 生长，从而分离出酵母菌和霉菌；在培养基中加入高浓度的
7、食盐溶液可以抑制多种细菌的 生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，可以将金黄色葡萄球菌分离出来。 (2)分离某种目的菌株，应根据它对营养和环境的特殊要求，设计合理的选择培养基。 训练 5 若大肠杆菌和圆褐固氮菌混合在一起，采用下列哪组培养基可将它们分离( ) A加食盐的培养基和牛肉膏蛋白胨培养基 B伊红美蓝培养基和无氮培养基 C斜面培养基和液体培养基 D加青霉素的培养基和液体培养基 训练 6 微生物与人类关系密切。虽然有些微生物能使动植物患病，但多数微生物对 人类是有益的。请回答有关微生物及其应用的问题。 (1)表一、表二为两种微生物的培养基配方。 表一 成分含量 KH2PO41.4 g Na2
8、HPO42.1 g MgSO47H2O0.2 g 葡萄糖10.0 g 尿素1.0 g 琼脂15.0 g 表二 成分含量 纤维素粉5.0 g NaNO31.0 g Na2HPO47H2O1.2 g KH2PO40.9 g MgSO47H2O0.5 g KCl0.5 g 酵母膏0.5 g水解酪素0.5 g 上述两种培养基中的物质溶解后，均与蒸馏水定容到 1 000 mL。 如果要进行土壤中分解尿素的细菌的分离，则需要选择哪种培养基？_，该 培养基能分离尿素分解菌的原因是 _。 在该培养基中可加入_指示剂，根据指示剂的颜色，可鉴定该种细菌能够分 解尿素。 从功能上来看，上述两种培养基均属于_培养基。
9、 (2)在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板_ 放置，这样做的目的可防止_造成污染。 (3)微生物接种的方法很多，在用平板划线法操作结束时，为什么仍需要灼烧接种环？ _。一、选择题 1有关培养基配置原则表述正确的是( ) A任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子 B碳源和氮源必须具有一定比例，碳元素的含量最多，其次为氮元素 C微生物的生长除受营养因素影响外，还受到温度、pH、氧、渗透压等的影响 D营养物质的浓度越高越好 2下列操作与消毒灭菌无关的是( ) A接种前用肥皂洗双手，再用酒精擦试双手 B接种前用火焰灼烧接种针(环) C培养基在 50左右时搁
10、置斜面 D在酒精灯的火焰旁完成倒平板的操作 3不能够与刚果红反应生成红色复合物的是( ) A纤维二糖 B纤维素 CCMCNa D淀粉 4鉴别培养基是根据微生物的代谢特点在培养基中加入一些物质配制而成的，这些物 质是( ) A指示剂或化学药品 B青霉素或琼脂 C高浓度食盐 D维生素或指示剂 5产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是( ) A一个细菌、液体培养基 B许多细菌、液体培养基 C一个细菌、固体培养基 D许多细菌、固体培养基 6下列属于菌落特征的是( ) 菌落的形状 菌落的大小 菌落的多少 隆起程度 颜色 有无荚膜 A B C D 7在做分离分解尿素的细菌实验时，A 同学从对应 1
11、06培养基上筛选出大约 150 个菌 落，而其他同学只选择出大约 50 个菌落。A 同学的结果产生原因不可能有( ) A由于土样不同 B由于培养基污染 C由于操作失误 D没有设置对照 8下列关于细菌的叙述，错误的是( ) A硝化细菌能以 NH3作为氮源和能源物质 B某些细菌可以利用光能固定 CO2合成有机物C生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质 D含伊红和美蓝试剂的培养基不能用来鉴别牛奶中的大肠杆菌 二、简答题 9某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、 灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。 (1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉
12、，分别为细菌培养提供了_和 _。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_和_。 (2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是 _。 (3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于_ 中培养，培养的温度设定在 37。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接 种_作为对照进行实验。 (4)培养 20 小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有 _种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_。 (5)如果提高培养基中 NaCl 的浓度，可以用于筛选耐 _ 细菌，这种培养基被称为_。 10自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一
13、般要将它们分离提 纯，然后进行数量测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。步骤 如下： A制备稀释倍数为 102、103、104、105、106的系列稀释液。 B为了得到更加准确的结果，你选用_(稀释混合平板法、稀释涂布平板 法)接种样品。 C适宜温度下培养。 结果分析： (1)测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为 106的培养基中，得到以下几种统计结果， 正确可信的是( ) A一个平板，统计的菌落数是 23 B两个平板，统计的菌落数是 22 和 26，取平均值 24 C三个平板，统计的菌落数分别是 21、5 和 52，取平均值 26 D四个平板，统计的菌落数分别 是 21、30、24 和 25，取平均值 25 (2)一同学在稀释倍数为 105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为 23.4，那么每毫 升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为 0.2 mL) _。 (3)用这种方法测定密度，实
