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1、学_EFISH技术在乳腺癌检测中的应用荣光原位杂交(FISH)喜Pluorescenceinsituhybridization么细胞遗传学技术么原理:通过荧光标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂交习观察:荧光显微镗原位览察(细胞、组织)细胞核彩色探针信号么目的:获得细胞内多条染色体(或染色体片段)或多种基因状态的信息。薯FISH原理用已知的标记单铿核酸为探针,按照碱基互补的原d则,与待检材料中未知的根河单链核酸进行弃忘结合,形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分二在染色体上是沿着染色体纵轴呈线性排列,因而可以探针直接与染色体进行杂交从而将特定的基因在染色体上定位FISH技术的特点操作简
2、便,探针标记后穗定,可与多种技术结合,方法敏感,能迅速得到结果探针为直接标记,特异性好,信号强标本来源丰家,间期细胞,分根中期细胞、分化或未分化细胞及死亡或存活的细胞皆可以被检测FISH探针的种类CSB探针:桦色体着丝粒探针5aGLp探针:位点特弃性探十La0视余视佳WPP探针;全机(屋荨章染色体区性探针)|菖曼5DAT操作流程简图薹“破坏细胞膜利于探针杂交。*蛋白酶消化、HCI处理乳腺癌Her-2基因孩一。TheHER(erbB)familyHer-2基因表达的蛋白产物为人表皮生长因子受体-2(humanepidermalgrowthfactorreceptor-2),也称为neu、C-er
3、bB-2、Her-2/neu。乳腺癌Her-2基因攸癌基因:Her-2基因;位点:17ql1.2-q12;仁-一编码蛋白:踞膜蛇白(与【*表皮生长因子受体部分同源);25-30史乳腺癌病人都有HER-2的扩增;塞罩雕蹦HER-2基因扩增是决定EEHerceptin治疗是否有效的关键性指标。Her-2基因的检测方法根检测方法|检测指标优点缺点费用低准确性差,主观性MH英白光镜即可观察结果强,假阳性率高对低度扩增及染色CISHHer-2DNA|“光镜即可观察结果体非整倍扩增检测灵敏度下降Herzpth翼菖予低倍、高倍染袁体er-非整供性扩增检测准确5沥FISH性高,灵敏度特弃性好,相对费用较高结果判断客观薯HER-2检测和荣光原位杂交技术(FISHDFISH成为检测HER-2的金标准FISH方法的操作简单,探针重复性好检测结果明确,只需计数红绿信号的比例,方法简单、直观结果可以通过软件分析,客观
