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1、专题专题 3 植物的组织培养技术植物的组织培养技术第第 9 课时课时 菊花的组织培养菊花的组织培养目标导航 1.了解植物组织培养技术在生产中的应用和 MS 固体培养基的配方。2.熟 悉植物组织培养的基本过程和影响植物组织培养的因素。3.理解细胞分化的概念及离体植 物细胞的脱分化和再分化。一、基础知识 1植物组织培养的基本过程 (1)细胞全能性的表达：_的植物组织或细胞，在一定的 _、_和_的作用下，发育成完整植株的过程。 (2)细胞分化：在植物的_过程中，细胞在_、_和_ 上都会出现_的差异，形成这些差异的过程叫做细胞分化。 (3)植物组织培养的基本过程 离体的植物器官、组织或细胞(又叫_)愈
2、伤组织胚状体、丛芽等新个体生长愈伤组织的特点：细胞_，是一群_的呈 _的薄壁细胞。 脱分化(去分化)：由_的植物组织或细胞产生_的过程。 再分化：由_重新分化成根或芽等器官的过程。 (4)条件：_的植物组织或细胞，在一定的_、_和其他外界条件 的作用下就可能表现出全能性，发育成完整植株。离体的植物组织或细胞叫做_。 2影响植物组织培养的因素 (1)培养材料的影响：不同的植物组织，培养的难易程度_。对于同一种植 物材料，材料的_、_等也会影响实验结果。因此菊花的组织培养， 一般选择_的茎_部_的侧枝。 (2)营养物质的影响：常用的_培养基，主要成分包括 _、_、_以及蔗糖等。其中_和_ 提供植物
3、细胞所必需的无机盐；_提供碳源，维持细胞渗透压。 (3)植物激素的影响：MS 培养基常需添加植物激素。其中_和_是 启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，这两种激素的 _、_以及_等，都会影响实验结果。 下表是关于两种植物激素在组织培养过程中的作用。 使用顺序或用量比实验结果 先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于_，但细胞_ 先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞_ 同时使用分化频率_ 生长素用量/细胞分裂素用量，比值高有利于_的分化、抑制_的形成 生长素用量/细胞分裂素用量，比值低有利于_的分化、抑制_的形成 生长素用量/细胞分裂素用量，比值适中促进_的形成 (4)环境因素的影响：_、_、_
4、等条件也能影响植物组织培养。 二、植物组织培养的操作流程 1制备 MS 固体培养基：将各种营养成分按比例配制成_。利用母 液配制菊花组织培养所需要的培养基，菊花的组织培养比较容易，因此可以不加激素，而 如果是其他植物的组织培养，则要配制成三种培养基，即 _、_和_。配制菊花的组织培养的培养基时先将称好的琼脂加入 800 mL 蒸馏水中，加热使_熔化；然后加入 _30 g，加入一定量的_，充分混匀后加蒸馏水定容至 1 000 mL，调 节_；最后分装到锥形瓶中，每瓶分装 50 mL 或 100 mL。用包在纱布中的棉塞封 严瓶口，外面包一层牛皮纸。将配制好的培养基放入_锅，在 121下灭 菌 1
5、5 min。 2外植物体消毒：选取生长旺盛的菊花的嫩枝，先用清水洗净，再用体积分数为 _浸泡 67 s 后，立即取出并用无菌水清洗，取出后吸干水分再放入质量 分数为_中浸泡 12 min。取出后，在无菌水中至少清洗 3 次，漂净消 毒液。 3接种：在超净工作台上铺上无菌滤纸，将已消毒的菊花茎段切成小段(长 0.51.0 cm)，迅速接种到培养基上。插入时应注意方向，使嫩茎的形态学下端接触培养基，不要 _。每瓶接种 68 块嫩茎。接种后，将锥形瓶的瓶口在酒精灯火焰上转动灼烧一遍， 将封口膜重新扎好，贴上标签，做好记录。 4培养：接种后的锥形瓶放在_中培养。培养温度应控制在 1822，并 且每日用
6、日光灯光照 12 h，并定期进行_，保持适宜的_和_。 5移栽：当小苗长到 56 cm，基部形成根原基的时候，即可进行移栽。试管苗是在 无菌、充分营养供给、适宜的光照和温度以及 100%相对湿度环境中生长的。刚出瓶的试 管苗对外界环境不太适应。将试管苗培养瓶的瓶口敞开一半，放置在 2025的遮阴环境 中，适应 714 d。若试管苗不萎蔫、有新生长的趋势，便可将试管苗取出，小心洗净粘在 根上的培养基，植入盛有_等材料的花盆中，浇足水分，罩上带 孔的塑料薄膜，将花盆放置在 2025的阴凉处 35 d。待幼苗长出新叶时，揭去塑料薄 膜，再过 710 d，幼苗即可移栽到土壤里。 6栽培：将幼苗移载后，
7、每天观察并记录幼菌生长情况，适时浇水、施肥，直至开花。提醒 (1)植物组织培养一定要采用无菌技术。(2)实验选材是实验成功的关键。知识点一 植物组织培养的基本过程及影响因素 1请回答下列有关植物组织培养的几个问题。 (1)离体植物组织和细胞培养常用的一种培养基是_，其主要成分中的大量 元素有_，培养基中常用的两种植物激素是_和_，两者 使用时的_、_、_等，都会影响实验的结果。 (2)下图表示植物组织培养的部分过程： 离体的器官、 组织或细胞A植物体 过程是_，过程是_，A 是_。 (3)组织培养过程中还需要维持一定的外界条件，一是要有适宜的_，二是 _。 2下列关于影响植物组织培养因素的说法
8、，正确的是( ) A不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同 B在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素 C植物激素中，生长素和细胞分裂素的作用是相互独立的 DpH、温度、光照条件等对植物组织培养也特别重要 知识点二 植物组织培养操作过程 3下列哪组符合菊花组织培养的基本步骤( ) A制备 MS 培养基外植体消毒接种培养移栽栽培 B制备 MS 培养基外植体消毒接种培养栽培移栽 C制备 MS 培养基外植体消毒接种栽培培养移栽 D制备 MS 培养基外植体消毒接种移栽培养栽培4关于植物组织培养的内容，以下说法错误的是( ) A一般来说容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培
9、养 B对菊花茎段进行组织培养，不加植物激素 也能成功 C接种后的锥形瓶放入无菌箱中，给予适宜的温度和光照即可 D移栽生根的试管苗之前，先打开瓶口，让试管苗在培养间生长几日一、选择题 1下列关于植物组织培养中植物激素使用的说法，不正确的是( ) A植物组织培养中的关键性激素是生长素和细胞分裂素 B先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞分裂和分化 C先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂又分化 D同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向 2下列关于消毒的叙述，正确的是( ) A制备的 MS 固体培养基可用 70%的酒精消毒 B70%的酒精对外植体消毒效果好，但用时
10、长，去除易 C0.1%的氯化汞对外植体消毒效果最好，用时短，去除也易 D试管苗长成后，需移栽到经过消毒的蛭石或珍珠岩中生活一段时间，然后再移栽 到土壤中栽培 3当植物脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，下列有可能使其表 现出全能性，发育成完整植株的是( ) A细胞分裂素 B生长素 C一定的营养物质 D以上三者均是 4关于 MS 培养基与微生物培养基的配方相比不同之处，说法错误的是( ) AMS 培养基中常常添加植物激素，微生物培养基中不需要 BMS 培养基中的碳源和能源是蔗糖，微生物培养基中的碳源和能源主要是葡萄糖 CMS 培养基中需提供植物生长必需的大量元素和微量元素 DMS
11、培养基中不需加维生素，微生物培养基中要加维生素作生长因子 5下列对植物组织培养过程中的脱分化的叙述，正确的是( ) A植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞的过程 B体内分化的细胞形态、结构和功能发生改变的过程 C高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程 D愈伤组织分裂产生大量相同细胞的过程 6月季组织培养选材部位最佳的是( ) A幼嫩的花瓣 B枝条基部的芽 C枝条中部的芽 D幼嫩的叶 7在植物组织培养过程中，生长素用量与细胞分裂素用量的比值高时，下列描述正确 的是( ) A有利于根的分化和芽的形成 B不利于根的分化和芽的形成 C有利于芽的形成，抑制根的分化 D有利于根的分化，抑制芽的
12、形成 8影响植物组织培养的因素包括( ) 培养基的配制 外植体的选取 激素的运用 消毒 温度、pH、光照 A B C D 9下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是( ) A培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 B培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的形成和分化 C离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织D同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因组成相同 10某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染，为查找污染原因设计了 4 个实验， 实验条件除图示外其他均相同。下列各图表示实验结果，据图可得出的初步结论是(多选)( )A污染主要不是培养基灭菌时间短造成的
13、 B污染主要来源于组织培养所用的离体组织 C调节培养基 pH 不能解决污染问题 D调节培养温度不能解决污染问题 二、简答题 11某班同学在学完菊花的组织培养内容之后，决定利用课余时间去实践这项技术， 培养出美丽的菊花来美化教室的环境。 (1)在制备 MS 固体培养基时先根据_进行计算。MS 培养 基含有_种营养成分。其中_6 种元素属大量元素， _8 种元素属微量元素，能源物质是_。由于菊花的茎段组织 培养比较容易，所以不必加_。 (2)将分装好的培养基连同培养器械一起进行_灭菌。 (3)选取菊花的_部分进行外植体消毒，在消毒时既要考虑 _，又要考虑_ _，所以分别用_的酒精和_的 氯化汞消毒，消毒时间不宜过长。 (4)接种时要特别注意_
